Page 102 - 《广西植物》2023年第11期
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2 0 6 2 广 西 植 物 43 卷
核苷酸重复类型中ꎬ出现频率最高的是 AG / CT 和 用 EST ̄Genome、Phrap、Clustalw、BLAST 等 软 件 对
TC / GAꎬ其次是 AT 和 TAꎬ而 GC / CG 出现频率低ꎬ EST 序列进行精确分析以增加供试材料的基因型
这与 Yi 等 ( 2006)、 Kantety 等 ( 2002) 和 张 宇 等 与数量是提高 EST ̄SSR 标记多态性和价值性的有
(2010)在辣椒上的研究结果基本一致ꎬ而且与珍 效途径( 张宇等ꎬ2010)ꎮ 因为 EST ̄SSR 是对基因
珠粟 ( Selthilvel et al.ꎬ 2008)、 石 蒜 ( 李 青 竹 等ꎬ 内部变异的一种直接评价ꎬ所以它将可能与某些
2021)、蝴蝶兰( 张水明等ꎬ2012) 和毛竹( 张智俊 表型、生理生化特征或某个特定的环境适应型相
等ꎬ2011)的结果相似ꎬ说明 EST ̄SSR 在其发生和 联系ꎬ反映植物基因表达的转录部分( 姚利华等ꎬ
进化过程中具有高度保守性ꎮ GA / TC 在 mRNA 水 2008)ꎮ 挑选的 EST ̄SSR 标记可用于遗传多样性
平上 可 以 代 表 遗 传 密 码 子 GAG、 AGA、 UCU 和 分析与分子标记辅助育种ꎮ 由于其丰富的多态性
CUCꎬ并可以分别翻译成精氨酸、谷氨酸、丙氨酸 信息含量ꎬ因此 EST ̄SSR 可为遗传连锁图谱构建
和亮氨酸ꎬ而丙氨酸和亮氨酸分别以 8%和 10%的 等奠定基础ꎮ 下一步可寻找与辣椒耐涝基因连锁
高频率存在于蛋白质中ꎬ这可能是 GA / TC 在 EST 的 EST ̄SSR 标记ꎬ以应用于辣椒耐涝育种研究ꎮ
中高频出现的原因(Kantety et al.ꎬ 2002)ꎮ 在三核
苷酸中ꎬ出现频率高的是 TTG / CAA 和 ACA / TGTꎬ
这与 Kumpatla 等 ( 2005) 和 Yi 等 ( 2006) 对 辣 椒 参考文献:
EST ̄SSR 的研究结果相符合ꎮ 但刘峰等(2012) 研
AN Qꎬ FENG YHꎬ YANG ZQꎬ et al.ꎬ 2022. EST ̄SSR marker
究认为ꎬ除单核苷酸 A / T 重复序列外ꎬ辣椒 EST ̄ development and interspecific generality of Albizzia
SSR 最 多 的 是 三 核 苷 酸 重 复 序 列 AAC / GTT 和 odoratissima [J]. Guihaiaꎬ 42(8): 1374-1382. [安琪ꎬ 冯
源恒ꎬ 杨章旗ꎬ 等ꎬ 2022. 香合欢 EST ̄SSR 标记开发及种
AAG / CTTꎬ其次是二核苷酸重复序列ꎮ 这可能是
间通用性研究 [J]. 广西植物ꎬ 42(8): 1374-1382.]
由 SSR 搜索标准(基序长度、重复次数等)、分析软 ANDREAS Uꎬ IOANA Cꎬ TRIINU Kꎬ et al.ꎬ 2012. Primer 3 ̄
件及数据库大小不同所造成ꎮ new capabilities and interfaces [ J ]. Nucl Acid Resꎬ
3.3 辣椒转录组 EST ̄SSR 的多态性 40(15): e115.
