Page 127 - 《广西植物》2024年第2期

２ 期 李慧娟等: 马醉木二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性研究 ３ ２ ９

渐渐变成蓝色ꎬ静置 １２ ｈ 之后颜色变为绿色的特 ２０
化合物 １ 白色无定型粉末ꎮ [ α] － ４３.８０
Ｄ
征来定向获取其二萜类成分ꎮ 取干燥马醉木叶
(ｃ ０. １ꎬ ＭｅＯＨ)ꎬ ＵＶ ( ＭｅＯＨ) λ ( ｌｏｇ ε) ２０２
２.５ ｋｇ 粉碎后用乙酸乙酯冷浸提取 ３ 次ꎬ２４ ｈ 提取 ｍａｘ
＋
(３.８) ｎｍꎬ ＥＳＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ ５０３ [ Ｍ ＋ Ｎａ] ꎬ 分 子 式
１ 次ꎬ减 压 回 收 提 取 液 后 得 到 总 浸 膏ꎮ 将 浸 膏
１
Ｃ Ｈ Ｏ ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ５００ ＭＨｚꎬ ｍｅｔｈａｎｏｌ￣ｄ ) δ :
(４８０ ｇ) 先经 ＭＣＩ 柱层析、甲醇 － 水 ( ４０ ∶ ６０ → ２６ ４０ ８ ４ Ｈ
１００ ∶ ０) 梯度洗脱ꎬ再经薄层色谱显色得 ４ 个组分 ５.０２ (１Ｈꎬｓ)ꎬ４.９０ (１Ｈꎬｓ)ꎬ４.４２ (１ＨꎬｄꎬＪ ＝ ７.８
Ｈｚ)ꎬ１.４２ (３Ｈꎬｓ)ꎬ１.１８ (３Ｈꎬｓ)ꎬ１. ０８ ( ３Ｈꎬｓ)ꎻ
(Ｆｒ.Ａ ~ Ｆｒ. Ｄ)ꎮ 其中ꎬＦｒ. Ａ (３１０ ｇ) 经硅胶柱层
１３ Ｃ￣ＮＭＲ ( １２５ ＭＨｚꎬ ｍｅｔｈａｎｏｌ￣ｄ ) δ : ２１７. ５ ( Ｃ￣
析ꎬ选 ＣＨＣｌ －ＭｅＯＨ (３０ ∶ １→０ ∶ １) 为洗脱剂梯 ４ Ｃ
３
５)ꎬ１５３.０ (Ｃ￣１０)ꎬ１０５.８ (ＣＨ ￣２０)ꎬ９９.２ (Ｇｌｃ￣ＣＨ￣
度洗脱ꎬ根据薄层色谱显色特征得到富含二萜组 ２
分 Ｆｒ.Ａ 和 非 二 萜 组 分 Ｆｒ. Ａ ꎮ Ｆｒ. Ａ ( ５. ８ ｇ) 经 １′)ꎬ８９.１ ( Ｃ￣１６)ꎬ７８. ６ ( Ｇｌｃ￣ＣＨ￣３′)ꎬ７８. ３ ( Ｇｌｃ￣
１ ２ １
Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 柱层析ꎬ得到 ２ 个组分 Ｆｒ. Ａ 和 ＣＨ￣５′)ꎬ７７. ６ ( ＣＨ￣３)ꎬ ７５. ２ ( Ｇｌｃ￣ＣＨ￣２′)ꎬ ７１. ７
１－１
(Ｇｌｃ￣ＣＨ￣４′)ꎬ６２.８ (Ｇｌｃ￣ＣＨ ￣６′)ꎬ５３.４ ( ＣＨ ￣１５)ꎬ
Ｆｒ.Ａ ꎮ Ｆｒ. Ａ ( ４. ０ ｇ) 经 硅 胶 柱 层 析、ＣＨＣｌ － ２ ２
１－２ １－１ ３
ＭｅＯＨ (１５ ∶ １→０ ∶ １) 梯度洗脱ꎬ得到 ５ 个组分 ５０.８ ( Ｃ￣４)ꎬ ５０. ４ ( ＣＨ￣９)ꎬ ４９. ３ ( ＣＨ￣６)ꎬ ４８. １
