Page 130 - 《广西植物》2023年第2期

３ ２ ４ 广 西 植 物 ４３ 卷
[２.８３８ ｇ(１００ ｇ) ]和机体内 ＣＨＩ 基因的转录水
￣１
平(Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００９)ꎮ Ｖｕ 等(２０１８)对改善土人
参[Ｔａｌｉｎｕｍ ｐａｎｉｃｕｌａｔｕｍ (Ｊａｃｑ.) Ｇａｅｒｔｎ.]总黄酮含
量低的研究结果发现ꎬ在土人参中过量表达大豆
的 ＧｍＣＨＩ 基因ꎬ会使得转基因土人参中总黄酮含

–１ –１ ) 比非转基因株
量(２.７４ ｍｇｇ 和 ４.２４ ｍｇｇ
系显著提高 ４.８ ~ ７.４ 倍ꎮ 本研究发现ꎬ野葛中的
Ｍ. Ｐｒｏｔｅｉｎ ｍａｒｋｅｒꎻ １. 上样量 １０ ｎｇꎻ ２. 上样量 ２０ ｎｇꎻ ３. 上
葛根素含量和总黄酮含量均高于粉葛ꎬ与前人的
样量 ３０ ｎｇꎻ ４. 上样量 ５０ ｎｇꎮ
Ｍ. Ｐｒｏｔｅｉｎ ｍａｒｋｅｒꎻ １. Ｓａｍｐｌｅ ｌｏａｄｉｎｇ １０ ｎｇꎻ ２. Ｓａｍｐｌｅ ｌｏａｄｉｎｇ 研究结果相一致ꎮ 同时还发现ꎬＣＨＩ 基因的表达量
２０ ｎｇꎻ ３. Ｓａｍｐｌｅ ｌｏａｄｉｎｇ ４０ ｎｇ ꎻ ４. Ｓａｍｐｌｅ ｌｏａｄｉｎｇ ５０ ｎｇ.
在野葛的根和茎中均显著高于粉葛ꎬ前人在乌拉
图 １３ ＰｔＣＨＩ 重组蛋白的 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测 尔甘草和土人参的研究中也发现ꎬ过表达 ＣＨＩ 基
Ｆｉｇ. １３ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ｔｅｓｔ ｏｆ ＰｔＣＨＩ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ
因均能提高植株体内的总黄酮含量ꎮ 由此推测ꎬ

Ａ. ＰｔＣＨＩ 基因 ＰＣＲ 扩增ꎻＢ. 重组质粒 ｐＳＡＴ６￣ＥＹＦＰ￣Ｎ１￣ＰｔＣＨＩ 的双酶切产物ꎮ
Ａ. ＰＣＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＰｔＣＨＩꎻ Ｂ. Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ ｏｆ ｐＳＡＴ６￣ＥＹＦＰ￣Ｎ１￣ＰｔＣＨＩ.
图 １４ 构建亚细胞定位重组质粒
Ｆｉｇ.１４ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｌａｓｍｉｄ

成分具有重要的参考价值ꎮ
３.２ 野葛和粉葛的 ＣＨＩ 基因结构差异与异黄酮类
物质积累关系
同一基因常会因结构存在差异而使其行使的

功能 或 受 到 胁 迫 的 表 现 有 所 不 同 ( 刘 玉 成 等ꎬ
２０１９)ꎮ 娄 文 月 等 ( ２０２１) 在 甘 蔗 研 究 中 发 现ꎬ
Ａ. ＹＦＰ 通道绿色荧光ꎻ Ｂ. Ｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ 自发荧光ꎻ Ｃ. Ｍｅｒｇｅꎮ
Ａ. ＹＦＰ ｃｈａｎｎｅｌ ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅꎻ Ｂ. Ｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔ ａｕｔｏｆｌｕｏ￣ ＳｃＪＡＺ 基 因 家 族 中 ＳｃＪＡＺ２２、 ＳｃＪＡＺ２４ 和 ＳｃＪＡＺ３０
ｒｅｓｃｅｎｃｅꎻ Ｃ. Ｍｅｒｇｅ.
基因结构、氨基酸数量和相对分子质量差异较大ꎬ
图 １５ ＰｔＣＨＩ 的亚细胞定位 这 ３ 个 基 因 在 叶 枯 萎 病 侵 染 抗 叶 枯 萎 病 品 种
Ｆｉｇ. １５ Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ＰｔＣＨＩ
ＲＯＣ２２ 的早期呈现不同的表达量ꎬ其中 ＳｃＪＡＺ２２
基因的表达量下调ꎬ而 ＳｃＪＡＺ２４ 和 ＳｃＪＡＺ３０ 的表达
葛根中的 ＣＨＩ 基因与总黄酮及葛根素的积累存在 量却上调ꎮ Ｄｏｎｇ 等( ２０２１) 在白梨中鉴定出 １９７
密切联系ꎮ 这对后续粉葛品质改良以提高其药效 个 ｂＨＬＨ 基因ꎬ其基因结构和编码的氨基酸数量以