Page 31 - 《广西植物》2022年第11期

ϟϟ 期 石 杨 等 ᧥ 水稻 ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 基因的克隆及表达分析 ϟ ऐ ԰ ሕ
ᡷၤᔀ ʢᔀ᤟ᑕᡷᔽ׹ᔀ ቝᆍ᤟ᔀዹࣼ᤟ᑕʢ औᔀᔽ੫ၤᡷ ᆍ஦ ϟᤃ঎ϟጢ࿗ Ҵ᧕ᑕ঎ ྉ԰ɯ ᧣໧᤹ଧÞϟዞ औᑕ༁ ዹ᤟ᆍ༁ᔀ᤟ᢃ ʢᔀ᤟ᑕᡷᔀʛ ᡷᆍ ௴ʐ᤹ଧÞϟᐹॹϟᖔ ᑕႿʛ ዹᔽ༁᥋ᑕዹᡷᔽႿ੫ ᔀ᤟ᔀቝᔀႿᡷ༁
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জজ 近年来ᖔ随着人类工业化进程的加快ᖔ干旱ܦ盐 本研究对水稻中的 ᤹ଧÞϟ 基因家族进行了生
碱化和重金属污染问题对农作物的威胁日趋严重ᖔ 物信息学分析ᖔ并以水稻为材料ᖔ利用 ۪ऊ኏ 方法克
其中重金属污染问题尤为突出ᤥ 镉ྉऊʛɯ 作为一种 隆得到了 ᧣໧᤹ଧÞϟዞྉ ᒦ᧣ࣷᡸ᧣໧ԡᤃ੖ሕँ԰࿗ԡɯ 基因的全
重金属ᖔ因其具有高毒性ᖔ即使在土壤中以较低浓 长编码区ྉ ዹᆍʛᔽႿ੫ ༁ᔀीࣼᔀႿዹᔀᖔ ऊ᧕୩ɯᤥ 在此基础上ᖔ
度存在ᖔ也会对农作物产生极强的毒性ᖔ进而影响 采用实时荧光定量 ۪ऊ኏ྉ ኏ఋ᥋ी۪ऊ኏ɯ 方法对 ऊʛ 处
农作物的生长发育ྉఋᆍᡱᡱᔽ ᪲ ᥈ᑕᤦᤦʢᔽᔀ᤟᤟ᔽᖔ ϟँँँଫ金枫 理下不同水稻组织中 ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 的相对表达量进行
等ᖔ԰ԡϟԡɯᤥ 水稻ྉ᧣ʗᡥऊᐹ ໧ᐹᡙᔠצᐹɯ 作为我国重要的粮 分析ᤥ 旨在探究以下问题᧥ྉϟɯ 水稻 ᥘାèϟ 蛋白家
食作物ᖔ其生长发育受到土壤中 ऊʛ 的严重危害 族亲缘进化关系ܦ理化性质以及结构特征ଫྉ԰ɯ 水
ྉԻၤᔀႿ੫ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡ԰ϟɯᤥ 因此ᖔ如何改善重金属对水 稻 ᤹ଧÞϟ 基因家族成员在 ऊʛ 胁迫下的表达变化
稻生长发育的影响并解决籽粒中的重金属积累问 情况ଫྉሕɯ 水稻 ᥘାèϟ 在缓解 ऊʛ 危害过程中的潜
题ᖔ对未来培育耐 ऊʛ 水稻品种以及保障粮食生产 在功能ᤥ 本研究结果将为耐镉水稻品种的培育提
安全均具有重要意义ᤥ 目前ᖔ水稻应对重金属胁迫 供潜在的基因资源ᖔ同时为进一步解析该基因在

