Page 79 - 《广西植物》2021年第10期

ϟԡ 期 武 志 强 等 ᧥ 植物细胞器基因编辑研究进展 ϟ ᤃ ጢ ँ

左上图显示ᖔ᧧᥋ఋᔀ׹᧧ 内切酶包括 શ 端催化结构域ྉ黄色不规则图形ɯܦऊ 端 ᧕શዶ 结合结构域ྉ红色矩形ɯᖔ以及中间的连接体ྉ黑
线ɯ三部分ᤥ 野生型 ᧧᥋ఋᔀ׹᧧ 的 શ 端融合到 ఋዶᓂጶશ 的 ᧕શዶ 结合骨架的 શ 端或 ऊ 端ᤥ 用 ఋዶᓂጶ᥋᪵શϟጢ԰ ᣰ ᪵ऊ԰԰ԡ 支架取代 ᧧᥋ఋᔀ׹᧧ 的 ऊ
端 ᧕શዶ 结合域ᖔ从而保留野生型 ᧧᥋ఋᔀ׹᧧ 的天然 શ᥋ऊ 端布局ᖔ最终生成融合 ዹఋዶᓂጶશྉ如图中生成的两种融合结果ɯᤥ
᧧ᡷ ᔽ༁ ༁ၤᆍऔႿ ᔽႿ ᡷၤᔀ ஦ᔽ੫ࣼʢᔀ ᑕᤦᆍ׹ᔀ ᤟ᔀ஦ᡷᖔ ᡷၤᔀ ᧧᥋ఋᔀ׹᧧ ᔀႿʛᆍႿࣼዹ᤟ᑕ༁ᔀ ዹᆍႿ༁ᔽ༁ᡷ༁ ᆍ஦ ᡷၤʢᔀᔀ ᡱᑕʢᡷ༁᧥ ᡷၤᔀ શ᥋ᡷᔀʢቝᔽႿᑕ᤟ ዹᑕᡷᑕ᤟ᢃᡷᔽዹ ʛᆍቝᑕᔽႿ ྉᢃᔀ᤟᤟ᆍऔ ᑕႿʛ ࣼႿ༁ᡷʢࣼዹᡷࣼʢᔀʛ
ᡱᑕᡷᡷᔀʢႿɯᖔ ᡷၤᔀ ऊ᥋ᡷᔀʢቝᔽႿᑕ᤟ ᧕શዶ᥋ᤦᔽႿʛᔽႿ੫ ʛᆍቝᑕᔽႿ ྉʢᔀʛ ʢᔀዹᡷᑕႿ੫᤟ᔀɯᖔ ᑕႿʛ ᡷၤᔀ ᔽႿᡷᔀʢቝᔀʛᔽᑕᡷᔀ ዹᆍႿႿᔀዹᡷᆍʢ ྉᤦ᤟ᑕዹҴ ᤟ᔽႿᔀɯ঎ ఋၤᔀ શ᥋ᡷᔀʢቝᔽႿᑕ᤟ ᆍ஦ ᡷၤᔀ औᔽ᤟ʛ᥋ᡷᢃᡱᔀ ᧧᥋
ఋᔀ׹᧧ ᔽ༁ ஦ࣼ༁ᔀʛ ᡷᆍ ᡷၤᔀ શ᥋ᡷᔀʢቝᔽႿᑕ᤟ ᆍʢ ऊ᥋ᡷᔀʢቝᔽႿᑕ᤟ ᆍ஦ ᡷၤᔀ ᧕શዶ᥋ᤦᔽႿʛᔽႿ੫ ༁ዹᑕ஦஦ᆍ᤟ʛ ᆍ஦ ఋዶᓂጶશ঎ ఋၤᔀ ऊ᥋ᡷᔀʢቝᔽႿᑕ᤟ ᧕શዶ᥋ᤦᔽႿʛᔽႿ੫ ʛᆍቝᑕᔽႿ ᆍ஦ ᧧᥋ఋᔀ׹᧧ औᑕ༁
ʢᔀᡱ᤟ᑕዹᔀʛ ᤦᢃ ᡷၤᔀ ఋዶᓂጶ᥋᪵શϟጢ԰ᣰ ᪵ऊ԰԰ԡ ༁ዹᑕ஦஦ᆍ᤟ʛᖔ ᡷၤࣼ༁ ᡱʢᔀ༁ᔀʢ׹ᔽႿ੫ ᡷၤᔀ Ⴟᑕᡷࣼʢᑕ᤟ શ ᡷᆍ ऊ ᡷᔀʢቝᔽႿᑕ᤟ ᤟ᑕᢃᆍࣼᡷ ᆍ஦ औᔽ᤟ʛ᥋ᡷᢃᡱᔀ ᧧᥋ఋᔀ׹᧧ᖔ ʢᔀ༁ࣼ᤟ᡷᔽႿ੫ ᔽႿ ᡷၤᔀ ஦ࣼ༁ᔽᆍႿ ᆍ஦
ዹఋዶᓂጶશ ྉᡷऔᆍ ஦ࣼ༁ᔽᆍႿ ʢᔀ༁ࣼ᤟ᡷ༁ ੫ᔀႿᔀʢᑕᡷᔀʛɯ঎
图 ሕজ ዹఋዶᓂጶશ 设计合成过程图ྉାᔀࣼʢʛᔀ᤟ᔀᢃ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟሕɯ
èᔽ੫঎ ሕজ ఋၤᔀ ʛᔽᑕ੫ʢᑕቝ ᆍ஦ ᡷၤᔀ ༁ᢃႿᡷၤᔀ༁ᔽ༁ ᡱʢᆍዹᔀ༁༁ ᆍ஦ ዹఋዶᓂጶશ ྉାᔀࣼʢʛᔀ᤟ᔀᢃ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟሕɯ

从 શ 端到 ऊ 端形成 ᥘఋ୩᥋ቝᔽᡷᆍఋዶᓂጶ᥋༁ᡱ᤟ᔽᡷ᥋᧕ʛʛዶ ᡷᆍ଴ ᥋В᥈᧧ 结构ᤥ
ఋၤᔀ ᥘఋ୩᥋ቝᔽᡷᆍఋዶᓂጶ᥋༁ᡱ᤟ᔽᡷ᥋᧕ʛʛዶ ᡷᆍ଴ ᥋В᥈᧧ ༁ᡷʢࣼዹᡷࣼʢᔀ औᑕ༁ ஦ᆍʢቝᔀʛ ஦ʢᆍቝ શ ᔀႿʛ ᡷᆍ ऊ ᔀႿʛ঎
图 ࿗জ ᧕ʛऊାጶ༁ 线粒体基因编辑技术原理图ྉᥘᆍҴ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡ԰ԡɯ
èᔽ੫঎ ࿗জ ୩ዹၤᔀቝᑕᡷᔽዹ ʛᔽᑕ੫ʢᑕቝ ᆍ஦ ᧕ʛऊାጶ༁ ቝᔽᡷᆍዹၤᆍႿʛʢᔽᑕ᤟ ੫ᔀႿᔀ ᔀʛᔽᡷᔽႿ੫ ᡷᔀዹၤႿᆍ᤟ᆍ੫ᢃ ྉᥘᆍҴ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡ԰ԡɯ

与 ఋዶᓂጶ 融合进行线粒体碱基编辑ᖔ形成 શ 端到 ऊ 粒体中 ᧕શዶ 单碱基的替换无意义ᤥ 为了防止这
端的ᥥᥘఋ୩᥋ቝᔽᡷᆍఋዶᓂጶ᥋༁ᡱ᤟ᔽᡷ᥋᧕ʛʛዶ ɼ连接结构ᖔ实现 一现象的发生ᖔ研究者巧妙地在上述构建的碱基
ᡷᆍ଴
ቝᡷ᧕શዶ 上胞嘧啶 ऊ 脱氨基变成尿嘧啶 Вྉ ᥘᆍҴ ᔀᡷ 编辑 器 的 ऊ 端连接了 В᥈᧧ ྉ શᔽ᤟༁ᔀႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ϟँँᎮଫ
ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡ԰ԡɯᤥ 然而ᖔ由于 В 是组成 ኏શዶ 的碱基ᖔ一 ᣽ᆍቝᆍʢ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟᎮଫèࣼᔀႿᡷᔀ༁ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟऐɯᖔ最终形
旦 ᧕શዶ 中出现了 Вᖔ其就会在尿嘧啶糖基化酶的 成ᥥ ᥘఋ୩᥋ቝᔽᡷᆍఋዶᓂጶ᥋༁ᡱ᤟ᔽᡷ᥋᧕ʛʛዶ ᥋В᥈᧧ɼ 结构ྉ 图 ࿗ɯᤥ
ᡷᆍ଴
作用下重新转变成 ऊᖔ因此就相当于该编辑器对线 这样就可以保护 В 免受糖基化酶的干扰ᖔ一直以