Ｆｒ.Ａ －Ｆｒ.Ａ ꎮ Ｆｒ.Ａ (１.０ ｇ) 经硅胶柱层 (ＣＨ￣１３)ꎬ４６.８ ( Ｃ￣８)ꎬ４４.０ ( ＣＨ￣１)ꎬ３９.２ ( ＣＨ ￣
２
１－１－１ １－１－５ １－１－１
析ꎬ用 ＣＨＣｌ －ＭｅＯＨ (１５ ∶ １→０ ∶ １) 梯度洗脱ꎬ得 ７)ꎬ３６. ２ ( ＣＨ ￣１４)ꎬ ３２. ５ ( ＣＨ ￣２)ꎬ ２５. ３ ( ＣＨ ￣
２
２
２
３
１２)ꎬ２２.５ ( ＣＨ ￣１１)ꎬ２１.７ ( ＣＨ ￣１８)ꎬ２０.９ ( ＣＨ ￣
到化合物 １ (３０ ｍｇ)、２ (２６ ｍｇ) 和化合物 ３ (１００ ２ ３ ３
ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.Ａ (３００ ｍｇ) 部分经 ＲＰ￣１８ 柱层析ꎬ用 １７)ꎬ２０.９ ( ＣＨ ￣１９)ꎮ 以上数据与文献 ( Ｗａｎｇ ｅｔ
３
１－１－２
甲醇－水 (３５ ∶ ６５→７０ ∶ ３０) 梯度洗脱ꎬ得到化合 ａｌ.ꎬ ２０００) 比 对 基 本 一 致ꎬ 故 鉴 定 化 合 物 １ 为
ｐｉｅｒｉｓｆｏｒｍｏｓｉｄｅ Ｆꎮ
物 ４ ( ３６ ｍｇ) 和化合物 ５ ( ９ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ. Ａ ( ６０
１￣１￣３
２０
ｍｇ) 经 高 效 液 相 色 谱 ( 乙 腈 － 水ꎬ ３０ ∶ ７０ꎬ ５. ０ 化合物 ２ 白 色 无 定 型 粉 末ꎮ [ α] － ２１. ００
Ｄ
￣１
＋
ｍＬｍｉｎ ) 纯化ꎬ得到化合物 ６ ( ７.０ ｍｇꎬｔ ＝ ９ (ｃ ０.１ꎬＭｅＯＨ)ꎬＥＳＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ ３５９ [Ｍ ＋ Ｎａ] ꎬ分子
Ｒ
ｍｉｎ) 和化合物 ７ (１.２ ｍｇꎬｔ ＝ １６ ｍｉｎ)ꎮ Ｆｒ.Ａ １
Ｒ １－１－４ 式 Ｃ Ｈ Ｏ ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ (５００ ＭＨｚꎬｍｅｔｈａｎｏｌ￣ｄ ) δ :
２０ ３２ ４ ４ Ｈ
(８０ ｍｇ) 经高效液相色谱 ( 乙腈－水ꎬ２０ ∶ ８０ꎬ４.０
５.０４ ( １Ｈꎬｓ)ꎬ４. ９３ ( １Ｈꎬ ｓ)ꎬ１. ３５ ( ３Ｈꎬ ｓ)ꎬ１. １７
￣１
ｍＬｍｉｎ ) 纯化ꎬ得到化合物 ８ (４.０ ｍｇꎬｔ ＝ ９.７ １３
Ｒ (３Ｈꎬ ｓ )ꎬ １. ０３ ( ３Ｈꎬ ｓ )ꎻ Ｃ￣ＮＭＲ ( １２５ ＭＨｚꎬ
ｍｉｎ)ꎮ
ｍｅｔｈａｎｏｌ￣ｄ ) δ :１５２.８ ( Ｃ￣１０)ꎬ１１３.５ ( ＣＨ ￣２０)ꎬ
４ Ｃ ２
１.３.２ 乙酰胆碱酯酶抑制活性测试 参照文献 Ｌｉｕ
