Page 35 - 《广西植物》2022年第11期

ϟϟ 期 石 杨 等 ᧥ 水稻 ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 基因的克隆及表达分析 ϟ ऐ ԰ Ꭾ
ᨃ༁ᥘାèϟዹ 与这些植物的 ᥘାèϟ 氨基酸序列同源性
介于 ࿗ϟ঎԰ँᠮ ጲ ँऐ঎ጢँᠮ之间ᤥ 其中ᖔ水稻 ᨃ༁ᥘାèϟዹ
与二粒小麦 ఋʛᥘାèϟᑕ঎ϟ 的同源性最高ᖔ而与玉米
Իቝጶ᧕኏è ϟ঎ ϟ 的同源性最低ᤥ 为 进 一步了解
ᨃ༁ᥘାèϟዹ 与其他植物的 ᥘାèϟ 蛋白之间的进化关
系ᖔ利用 ᥘጶ᥈ዶ Ꭾ঎ԡ 的 શᔀᔽ੫ၤᤦᆍʢ᥋ȮᆍᔽႿᔽႿ੫ 方法构建系
统进化树ྉ 图 ጢɯ 进行分析ᖔ结果显示 ᨃ༁ᥘାèϟዹ 与
二粒小麦 ఋʛᥘାèϟዹ঎ϟܦఋʛᥘାèϟዹ঎԰ܦ大麦 ̀׹ᥘାèϟ঎ϟ
的亲缘关系最近ᖔ该结果与基因同源性比对结果
相一致ᤥ

图 ᤃজ 水稻 ᨃ༁ᥘାèϟዹ 蛋白的保守基序分析
èᔽ੫঎ ᤃজ ऊᆍႿ༁ᔀʢ׹ᔀʛ ቝᆍᡷᔽ஦ ᑕႿᑕ᤟ᢃ༁ᔽ༁ ᆍ஦ ʢᔽዹᔀ ᨃ༁ᥘାèϟዹ ᡱʢᆍᡷᔀᔽႿ

