Page 107 - 《广西植物》2024年第12期
P. 107

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                          Guihaia  Dec. 2024ꎬ 44(12): 2265-2278

            DOI: 10.11931/ guihaia.gxzw202312028
            韦鎔宜ꎬ 段鹏ꎬ 李培兰ꎬ 等ꎬ 2024. 水母雪兔子通气组织形成相关基因 SmPAD4 的克隆及表达分析 [J]. 广西植物ꎬ
            44(12): 2265-2278.
            WEI RYꎬ DUAN Pꎬ LI PLꎬ et al.ꎬ 2024. Cloning and expression of aerenchyma formation ̄related gene SmPAD4 in Saussurea
            medusa [J]. Guihaiaꎬ 44(12): 2265-2278.



                              水母雪兔子通气组织形成相关基因
                                    SmPAD4 的克隆及表达分析


                          韦鎔宜      1ꎬ2ꎬ3 ꎬ 段  鹏 ꎬ 李培兰        1ꎬ2ꎬ3 ꎬ 罗  丹   1ꎬ2ꎬ3 ꎬ 史国民 ꎬ
                                                  4
                                                                                           2ꎬ3
                                       代吴斌 ꎬ 李凤珍             1ꎬ2ꎬ3 ꎬ 何  涛   1ꎬ2ꎬ3∗
                                                2ꎬ3
                 ( 1. 青海大学 生态环境工程学院ꎬ 西宁 810016ꎻ 2. 青海省园林植物与观赏园艺重点实验室ꎬ 西宁 810016ꎻ 3. 青海大学
                    省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室ꎬ 西宁 810016ꎻ 4. 青海大学 畜牧兽医科学院ꎬ 西宁 810016 )

                 摘  要: 通气组织是水母雪兔子(Saussurea medusa)应对极端环境的适应性结构ꎬ其形成通常伴随着细胞程
                 序性死亡(programmed cell deathꎬPCD) 的 发 生ꎬ而 细 胞 的 死 亡 与 通 气 组 织 的 形 成 通 常 受 到 PAD4 基 因
                 (Phytoalexin Deficient 4)的调控ꎬ但 PAD4 如何调控水母雪兔子通气组织形成的机制尚不明确ꎮ 该研究以水
                 母雪兔子为试验材料ꎬ利用同源克隆和 RACE 技术克隆了通气组织形成相关基因 SmPAD4ꎬ对其序列、系统
                 进化、表达和亚细胞定位等进行分析ꎬ并采用 hi ̄TAIL PCR 技术扩增其启动子ꎬ以探讨该基因在环境适应中
                 的功能ꎮ 结果表明:(1)SmPAD4 基因 cDNA 全长为 2 047 bp(GenBank 登录号为 OR766038)ꎬ包括 1 866 bp
                 的开放阅读框ꎬ编码 621 个氨基酸ꎬ分子式为 C               H   N O S ꎬ该蛋白为碱性亲水性不稳定蛋白ꎮ (2)系
                                                       3163  4906  848  910  26
                 统进化树分析显示ꎬSmPAD4 与刺苞菜蓟 CcPAD4 的氨基酸序列相似度最高ꎮ ( 3) 扩 增 出1 049 bp 的
                 SmPAD4 启动子序列ꎬ包含有光响应元件、低氧应答元件、干旱和生长素应答元件等顺式作用元件ꎮ (4) 实
                 时荧光定量(qRT ̄PCR)分析显示ꎬSmPAD4 基因在根、茎和叶中均有表达且在叶中的表达量最高ꎻ在紫外和
                 低氧胁迫下 SmPAD4 基因在叶和茎中表达量均上调ꎬ根中表达量下调ꎮ (5)亚细胞定位显示ꎬSmPAD4 分布
                 于细胞核、细胞膜和叶绿体ꎮ 该研究表明ꎬSmPAD4 基因拥有独特的蛋白结构域ꎬ并且响应低氧和紫外两种
                 环境胁迫ꎬ在通气组织的形成以及对逆境胁迫的响应中具有重要作用ꎬ为进一步探究 SmPAD4 基因在水母
                 雪兔子适应环境过程中的作用提供了理论依据ꎮ
                 关键词: 水母雪兔子ꎬ SmPAD4ꎬ 通气组织ꎬ 表达分析ꎬ 低氧胁迫ꎬ 紫外胁迫
                 中图分类号: Q943    文献标识码: A    文章编号: 1000 ̄3142(2024)12 ̄2265 ̄14



              Cloning and expression of aerenchyma formation ̄related

                                gene SmPAD4 in Saussurea medusa


                                                   4
                                                                                                  2ꎬ3
                   WEI Rongyi   1ꎬ2ꎬ3 ꎬ DUAN Peng ꎬ LI Peilan   1ꎬ2ꎬ3 ꎬ LUO Dan 1ꎬ2ꎬ3 ꎬ SHI Guomin ꎬ
                                                2ꎬ3               1ꎬ2ꎬ3         1ꎬ2ꎬ3∗
                                    DAI Wubin ꎬ LI Fengzhen          ꎬ HE Tao

              收稿日期: 2024-03-24  接受日期: 2024-04-28
              基金项目: 国家自然科学基金(31960222)ꎮ
              第一作者: 韦鎔宜(1998—)ꎬ硕士ꎬ主要从事植物分子生物技术研究ꎬ(E ̄mail)1435928499@ qq.comꎮ
            ∗
              通信作者: 何涛ꎬ博士ꎬ教授ꎬ主要从事植物生物技术研究ꎬ(E ̄mail)hetaoxn@ aliyun.comꎮ
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