Page 53 - 《广西植物》2024年第2期

２ 期 张世鑫等: 橡胶树形成层组织的酵母双杂交 ｃＤＮＡ 文库构建及 ＨｂＨＤＡ６ 互作蛋白筛选 ２ ５ ５

好(张世鑫等ꎬ２０１１)ꎮ 据此ꎬ我们建立了一种稳定 ＣＨＥＮ ＨＪꎬ ＺＨＡＮＧ Ｈꎬ ＧＡＯ Ｌꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１７. Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ
的 ＣＯＲ 诱导橡胶树萌条次生乳管分化的实验系 ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ ｙｅａｓｔ ｔｗｏ￣ｈｙｂｒｉｄ ｃＤＮＡ ｌｉｂｒａｒｙ ｏｆ
统ꎬ在 ＣＯＲ 处理后的 ５ ｄ 内可以观察到诱导形成 ｔｈｅ ａｂｏｖｅｇｒｏｕｎｄ ｐａｒｔ ａｎｄ ｕｎｄｅｒｇｒｏｕｎｄ ｐａｒｔ ｏｆ ｒｕｂｂｅｒ ｔｒｅｅ
(Ｈｅｖｅａ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ Ｍüｌｌ. Ａｒｇ.) [Ｊ]. Ｍｏｌ Ｐｌａｎｔ Ｂｒｅｅｄꎬ １５
的次 生 乳 管 ( Ｚｈａｎｇ ＆ Ｔｉａｎꎬ ２０１５ꎻ Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ
(２): ４６８－４７３. [陈洪举ꎬ 张浩ꎬ 高乐ꎬ 等ꎬ ２０１７. 巴西橡
２０１５ꎬ ２０１６ꎻ Ｗｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１６ꎬ ２０２３ꎻ 张 世 鑫 等ꎬ
胶树地上部地下部均一化酵母双杂交 ｃＤＮＡ 文库构建及
２０１８)ꎮ 近期我们发现组蛋白去乙酰化酶( ＨＤＡ)
评价 [Ｊ]. 分子植物育种ꎬ １５(２): ４６８－４７３.]
的抑制剂———曲古抑菌素 Ａ( ＴＳＡ) 不但能够诱导
ＦＩＥＬＤＳ Ｓꎬ １９９３. Ｔｈｅ ｔｗｏ￣ｈｙｂｒｉｄ ｓｙｓｔｅｍ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｐｒｏｔｅｉｎ￣
橡胶树次生乳管分化( Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１６)ꎬ而且
ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ [Ｊ]. Ｍｅｔｈｏｄｓꎬ ５(２): １１６－１２４.
ＣＯＲ 处理能够显著提高形成层区的组蛋白乙酰化 ＧＡＯ ＸＨꎬ ＪＩＡ ＲＹꎬ ＷＡＮＧ ＭＳꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１４. Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ
程度和 ＨＤＡ 活性ꎬ尤其是 ＨＤＡ６ 的含量和基因表 ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｃＤＮＡ ｌｉｂｒａｒｙ ｆｏｒ ｕｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｙｅａｓｔ ｔｗｏ￣
达都受 ＣＯＲ 的影响( 未发表资料)ꎮ 基于这些工 ｈｙｂｒｉｄ ｓｙｓｔｅｍ ｆｒｏｍ ｄｕｃｋ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｃｅｌｌｓ ｐｏｓｔ￣
作基础以及组蛋白乙酰化修饰作为基因表达调控 ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄｕｃｋ ｅｎｔｅｒｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ [Ｊ]. Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ Ｒｅｐꎬ ４１:
的重要方式ꎬ本文构建了 ＣＯＲ 处理橡胶树萌条树 ４６７－４７５.
皮 形 成 层 组 织 的 酵 母 双 杂 交 文 库ꎬ 并 通 过 ＧＯＭＥＺ ＪＢꎬ １９８２. Ａｎａｔｏｍｙ ｏｆ Ｈｅｖｅａ ａｎｄ ｉｔｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｎ ｌａｔｅｘ
ＨｂＨＤＡ６ 诱饵载体进行酵母双杂交文库筛选ꎬ共 ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ [Ｍ]. Ｋｕｌａ Ｌｕｍｐｅｒ: Ｍａｌａｙｓｉａ Ｒｕｂｂｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ
ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｂｏａｒｄ.
