Page 107 - 《广西植物》2024年第12期
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Guihaia Dec. 2024ꎬ 44(12): 2265-2278
DOI: 10.11931/ guihaia.gxzw202312028
韦鎔宜ꎬ 段鹏ꎬ 李培兰ꎬ 等ꎬ 2024. 水母雪兔子通气组织形成相关基因 SmPAD4 的克隆及表达分析 [J]. 广西植物ꎬ
44(12): 2265-2278.
WEI RYꎬ DUAN Pꎬ LI PLꎬ et al.ꎬ 2024. Cloning and expression of aerenchyma formation ̄related gene SmPAD4 in Saussurea
medusa [J]. Guihaiaꎬ 44(12): 2265-2278.
水母雪兔子通气组织形成相关基因
SmPAD4 的克隆及表达分析
韦鎔宜 1ꎬ2ꎬ3 ꎬ 段 鹏 ꎬ 李培兰 1ꎬ2ꎬ3 ꎬ 罗 丹 1ꎬ2ꎬ3 ꎬ 史国民 ꎬ
4
2ꎬ3
代吴斌 ꎬ 李凤珍 1ꎬ2ꎬ3 ꎬ 何 涛 1ꎬ2ꎬ3∗
2ꎬ3
( 1. 青海大学 生态环境工程学院ꎬ 西宁 810016ꎻ 2. 青海省园林植物与观赏园艺重点实验室ꎬ 西宁 810016ꎻ 3. 青海大学
省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室ꎬ 西宁 810016ꎻ 4. 青海大学 畜牧兽医科学院ꎬ 西宁 810016 )
摘 要: 通气组织是水母雪兔子(Saussurea medusa)应对极端环境的适应性结构ꎬ其形成通常伴随着细胞程
序性死亡(programmed cell deathꎬPCD) 的 发 生ꎬ而 细 胞 的 死 亡 与 通 气 组 织 的 形 成 通 常 受 到 PAD4 基 因
(Phytoalexin Deficient 4)的调控ꎬ但 PAD4 如何调控水母雪兔子通气组织形成的机制尚不明确ꎮ 该研究以水
母雪兔子为试验材料ꎬ利用同源克隆和 RACE 技术克隆了通气组织形成相关基因 SmPAD4ꎬ对其序列、系统
进化、表达和亚细胞定位等进行分析ꎬ并采用 hi ̄TAIL PCR 技术扩增其启动子ꎬ以探讨该基因在环境适应中
的功能ꎮ 结果表明:(1)SmPAD4 基因 cDNA 全长为 2 047 bp(GenBank 登录号为 OR766038)ꎬ包括 1 866 bp
的开放阅读框ꎬ编码 621 个氨基酸ꎬ分子式为 C H N O S ꎬ该蛋白为碱性亲水性不稳定蛋白ꎮ (2)系
3163 4906 848 910 26
统进化树分析显示ꎬSmPAD4 与刺苞菜蓟 CcPAD4 的氨基酸序列相似度最高ꎮ ( 3) 扩 增 出1 049 bp 的
SmPAD4 启动子序列ꎬ包含有光响应元件、低氧应答元件、干旱和生长素应答元件等顺式作用元件ꎮ (4) 实
时荧光定量(qRT ̄PCR)分析显示ꎬSmPAD4 基因在根、茎和叶中均有表达且在叶中的表达量最高ꎻ在紫外和
低氧胁迫下 SmPAD4 基因在叶和茎中表达量均上调ꎬ根中表达量下调ꎮ (5)亚细胞定位显示ꎬSmPAD4 分布
于细胞核、细胞膜和叶绿体ꎮ 该研究表明ꎬSmPAD4 基因拥有独特的蛋白结构域ꎬ并且响应低氧和紫外两种
环境胁迫ꎬ在通气组织的形成以及对逆境胁迫的响应中具有重要作用ꎬ为进一步探究 SmPAD4 基因在水母
雪兔子适应环境过程中的作用提供了理论依据ꎮ
关键词: 水母雪兔子ꎬ SmPAD4ꎬ 通气组织ꎬ 表达分析ꎬ 低氧胁迫ꎬ 紫外胁迫
中图分类号: Q943 文献标识码: A 文章编号: 1000 ̄3142(2024)12 ̄2265 ̄14
Cloning and expression of aerenchyma formation ̄related
gene SmPAD4 in Saussurea medusa
4
2ꎬ3
WEI Rongyi 1ꎬ2ꎬ3 ꎬ DUAN Peng ꎬ LI Peilan 1ꎬ2ꎬ3 ꎬ LUO Dan 1ꎬ2ꎬ3 ꎬ SHI Guomin ꎬ
2ꎬ3 1ꎬ2ꎬ3 1ꎬ2ꎬ3∗
DAI Wubin ꎬ LI Fengzhen ꎬ HE Tao
收稿日期: 2024-03-24 接受日期: 2024-04-28
基金项目: 国家自然科学基金(31960222)ꎮ
第一作者: 韦鎔宜(1998—)ꎬ硕士ꎬ主要从事植物分子生物技术研究ꎬ(E ̄mail)1435928499@ qq.comꎮ
∗
通信作者: 何涛ꎬ博士ꎬ教授ꎬ主要从事植物生物技术研究ꎬ(E ̄mail)hetaoxn@ aliyun.comꎮ