Page 127 - 《广西植物》2023年第2期
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２ 期 羽健宾等: 粉葛 ＰｔＣＨＩ 基因的克隆、原核表达和亚细胞定位 ３ ２ １
图 ７ ＰｔＣＨＩ 蛋白的磷酸化位点预测
Ｆｉｇ. ７ Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ ｓｉｔｅ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ＰｔＣＨＩ ｐｒｏｔｅｉｎ
图 ８ ＰｔＣＨＩ 氨基酸序列的系统进化树
Ｆｉｇ. ８ Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＰｔＣＨＩ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ
２.５ 亚细胞定位 线 性 化 载 体 ｐＳＡＴ６￣ＥＹＦＰ￣Ｎ１ 连 接ꎬ 并 转 化 至
２.５.１ 亚细胞定位表达载体构建 利用表 １ 中的特 ＤＨ５α 感 受 态 细 胞ꎮ 提 取 质 粒 经 限 制 性 内 切 酶
异引物 ＰｔＣＨＩ￣ＹＸＢＦ / Ｒ 进行 ＰＣＲ 扩增ꎬ经 １％的琼 Ｘｈｏ Ｉ 和 Ｘｍａ Ｉ 酶切验证ꎬ结果显示分别在约４ ６００
脂糖凝胶电泳检测ꎬ分别在 ６６９ ｂｐ 处有单一条带ꎬ ｂｐ 和 ６６９ ｂｐ 处各有一条带ꎬ大小与线性化载体及
与目的基因大小相一致( 图 １４:Ａ)ꎮ 经纯化后与 目的基因大小相一致(图 １４:Ｂ)ꎮ 将其送测ꎬ 并把
