Page 173 - 《广西植物》2024年第2期
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２ 期 叶洪波等: 红凉伞根化学成分及抗炎活性研究 ３ ７ ５
Ｆｉｎｎｉｇａ 公司)ꎮ Ｃ 反相柱填 料 ＯＤＳ￣Ａ￣ＨＧ( 日 本 ＥＢ(１.７ ｇ)经 ＯＤＳ 梯度洗脱后ꎬ经半制备型高效液
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ＹＭＣ 公司)ꎻ半制备柱( ２５０ ｍｍ ×１０ ｍｍꎬ ５ μｍꎬ 相甲醇－水(７５ ∶ ２５ꎬＶ / Ｖ) 分离ꎬ得到化合物 ８(０.６
日本岛津公司)ꎻ凝胶柱色谱填料( ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ｍｇ)ꎮ 流分 ＥＤ(１０.０ ｇ)上清液经 ＯＤＳ 反向柱层析
Ｂｉｏ￣Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｕｐｐｓａｌａꎬ Ｓｗｅｄｅｎꎻ ＬＨ￣２０)ꎻ柱层析硅 梯度洗脱ꎬ回收流动相后正相薄层板监视成分ꎬ得
胶(８０ ~ １００、２００ ~ ３００ 目ꎬ青岛海洋化工厂)ꎮ 脂 到 ６ 个流分(ＥＤ１－ＥＤ６)ꎮ ＥＤ４ 经半制备型高效液
多 糖 ( ＬＰＳꎬ 北 京 索 莱 宝 科 技 有 限 公 司 )ꎻ Ｃｅｌｌ 相甲醇－水( ４２ ∶ ５８ꎬＶ / Ｖ) 分离ꎬ得化合物 ２( ２.４
Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ￣８(ＣＣＫ８ꎬ中国 ｂｉｏｓｈａｒｐ 公司)ꎻ胎牛血 ｍｇ)ꎻＥＤ５ 经硅胶柱色谱二氯甲烷－甲醇(１５ ∶ １ ~
清(ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍꎬＦＢＳ)、 ＤＥＭＥ 培养基( 美国 ５ ∶ １ꎬＶ / Ｖ) 梯度洗脱ꎬ得到化合物 ３ ( １. ５ ｍｇ)、４
Ｇｉｂｃｏ 公司)ꎻＮＯ 检测试剂盒( 南京建成生物工程 (１.２ ｍｇ)ꎻ ＥＤ６ 经 硅 胶 柱 色 谱 二 氯 甲 烷 － 甲 醇
研究 所)ꎻ 地 塞 米 松 ( ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅꎬ ＤＥＸꎬ 美 国 (１５ ∶ １ ~ ５ ∶ １ꎬＶ / Ｖ)梯度洗脱ꎬ半制备型高效液相
Ｓｉｇｍａ 公司)ꎮ 二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、甲醇 甲醇－水(５６ ∶ ４４ꎬＶ / Ｖ) 分离ꎬ得到化合物 ５( ２.５
(均为天津市富宇精细化工有限公司生产的分析 ｍｇ)和化合物 ６(４.５ ｍｇ)ꎮ 流分 ＥＥ(５.９ ｇ) 上清液
纯)ꎮ 经 ＯＤＳ 反向色谱柱层析梯度洗脱ꎬ回收流动相后
正相薄层板监视成分ꎬ合并相同的组分ꎬ得到 ６ 个
２ 提取与分离 流分(ＥＥ１－ＥＥ６)ꎮ ＥＥ２ 采用硅胶色谱柱和半制备
型高效液相甲醇－水(４０ ∶ ６０ꎬＶ / Ｖ) 分离ꎬ得到化
取干燥红凉伞根 １５.８ ｋｇꎬ粉碎成粗粉ꎬ以液料 合物 ７(３.５ ｍｇ)ꎻＥＥ６ 经半制备型高效液相甲醇－
比 １０ ∶ １(Ｖ / Ｖ)的 ７０％乙醇加热回流提取 ２ 次ꎬ每 水(８９ ∶ １１ꎬＶ / Ｖ)分离ꎬ得到化合物 １０(５.０ ｍｇ)ꎮ
次 ２ ｈꎬ合并过滤后的提取液ꎬ减压回收溶剂ꎬ得到
红凉伞根浸膏 ５.１ ｋｇꎮ 浸膏加适量蒸馏水混悬后 ３ 结构鉴定
依次用等体积石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇进
行萃取ꎬ减压浓缩得到 ３ 个萃取部位ꎮ 化合物 １ 无色针晶ꎮ ＥＳＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ: ４８１ [ Ｍ＋
取 ３５０.０ ｇ 水饱和正丁醇萃取物ꎬ加入甲醇使 Ｈ] ꎬ分 子 式 为 Ｃ Ｈ Ｏ ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ４００ ＭＨｚꎬ
＋
１
２１ ２０ １３
其完全溶解ꎬ８０ 目硅胶与样品溶液 １ ∶ １( ｍ / ｍ) 拌 Ｃ Ｄ Ｎ) δ: ７.９２ (２Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣２′ꎬ ６′)ꎬ ７.７９ (１Ｈꎬ ｓꎬ