CHEN YWꎬ LIAO RJꎬ YE BHꎬ et al.ꎬ 2020. Analysis on SSR
在本研究中ꎬ共有 6 018 条 SSR 长度大于 20 loci in transcriptome and development of molecular markers
bpꎬ占全部 SSR 总数的 22.65%ꎻ20 556 条 SSR 长 in Polygonatum cyrtonema [J]. Chin Tradit Herb Drugsꎬ
度介 于 12 ~ 19 bp 之 间ꎬ 占 所 有 SSR 总 数 的 51(1): 182 - 189. [ 陈 友 吾ꎬ 廖 荣 俊ꎬ 叶 碧 欢ꎬ 等ꎬ
2020. 多花黄精转录组 SSR 位点分析及分子标记开发
77.35%ꎬ说 明 辣 椒 EST ̄SSR 具 有 较 好 的 多 态 性
[J]. 中草药ꎬ 51(1): 182-189.]
(Temnykh et al.ꎬ 2001)ꎬ这与盛文涛等(2019) 的 FU HFꎬ LÜ XHꎬ CHEN JYꎬ et al.ꎬ 2018. Genetic diversity
analysis of capsicum germplasm based on phenotypic traits
研究结果基本一致ꎬ可用于辣椒分子标记研究ꎮ
with SSR markers [J]. J Nucl Agric Sciꎬ 32(7): 1309-
根据 26 574 条 EST 序列设计了 10 002 对 SSR 位 1319. [傅鸿妃ꎬ 吕晓菡ꎬ 陈建瑛ꎬ 等ꎬ 2018. 辣椒种质表
点特异性引物ꎬ从中随机挑选了 30 对引物进行 型性状与 SSR 分子标记的遗传多样性分析 [J]. 核农学
PCR 验证ꎬ都可以实现有效扩增ꎬ较大的数据量和 报ꎬ 32(7): 1309-1319.]
GUAN JJꎬ YU ZHꎬ YANG XHꎬ et al.ꎬ 2019. Study on the
较高的拼接质量应是 EST 扩增效率高的原因ꎮ 在
application of SSR markers in pepper ( Capsicum annuum
30 对扩增引物中ꎬ有 7 对(23.3%) 引物在 3 份辣 L.) DUS testing [J]. J Plant Genet Resourꎬ 20(2): 396-
椒中表现出多态性ꎬ低于李永平等(2016) 的研究 405. [管俊娇ꎬ 余志慧ꎬ 杨晓洪ꎬ 等ꎬ 2019. SSR 标记在
结果(35.5%)ꎬ其原因可能与本研究所选用的 3 份 辣椒 DUS 测试中的应用研究 [J]. 植物遗传资源学报ꎬ
20(2): 396-405.]
辣椒 材 料 均 为 贵 州 地 方 品 种ꎬ 并 且 ‘ ZHC1’ 和 GUO Hꎬ TIAN Hꎬ ZHANG SQꎬ et al.ꎬ 2022. Growth and
‘ZHC2’ 为朝天椒ꎬ材料间的遗传背景差异小有 physiological responses of Capsicum frutescens seedlings to
关ꎮ EST ̄SSR 来自基因组转录区ꎬ而转录区的序列 waterlogging stress [J]. N Horticꎬ (2): 1-8. [郭豪ꎬ 田
浩ꎬ 张素勤ꎬ 等ꎬ 2022. 朝天椒苗期对水涝胁迫的生长及
通常比较保守ꎮ 因此ꎬ一般来讲ꎬEST ̄SSR 所检测
生理响应 [J]. 北方园艺ꎬ (2): 1-8.]
到的多态性要低于基因组 SSRꎮ 多态性检测能力 HILDEBRANDT TMꎬ 2018. Synthesis versus degradation:
的大小也与所测试的植物材料有关ꎬ如果所用的 Directions of amino acid metabolism during Arabidopsis
abiotic stress response [J]. Plant Mol Biolꎬ 98: 121-135.
植物材料遗传背景差异较大ꎬ则标记检测的多态
HILDEBRANDT TMꎬ NESI ANꎬ ARAUJO WLꎬ et al.ꎬ
性就高ꎬ反之ꎬ则标记的多态性就会大大降低ꎮ 应 2015. Amino acid catabolism in plants [ J]. Mol Plantꎬ