的转录调控机制的研究较为广泛ᖔ相关转录因子ܦ 水稻中应对重金属胁迫的调控机制奠定基础ᤥ
转录调节因子等因对抗胁迫功能基因的表达起着
重要调节作用ᖔ而一直成为研究热点ᤥ 多蛋白桥联 ϟজ 材料与方法
因子 ϟྉቝࣼ᤟ᡷᔽ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ ᤦʢᔽʛ੫ᔽႿ੫ ஦ᑕዹᡷᆍʢ ϟᖔ ᥘାèϟɯ是植物
处于生物及非生物胁迫应答过程中起重要作用的 ϓॹϓ 材料
转录调节因子之一ྉۼᑕႿ੫ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟᎮɯᤥ ᥘାèϟ 蛋 水稻种子于 ࿗ቩ 保存ᤥ 选健康种子放入适量
白主要由 શ 端ᥥᥘାèϟɼ结构域和 ऊ 端ᥥም᥋螺旋᥋Ꮗ᥋转 无菌水中ᖔሕԡ ቩ 催芽 ࿗ऐ ၤᤥ 将发芽种子置于 ϟᣰ ԰
角᥋ም᥋螺旋ɼ结构域组成ᖔ可通过桥联转录激活因子 ᥘ୩ 液体培养基中ᖔሕԡ ቩ 温室进行光照 ϟᤃ ၤ ᣰ 黑暗
和 ఋା۪ྉఋዶఋዶ᥋ାᔽႿʛᔽႿ੫ ۪ʢᆍᡷᔀᔽႿɯ 调控多种信号转导 ऐၤ 交替培养ᖔጢ ʛ 后选取同一生长阶段的幼苗进
途径并激活多种防御因子ᖔ最终提高植物在逆境胁 行 ऊʛऊ᤟ ྉϟԡԡ ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ɯ 胁迫处理ᖔ经时间梯度
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ྉϟܦᤃܦϟ԰ ၤɯ 处理后采集地上部分和根部ᖔ并将其
迫 下 的耐受性 ྉ ᥘᔽ᤟᤟ᔀʢ༁ၤᔽᡱ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡԡ࿗ଫ Ȯᑕᔽቝᔀ༁᥋
ᥘᔽʢᑕႿʛᑕ ᪲ ऊၤᘪ׹ᔀझ ᥘᆍႿᡷᔀ༁ᖔ ԰ԡ԰ԡ ɯᤥ 拟南芥 立即用液氮进行速冻ᖔ置于ͱऐԡ ቩ 冰箱保存备用ᤥ
ྉዛʗᐹᤇᔠʐᅳᡓ໧ᔠ໧ ᡙ၊ᐹᤀᔠᐹႥᐹɯܦ小麦ྉ௴ʗᔠᡙᔠዞࣩቂ ᐹᓣ໧ᡙᔠצࣩቂ ɯܦ菊花 ϓॹԣ ᧣໧᤹ଧÞϓዞ 基因克隆
ྉࣷ၊ʗᡥ໧ᐹႥᡙ၊ᓣቂࣩቂ ቂᅳʗᔠஏᅳᤀᔠࣩቂɯ中 ᤹ଧÞϟ 基因家族可参 ϟ঎԰঎ϟ 总 ኏શዶ 提取和 ዹ᧕શዶ 第一链合成জ 将 ऊʛऊ᤟ ԰
与调控植物应对热ܦ氧化和干旱等胁迫反应ྉ୩ࣼझࣼҴᔽ 处理的水稻组织参照 ዶᔽʛ᤟ᑕᤦ 公司的 ጶዶ୩ɟ༁ᡱᔽႿ ۪᤟ࣼ༁
ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡԡጢଫ۪ᑕቝᔀ᤟ᑕ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟԡଫ Իၤᑕᆍ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ ԰ԡϟँɯᤥ 植物 ኏શዶ 快速提取试剂盒的说明书进行总 ኏શዶ
然而ᖔᥘାèϟ 是否参与植物应对重金属胁迫通路ᖔ以 的提 取ᤥ 提取成功 后ᖔ 取 ϟ ԡԡԡ Ⴟ੫ ኏શዶᖔ 参照
及是否可能缓解植物因重金属而引起氧化损伤等 ఋၤᔀʢቝᆍèᔽ༁ၤᔀʢ 公司 ఋၤᔀʢቝᆍ ୩ዹᔽᔀႿᡷᔽ஦ᔽዹ ኏ᔀ׹ᔀʢᡷዶᔽʛ èᔽʢ༁ᡷ
的相关研究却少见报道ᤥ 此外ᖔ对 ᥘାèϟ 的研究也 ୩ᡷʢᑕႿʛ ዹ᧕શዶ ୩ᢃႿᡷၤᔀ༁ᔽ༁ ᣽ᔽᡷ 反转录试剂盒说明书进
仅仅局限于拟南芥ܦ小麦等物种ᖔ在水稻中潜在的 行反转录合成 ዹ᧕શዶ 第一链ᤥ
功能和作用机制的研究则较少ᖔ而水稻作为我国重 ϟ঎԰঎ ԰ ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 基因的克隆 和 测 序 জ 根据水稻

要的粮食作物之一ᖔ研究其抗逆机理显得尤为重要ᤥ ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 基因的 ऊ᧕୩ 序列设计引物 ᧣໧᤹ଧÞϟዞ᥋è ᣰ