５
５
匀ꎬ挥 干 溶 剂 备 用ꎮ 采 用 高 于 样 品 １０ 倍 量 的 Ｈ￣７)ꎬ ５.３４ (１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝ １２.１ꎬ ２.０ Ｈｚꎬ Ｈ￣１０ｂ)ꎬ
２００ ~ ３００ 目硅胶ꎬ二氯甲烷湿法装柱ꎬ干法上样ꎬ ５.２７ ( １Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ １０. ３ Ｈｚꎬ Ｈ￣４ａ)ꎬ ４. ８１ ( １Ｈꎬ
以二氯甲烷－甲醇(１ ∶ ０ ~ ０ ∶ １ꎬＶ / Ｖ) 进行梯度洗 ｄｄꎬ Ｊ ＝ １２.１ꎬ ６.７ Ｈｚꎬ Ｈ￣４)ꎬ ４.５８ (１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝
脱ꎮ 减压回收溶剂ꎬ薄层硅胶板监视成分ꎬ合并相 １０.３ꎬ ９.３ Ｈｚꎬ Ｈ￣１１)ꎬ ４.４９ (１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝ ９.３ꎬ
同组分ꎬ共得到 ８ 个流分(Ａ－Ｈ)ꎮ 流分 Ｄ(１５.４ ｇ) ８.３ Ｈｚꎬ Ｈ￣１１)ꎬ ４.３８ (１Ｈꎬ ｄｄｄꎬ Ｊ ＝ ９.０ꎬ ６.６ꎬ ２.１
经 ＯＤＳ 柱色谱干法上样ꎬ以甲醇－水(１ ∶ ９ ~ ９ ∶ １ꎬ Ｈｚꎬ Ｈ￣３)ꎬ ４.１９ (１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝ ９.９ꎬ ８.３ Ｈｚꎬ Ｈ￣
Ｖ / Ｖ)进行梯度洗脱ꎬ正相薄层硅胶板监视ꎬ合并相 ２)ꎬ ３.９７ (３Ｈꎬ ｓꎬ ９￣ＯＣＨ )ꎻ Ｃ￣ＮＭＲ (１００ ＭＨｚꎬ
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３
同组分ꎬ得到 ９ 个流分(Ｄ１－Ｄ９)ꎮ 流分 Ｄ８ 经半制 Ｃ Ｄ Ｎ) δ: １６７. ３ ( Ｃ￣７′)ꎬ １６４. ４ ( Ｃ￣６)ꎬ １５２. ８
５
５
备型高效液相甲醇 －水(４０ ∶ ６０ꎬＶ / Ｖ) 洗脱ꎬ得化 (Ｃ￣８)ꎬ １４９.４ ( Ｃ￣１０)ꎬ １４７.７ ( Ｃ￣３′ꎬ ５′)ꎬ １４２.１
合物 １(２０.０ ｍｇ)ꎮ (Ｃ￣９)ꎬ １４１.４ ( Ｃ￣４′)ꎬ １２０.７ ( Ｃ￣１′)ꎬ １１９.５ ( Ｃ￣
取 １５０.０ ｇ 乙酸乙酯层萃取物ꎬ加入乙酸乙酯 ６ａ)ꎬ １１６.４ (Ｃ￣１０ａ)ꎬ １１１.３ (Ｃ￣７)ꎬ １１０.４ ( Ｃ￣２′ꎬ
使其完全溶解ꎬ８０ 目硅胶与样品 １ ∶ １( ｍ / ｍ) 混合 ６′)ꎬ ８１.１ (Ｃ￣４ａ)ꎬ ８０.６ (Ｃ￣２)ꎬ ７５.３ (Ｃ￣４)ꎬ ７４.２
均匀ꎬ挥干溶剂备用ꎮ ２００ ~ ３００ 目硅胶与样品 １ ∶ (Ｃ￣１０ｂ)ꎬ ７１. ６ ( Ｃ￣３)ꎬ ６４. ５ ( Ｃ￣１１)ꎬ ６０. ３ ( ９￣
１０(ｍ / ｍ)湿法装柱ꎬ干法加入拌好样品的硅胶ꎬ以 ＯＣＨ )ꎮ 以上数据与文献( 叶海亚等ꎬ１９９６) 报道
３
二氯甲烷－甲醇(１ ∶ ０ ~ ０ ∶ １ꎬＶ / Ｖ) 梯度洗脱ꎮ 回 基本一致ꎬ故鉴定化合物 １ 为 １１￣Ｏ￣没食子酰岩白
收溶剂ꎬ正相薄层硅胶板监视成分ꎬ合并相同的组 菜素(１１￣Ｏ￣ｇａｌｌｏｙｌｂｅｒｇｅｎｉｎ)ꎮ
分ꎬ得到 ７ 个流分( ＥＡ－ＥＨ)ꎮ 流分 ＥＡ(６.７ ｇ) 经 化合物 ２ 白色固体粉末ꎮ ＥＳＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ: ４９３
－
１
ＯＤＳ 梯度洗脱后ꎬ经半制备型高效液相甲醇 － 水 [ Ｍ － Ｈ] ꎬ 分 子 式 为 Ｃ Ｈ Ｏ ꎮ Ｈ￣ＮＭＲ ( ４００
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(７９ ∶ ２１ꎬＶ / Ｖ)分离ꎬ得到化合物 ９(１.４ ｍｇ)ꎮ 流分 ＭＨｚꎬ Ｃ Ｄ Ｎ) δ: ７.７９ (２Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣２′ꎬ ６′)ꎬ ７.７８
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