Page 111 - 《广西植物》2024年第12期

１２ 期 韦鎔宜等: 水母雪兔子通气组织形成相关基因 ＳｍＰＡＤ４ 的克隆及表达分析 ２ ２ ６ ９

表 １ 实验用引物
Ｔａｂｌｅ １ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ
类型 引物名称 引物序列 (５′→３′)
Ｔｙｐｅ Ｐｒｉｍｅｒ ｎａｍｅ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅ (５′→３′)

ＰＡＤ４￣Ｆ ＴＴＴＧＴＲＣＣＲＴＴＴＧＧＧＡＡＹＴＴＹＡＴＧＴＴＴＴＧ
ＰＡＤ４￣Ｒ ＣＣＣＡＹＴＴＧＧＣＴＣＧＹＴＴＲＴＧＲＡＡＲＴＣ
５￣ＰＡＤ４￣１ ＣＣＡＣＴＴＧＧＣＴＣＧＣＴＴＧＴＧＧＡＡＧ
５￣ＰＡＤ４￣２ ＧＣＣＧＡＧＴＴＧＧＴＣＧＴＣＧＧＡＴＴＴ
３￣ＰＡＤ４￣１ ＴＣＡＧＧＧＴＣＴＣＣＧＡＧＴＴＣＴＡＧＣＡＴＴＧ
ｃＤＮＡ 扩增 ｃＤＮＡ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
３￣ＰＡＤ４￣２ ＴＧＴＧＡＣＡＡＡＴＣＣＧＡＣＧＡＣＣＡＡＣＴＣ

ｃＤＮＡ￣Ｆ１ ＧＣＡＡＧＣＡＧＴＧＧＴＡＴＣＡＡＣＧＣＡＧＡＧ
ｃＤＮＡ￣Ｒ１ ＣＡＧＡＴＴＣＴＡＴＡＴＣＴＴＡＴＡＴＣＧ
ｃＤＮＡ￣Ｆ２ ＡＡＴＣＡＡＴＣＴＣＡＴＣＴＣＣＴＣＣＴＡＣＴＧ
ｃＤＮＡ￣Ｒ２ ＴＣＣＴＣＴＴＡＴＴＡＣＧＧＴＧＣＣＡＣＴＴＴＣ
Ｐ￣ＰＡＤ４￣Ｒ１ ＡＴＣＣＣＴＣＣＧＴＣＡＡＣＣＡＡＴＧＡＡＡＣＴＣＣ
启动子扩增 Ｐｒｏｍｏｔｅｒ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｐ￣ＰＡＤ４￣Ｒ２ ＡＣＧＡＴＧＧＡＣＴＣＣＡＧＡＧＣＧＧＣＣ ＡＣＣＣＴＧＡＧＴＣＧＣＣＡＴＧＡＣＡＴＴＴＧＡＴＣ
Ｐ￣ＰＡＤ４￣Ｒ３ ＧＡＴＴＣＣＡＴＧＡＣＴＣＣＡＧＣＡＧＡＡＧＴＧＧＣ
Ｑ￣ＰＡＤ４Ｆ ＧＡＴＣＣＧＴＴＧＴＧＴＧＧＧＡＡＴＴＴＧ
Ｑ￣ＰＡＤ４Ｒ ＣＡＴＣＣＡＣＣＡＴＣＧＣＴＧＴＡＴＴＣＴ
ｑＲＴ￣ＰＣＲ
Ｑ￣ＵＰＬ７Ｆ ＧＣＡＧＴＣＡＣＴＴＴＧＧＣＡＣＴＴＣＧ
Ｑ￣ＵＰＬ７Ｒ ＧＣＣＴＧＡＡＧＣＡＡＧＧＣＧＴＴＡＡＧ
ＰＡＤ４￣２３００Ｆ ＡＧＡＡＣＡＣＧＧＧＧＧＡＣＧＡＧＣＴＣＡＴＧＧＧＧＧＡＧＡＣＴＡＧＴＧＡＧＡＴＧＣ
亚细胞定位 Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ
ＰＡＤ４￣２３００Ｒ ＡＣＣＡＴＧＧＴＧＴＣＧＡＣＴＣＴＡＧＡＣＧＧＴＧＣＣＡＣＴＴＴＣＣＧＡＴＣＣＡＡ

注: Ｒ 为 Ａ 或 ＧꎬＹ 为 Ｃ 或 Ｔꎮ
Ｎｏｔｅ: Ｒ ｉｓ Ａ ｏｒ Ｇꎬ Ｙ ｉｓ Ｃ ｏｒ Ｔ.

Ａ. 保守片段ꎻ Ｂ、Ｃ. 巢式 ＰＣＲ５′￣ＲＡＣＥꎻ Ｄ、Ｅ. 巢式 ＰＣＲ３′￣ＲＡＣＥꎻ Ｆ、Ｇ. ｃＤＮＡꎮ
Ａ. Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ ｒｅｇｉｏｎꎻ Ｂꎬ Ｃ. Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ５′￣ＲＡＣＥꎻ Ｄꎬ Ｅ. Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ３′￣ＲＡＣＥꎻ Ｆꎬ Ｇ. ｃＤＮＡ.
图 １ ＳｍＰＡＤ４ 基因的克隆
Ｆｉｇ. １ Ｃｌｏｎｉｎｇ ｏｆ ＳｍＰＡＤ４ ｇｅｎｅ

诱导的调控机制ꎬ因此推测 ＳｍＰＡＤ４ 在水母雪兔 ２.４ ＳｍＰＡＤ４ 基因的组织表达
子生长发育过程中参与相关的调控及生理过程ꎮ 组织表达结果( 图 ６) 表明ꎬＳｍＰＡＤ４ 基因在