Page 113 - 《广西植物》2024年第12期

１２ 期 韦鎔宜等: 水母雪兔子通气组织形成相关基因 ＳｍＰＡＤ４ 的克隆及表达分析 ２ ２ ７ １

ＳｍＰＡＤ４. 水母雪兔子(ＷＰＡ９３９９０.１)ꎻ ＣｃＰＡＤ４￣Ｘ１. 刺苞菜蓟(ＸＰ＿０２４９６２８８４.１)ꎻ ＣｃＰＡＤ４￣Ｘ２. 刺苞菜蓟(ＸＰ＿０２４９６２８８５.１)ꎻ
ＬｓＰＡＤ４. 莴苣(ＸＰ＿０２３７３７０９８.１)ꎻ ＨａＰＡＤ４. 向日葵 (ＸＰ＿０２１９８９６８１.１)ꎻ ＥｃＰＡＤ４. 小蓬草(ＸＰ＿０４３６２３４９６.１)ꎮ 方框显示 α / β
水解酶折叠的结构域与 ＥＤＳ１￣ＰＡＤ４(ＥＰ)结构域ꎮ
ＳｍＰＡＤ４. Ｓａｕｓｓｕｒｅａ ｍｅｄｕｓａ (ＷＰＡ９３９９０.１)ꎻ ＣｃＰＡＤ４￣Ｘ１. Ｃｙｎａｒａ ｃａｒｄｕｎｃｕｌｕｓ (ＸＰ＿０２４９６２８８４.１)ꎻ ＣｃＰＡＤ４￣Ｘ２. Ｃ. ｃａｒｄｕｎｃｕｌｕｓ (ＸＰ＿
０２４９６２８８５.１)ꎻ ＬｓＰＡＤ４. Ｌａｃｔｕｃａ ｓａｔｉｖａ (ＸＰ＿０２３７３７０９８.１)ꎻ ＨａＰＡＤ４. Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓ ａｎｎｕｕｓ (ＸＰ＿０２１９８９６８１.１)ꎻ ＥｃＰＡＤ４. Ｅｒｉｇｅｒｏｎ ｃａｎａｄｅｎｓｉｓ
(ＸＰ＿０４３６２３４９６.１). Ｂｏｘ ｓｈｏｗｓ ｔｈｅ α/ β ｈｙｄｒｏｌａｓｅ ｆｏｌｄｅｄ ｄｏｍａｉｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ＥＤＳ１￣ＰＡＤ４ (ＥＰ) ｄｏｍａｉｎ.
图 ３ 菊科 ＰＡＤ４ 蛋白多序列比对
Ｆｉｇ. ３ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｌｉｇｎｍｅｎｔ ｏｆ ＰＡＤ４ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ Ａｓｔｅｒａｃｅａｅ

兔子各 组 织 中 ＳｍＰＡＤ４ 表 达 量 ( 图 ８:Ｂ)ꎮ 在 根
中ꎬ 紫外胁迫和低氧胁迫显著降低了 ＳｍＰＡＤ４ 表 ３ 讨论与结论
达量(Ｐ<０.０５)ꎬ其中紫外胁迫下 ＰＡＤ４ 的表达量
最低ꎻ在茎和叶中ꎬ紫外胁迫和低氧胁迫显著提高 ＰＡＤ４ 是调控植物响应生物与非生物胁迫和
了 ＳｍＰＡＤ４ 表 达 量 ( Ｐ < ０. ０５)ꎬ其 中 低 氧 胁 迫 下 ＰＣＤ 的关键基因ꎬ在植物生长发育中有着重要作用

ＳｍＰＡＤ４ 的表达量最高(Ｐ<０.０５)ꎮ (Ｗｉｔｕｓｚｙｎｓｋａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１３)ꎮ 本研究从水母雪兔子
２.５ ＳｍＰＡＤ４ 基因的亚细胞定位 中克隆出 ２ ０４７ ｂｐ 的 ＳｍＰＡＤ４ 基因ꎬ包含 １ ８６６ ｂｐ
亚细胞定位结果(图 ９) 显示ꎬ含有目标基因的 的 ＣＤＳ 区ꎬ编码 ６２１ 个氨基酸ꎮ 对 ＳｍＰＡＤ４ 进行蛋
ＰＡＤ４￣２３００ 融合蛋白绿色荧光信号主要分布于细胞 白分析ꎬ其蛋白脂肪指数为 ８７.１３ꎬ为碱性亲水性不
膜和细胞核ꎬ部分分布于叶绿体中ꎬ表明 ＳｍＰＡＤ４ 稳定蛋白ꎬ属于水解酶超家族蛋白ꎮ ＳｍＰＡＤ４ 蛋白
蛋白主要在细胞膜、细胞核和叶绿体中发挥功能ꎮ 含有多个磷酸化位点ꎬ表明其可受磷酸化作用调