筛选到与 ＨｂＨＤＡ６ 基因相互作用的 ２２ 种蛋白ꎮ 根
ＨＡＯ ＢＺꎬ ＷＵ ＪＬꎬ ２０００. Ｌａｔｉｃｉｆｅｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ Ｈｅｖｅａ
据 ＵｎｉＰｒｏｔ 的蛋白信息预测ꎬ这些蛋白可分为氧化
ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ: ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｊａｓｍｏｎｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ
还原酶、水解酶、蛋白 / ＤＮＡ / ＲＮＡ 结合、运输、异构
ｌｉｎｏｌｅｎｉｃ ａｃｉｄ [Ｊ]. Ａｎｎ Ｂｏｔ Ｌｏｎｄｏｎꎬ ８５(１): ３７－４３.
酶、染色质调节剂和糖蛋白 ７ 个类别ꎬ其中水解
ＩＣＨＩＨＡＲＡ Ａꎬ ＳＨＩＲＡＩＳＨＩ Ｋꎬ ＳＡＴＯ Ｈꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ １９７７. Ｔｈｅ
酶、氧化还原酶、蛋白 / ＤＮＡ / ＲＮＡ 结合 ３ 种类别的 ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｃｏｒｏｎａｔｉｎｅ [ Ｊ]. Ｊ Ａｍ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃꎬ ９９(２):
蛋白较多ꎮ 亚细胞定位结果ꎬ显示主要集中在细 ６３６－６３７.
胞膜、叶绿体、线粒体和细胞核等ꎮ 下一步ꎬ我们 ＫＡＴＳＩＲ Ｌꎬ ＳＣＨＩＬＭＩＬＬＥＲ Ａꎬ ＳＴＡＳＷＩＣＫ Ｐꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ
将对 ＨｂＨＤＡ６ 与这 ２２ 个互作蛋白进行点对点酵 ２００８. ＣＯＩ１ ｉｓ ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ ｏｆ ａ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｆｏｒ
母双杂交验证ꎬ解析这些蛋白的相互作用ꎬ为后续 ｊａｓｍｏｎａｔｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ ｆａｃｔｏｒ ｃｏｒｏｎａｔｉｎｅ
筛选组蛋白乙酰化修饰调控橡胶树次生乳管分化 [Ｊ]. Ｐｌａｎｔ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡꎬ １０５(１９): ７１００－７１０５.
ＬＩ ＫＱꎬ ＷＡＮＧ ＳＳꎬ ＺＥＮＧ ＸＨꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１６. Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ
的靶标蛋白奠定基础ꎬ为构建橡胶树次生乳管分
ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｙｅａｓｔ ｔｗｏ￣ｈｙｂｒｉｄ ｃＤＮＡ ｌｉｂｒａｒｙ ｏｆ ｆｌｏｗｅｒ ｂｕｄ
化的分子调控网络提供理论依据ꎮ
ｆｒｏｍ ａ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｔｈｅｒｍｏ￣ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｇｅｎｉｃ ｍａｌｅ ｓｔｅｒｉｌｅ ｌｉｎｅ
ＴＥ５Ａ ｉｎ Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ [Ｊ]. Ｃｈｉｎ Ｊ Ｏｉｌ Ｃｒｏｐ Ｓｃｉꎬ ３８(３):
参考文献: ２９２－２９９. [李可琪ꎬ 王莎莎ꎬ 曾新华ꎬ 等ꎬ ２０１６. 甘蓝型油
菜温敏 ＧＭＳＴＥ５Ａ 幼蕾酵母双杂交 ｃＤＮＡ 文库的构建及
ＡＬＢＲＥＴＳＲＮ Ｃꎬ ＫＡＬＬＡＮＤ ＫＨꎬ ＨＡＵＫＡＮＥＳ ＢＩꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ 筛选 [Ｊ]. 中国油料作物学报ꎬ ３８(３): ２９２－２９９.]