图 ጢজ 水稻与其他物种 ᨃ༁ᥘାèϟዹ 的系统发育树
èᔽ੫঎ ጢজ ۪ၤᢃ᤟ᆍ੫ᔀႿᔀᡷᔽዹ ᡷʢᔀᔀ ᆍ஦ ᨃ༁ᥘାèϟዹ ᔽႿ
ዛ঎ 水稻 ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 基因的表达分析ଫା঎ 水稻 ᧣໧᤹ଧÞϟᐹ 基因
ʢᔽዹᔀ ᑕႿʛ ᆍᡷၤᔀʢ ༁ᡱᔀዹᔽᔀ༁
的表达分析ଫ᥍᥍঎ 与对照差异显著ྉۗጐԡ঎ԡϟɯଫ ᥍᥍᥍঎ 与对
照差异极显著ྉۗጐԡ঎ԡԡϟɯᤥ 下同ᤥ
ዛ঎ ᧣໧᤹ଧÞϟዞ ੫ᔀႿᔀ ᔀ଴ᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᑕႿᑕ᤟ᢃ༁ᔽ༁ ᆍ஦ ʢᔽዹᔀଫ ଧ঎ ᧣໧᤹ଧÞϟᐹ ੫ᔀႿᔀ
ԣॹጇ ᤹ଧÞϓ 同源蛋白保守基序分析
ᔀ଴ᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ᑕႿᑕ᤟ᢃ༁ᔽ༁ ᆍ஦ ʢᔽዹᔀଫ ᥍᥍঎ ୩ᔽ੫Ⴟᔽ஦ᔽዹᑕႿᡷ ʛᔽ஦஦ᔀʢᔀႿዹᔀ ዹᆍቝᡱᑕʢᔀʛ
利用 ᥘጶᥘጶ 对 ϟᎮ 条不同物种中 ᥘାèϟ 蛋白 औᔽᡷၤ ዹᆍႿᡷʢᆍ᤟ ྉۗጐԡ঎ԡϟɯଫ ᥍᥍᥍঎ ጶ଴ᡷʢᔀቝᔀ᤟ᢃ ༁ᔽ੫Ⴟᔽ஦ᔽዹᑕႿᡷ ʛᔽ஦஦ᔀʢᔀႿዹᔀ
进行了保守基序分析ྉ 图 ᤃɯᖔ共鉴定获得 ϟԡ 个保 ዹᆍቝᡱᑕʢᔀʛ औᔽᡷၤ ዹᆍႿᡷʢᆍ᤟ ྉۗጐԡ঎ԡԡϟɯ঎ ఋၤᔀ ༁ᑕቝᔀ ᤦᔀ᤟ᆍऔ঎
守基序ྉቝᆍᡷᔽ஦ɯᤥ 除 Իቝᥘାèϟᑕ 外ᖔ其他同源蛋白的 图 Ꭾজ ϟԡԡ ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ऊʛ 胁迫水稻地上部分中
᥋ϟ
ቝᆍᡷᔽ஦ 分布相对均匀ᖔ其分布数量与位置也基本相 ᧣໧᤹ଧÞϟዞܦ᧣໧᤹ଧÞϟᐹ 基因的相对表达量变化
èᔽ੫঎ Ꭾজ ኏ᔀ᤟ᑕᡷᔽ׹ᔀ ੫ᔀႿᔀ ᔀ଴ᡱʢᔀ༁༁ᔽᆍႿ ዹၤᑕႿ੫ᔀ༁ ᆍ஦ ᧣໧᤹ଧÞϟዞ
同ᖔ且在 ᥘାèϟ 的 同源蛋白中均存在 ቝᆍᡷᔽ஦ ϟ 与
ᑕႿʛ ᧣໧᤹ଧÞϟᐹ ஦ʢᆍቝ ᡷၤᔀ ༁ၤᆍᆍᡷ ᆍ஦ ʢᔽዹᔀ ᡷʢᔀᑕᡷᔀʛ
ቝᆍᡷᔽ஦ ԰ᖔ这说明此蛋白质在进化过程中具有高度保
᥋ϟ
ࣼႿʛᔀʢ ϟԡԡ ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ऊʛ ༁ᡷʢᔀ༁༁
守性ᖔ进而推断 ᨃ༁ᥘାèϟዹ 可能与其他物种中 的
ᥘାèϟ 具有相同的功能特性ᤥ
达量呈下降趋势ᖔ约为对照组ྉԡ ၤɯ的 ԡ঎԰ 倍ྉ图 Ꭾ᧥
ԣॹᣤ 水稻 ᤹ଧÞϓ 基因家族表达特性分析
ାɯଫ根部 ᧣໧᤹ଧÞϟᐹܦ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 基因的相对表达量较
分析 了 ᧣໧᤹ଧÞϟᐹܦ ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 在水稻进行 ϟԡԡ
地上部分变化幅度较小ᖔ而与对照相比ᖔ个别处理
᥋ϟ
ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ऊʛ 处理下的表达情况ᤥ 结果显示ᖔ在 ϟԡԡ ᥋ϟ
时间呈显著性差异ᤥ 结果还显示ᖔϟԡԡ ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ऊʛ
᥋ϟ
ဂቝᆍ᤟ኼᓂ ऊʛ 处理下ᖔ地上部分 ᧣໧᤹ଧÞϟᐹܦ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 处理下ᖔ根部 ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 基因在 ᤃၤ 达最高点ᖔ约为
基因的表达水平均表现为上调ᖔ其中 ᧣໧᤹ଧÞϟዞ 在 ϟ 对照ྉԡ ၤɯ的 ሕ 倍ྉ图 ऐ᧥ዶɯᖔ根部 ᧣໧᤹ଧÞϟᐹ 基因在
ၤ 达最高点ᖔ约为对照组ྉԡ ၤɯ 的 Ꭾ 倍ଫ随后呈下降 ϟ԰ ၤ 达最高点ᖔ约为对照ྉԡ ၤɯ的 ࿗঎࿗ 倍ྉ图 ऐ᧥ାɯᤥ
趋势ᖔ处理 ᤃၤ 的基因相对表达量约为对照组的 ጢ঎ጢ ԣॹ᎒ ᧣໧᤹ଧÞϓዞ 蛋白互作网络分析
倍ᖔ处理 ϟ԰ ၤ 的基因相对表达量变为对照组的 ሕ঎ጢ 利用 ୩ఋ኏᧧શ᥈ 数据库构建了水稻 ᨃ༁ᥘାèϟዹ 蛋
倍ྉ 图 Ꭾ᧥ዶɯଫ᧣໧᤹ଧÞϟᐹ 基因表达量在 ᤃၤ 达最高 白的蛋白互作网络图ྉ图 ँɯᤥ 结果显示ᖔᨃ༁ᥘାèϟዹ
点ᖔ约为对照组ྉԡ ၤɯ的 ࿗঎԰ 倍ᖔ而在 ϟ԰ ၤ 时基因表 蛋白与 ᨃ༁኏኏ᥘܦ̀୩èዶᤃዶ 和 ̀୩èዶᤃା 具有较强的