８３.５ ( Ｃ￣５)ꎬ ８２. ５ ( ＣＨ￣３)ꎬ ８１. ３ ( Ｃ￣１６ )ꎬ ７２. ２
等(２０２０)的方法对乙酰胆碱酯酶抑制活性进行测
(ＣＨ￣６)ꎬ６３.２ ( ＣＨ ￣１５)ꎬ５５.３ ( ＣＨ￣９)ꎬ５１.２ ( Ｃ￣
２
试ꎻ分别选取 ＤＭＳＯ 和他克林作为阴性对照组和
４)ꎬ４８. ０ ( ＣＨ￣１３)ꎬ４６. ２ ( ＣＨ ￣７)ꎬ４５. ０ ( Ｃ￣８)ꎬ
２
阳性对照组ꎬ对化合物 １－８ 进行活性测定ꎻ化合物
４４.２ (ＣＨ￣１)ꎬ３９.０ (ＣＨ ￣１４)ꎬ３５.９ (ＣＨ ￣２)ꎬ２６.７
２
２
的终浓度为 ５０.０ μｍｏｌ Ｌ ꎬ他克林的终浓度为
￣１
(ＣＨ ￣１１)ꎬ２５. ３ ( ＣＨ ￣１９)ꎬ２４. ７ ( ＣＨ ￣１７)ꎬ２４. ３
￣１ ２ ３ ３
０.３３３ μｍｏｌ Ｌ ꎻ每组测定均重复 ３ 次ꎮ
(ＣＨ ￣１２)ꎬ １９. ３ ( ＣＨ ￣１８ )ꎮ 以 上 数 据 与 文 献
２ ３
(Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１９ａ) 比对基本一致ꎬ故鉴定化合物
２ 结果与分析
２ 为 ３￣ｅｐｉ￣ｇｒａｙａｎｏｔｏｘｉｎ ＸＶⅢꎮ
２０
２.１ 化合物结构鉴定 化合物 ３ 淡 黄 色 胶 状 固 体ꎮ [ α] － １９. ２０
Ｄ
(ｃ ０.１ꎬ ＭｅＯＨ )ꎬ ＵＶ ( ＭｅＯＨ ) λ ( ｌｏｇ ε ) ２０２
马醉木叶乙酸乙酯提取物ꎬ经硅胶、Ｓｅｐｈａｄｅｘ ｍａｘ
ＬＨ￣２０、反相半制备高效液相等色谱技术分离与纯 (３.７) ｎｍꎬ ＥＳＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ ５２１ [ Ｍ ＋ Ｎａ] ꎬ 分 子 式
＋
１
１３
１
化ꎬ得到 ８ 个化合物ꎬ利用 Ｈ￣ＮＭＲ、 Ｃ￣ＮＭＲ、ＥＳＩ￣ Ｃ Ｈ Ｏ ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ５００ ＭＨｚꎬ ｍｅｔｈａｎｏｌ￣ｄ ) δ :
９
Ｈ
４
２６
４２
ＭＳ 等波谱手段ꎬ结合参考文献ꎬ确定了这些二萜 ５.０１ (１Ｈꎬｓ)ꎬ４.９７ (１Ｈꎬｓ)ꎬ４.３１ (１ＨꎬｄꎬＪ ＝ ７.８
化合物的结构ꎮ 所得二萜化合物包括木黎芦烷酚 Ｈｚ)ꎬ１.３５ (３Ｈꎬｓ)ꎬ１.２２ (３Ｈꎬｓ)ꎬ１. １０ ( ３Ｈꎬｓ)ꎻ
型化合物(１) 和木黎芦烷型化合物(２－８)ꎬ其中木 １３ Ｃ￣ＮＭＲ ( １２５ ＭＨｚꎬ ｍｅｔｈａｎｏｌ￣ｄ ) δ : １５２. １ ( Ｃ￣
４ Ｃ
黎芦酚型二萜化合物为首次从该植物中分离得 １０)ꎬ １１３. ７ ( ＣＨ ￣２０)ꎬ １０５. ３ ( Ｇｌｃ￣ＣＨ￣１′)ꎬ ９０. ０
２
到ꎮ 化合物 １－８ 的结构如图 １ 所示ꎮ (ＣＨ￣３)ꎬ８３.１ (Ｃ￣５)ꎬ８１.２ (Ｃ￣１６)ꎬ７７.８ (Ｇｌｃ￣ＣＨ￣