１９９０. Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｍａｇｎｅｔｉｃ ｂｅａｄｓ ｗｉｔｈ ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ ａｔｔａｃｈｅｄ ＬＩＵ ＨＦꎬ ＷＵ ＪＬꎬ ＨＡＯ ＢＺꎬ ２００１. Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｊａｓｍｏｎｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ
ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ｉｎ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ: ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｏｎ ｌａｔｉｃｉｆｅｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ
ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｅａｓｌｅｓ ｖｉｒｕｓ ｍＲＮＡ ｆｒｏｍ ａ ｃｒｕｄｅ ｃｅｌｌ ｌｙｓａｔｅ Ｈｅｖｅａ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ [ Ｊ]. Ｃｈｉｎ Ｊ Ｔｒｏｐ Ｃｒｏｐｓꎬ ２２ ( ３): ６ －
[Ｊ]. Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍꎬ １８９(１): ４０－５０. １６. [刘惠芳ꎬ 吴继林ꎬ 郝秉中ꎬ ２００１. 茉莉酸和其他激素
ＣＨＡＯ ＪＱ ꎬ ＷＵ ＳＨꎬ ＳＨＩ ＭＪꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２３. Ｇｅｎｏｍｉｃ ｉｎｓｉｇｈｔ 对巴西橡胶树乳管分化的协同作用 [Ｊ]. 热带作物学报ꎬ
ｉｎｔｏ ｄｏｍｅｓｔｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｕｂｂｅｒ ｔｒｅｅ [ Ｊ ]. Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎꎬ ２２(３): ６－１６.]
１４(１): ４６５１. ＮＩＥ ＺＹꎬ ＫＡＮＧ ＧＪꎬ ＱＩＮＧ ＨＤꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２２. Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａ
ＣＨＡＯ ＪＱꎬ ＺＨＡＯ ＹＪꎬ ＷＵ ＳＨꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２１. Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｎｏｒｍａｌｉｚｅｄ Ｈｅｖｅａ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ ｌａｔｅｘ ＭＹＴＨ ｃＤＮＡ ｌｉｂｒａｒｙ ａｎｄ
ＨｂＨＭＧＲ１￣ｉｎｔｅｒａｃｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｌａｔｅｘ ｏｆ ｖｉｒｇｉｎ ａｎｄ ｔａｐｐｅｄ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ＨｂＳＲＰＰ７ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ [Ｊ]. Ｃｈｉｎ Ｊ Ｔｒｏｐ
ｒｕｂｂｅｒ ｔｒｅｅ (Ｈｅｖｅａ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ Ｍｕｅｌｌ. Ａｒｇ.) [Ｊ]. Ｍｏｌ Ｐｌａｎｔ Ｃｒｏｐｓ: １－ １２ [２０２３－ ０９－ ２５]. ｈｔｔｐ:/ / ｋｎｓ.ｃｎｋｉ.ｎｅｔ/ ｋｃｍｓ/
Ｂｒｅｅｄꎬ １９(２４): ８１５１－８１５９. [晁金泉ꎬ 赵一杰ꎬ 吴绍华ꎬ ｄｅｔａｉｌ/ ４６.１０１９.Ｓ.２０２２１０１２.１５０４.００８.ｈｔｍｌ. [聂智毅ꎬ 康桂
等ꎬ ２０２１. 巴西橡胶树 ＨｂＨＭＧＲ１ 在开割前后胶乳中的互 娟ꎬ 覃怀德ꎬ 等ꎬ ２０２２. 橡胶树膜系统酵母双杂交 ｃＤＮＡ

作蛋白筛选 [Ｊ]. 分子植物育种ꎬ １９(２４): ８１５１－８１５９.] 文库构建及 ＨｂＳＲＰＰ７ 互作蛋白筛选 [Ｊ]. 热带作物学报: