Page 68 - 《广西植物》2024年第2期
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表 1 该文所用的引物和序列
Table 1 Primers and sequences used in this study
引物 Primer 序列 (5′-3′) Sequence (5′-3′) 用途 Usage
F: ATGGTTGTGAAACTATACGGACAGG 基因克隆
GSTF12
R: TCAAGCTAATCCAAAACCAGCC Gene clone
F: TTTGAAATCAGTGTGAATCAGCTTC 启动子克隆
GSTF12pro
R: TGAGAAGAAGTGAGAGTAGATGTGT Promoter clone
F: CTCAAAGTGAAGCTCGGGGT 荧光定量 PCR
q ̄GSTF12
R: CGTAACCTCTTCCCACCACC Real ̄time PCR
F: CATCCTCCGTCTCGACCTTG 荧光定量 PCR 内参基因
Actin2
R: AGTCCACAGCGACAAAGGAG Reference gene of real ̄time PCR
表 2 该文所用的软件及网址
Table 2 Software and websites used in this study
软件 Software 网址 Website 用途 Usage
理化特性分析
ExPASY ProtScale https: / / web.expasy.org /
Analysis of physicochemical properties
亚细胞定位
Plant ̄PLoc server www.csbio.sjtu.edu.cn / bioinf/ plant/
Sub ̄cellular localization
跨膜结构分析
TMHMM Server 2.0 https: / / sevices.healthtech.dtu.dk / services/ TMHMM ̄2.0 /
Analysis of protein transmembrane
磷酸化位点分析
NetPhos 3.1 http: / / www.cbs.dtudk / services/ NetPhos/
Phosphorylation site analysis
蛋白质信号肽预测
SignalP 5.0 https: / / sevices.healthtech.dtu.dk / services/ SignalP ̄5.0 /
Protein signal peptide prediction
蛋白质三级结构
SWISS ̄MODEL https: / / www.swissmode.expasy.org /
Three ̄dimensional structure of protein
保守基序分析
MEME http: / / meme ̄suite.org / meme /
Conserved motif analysis
保守结构域分析
SMART http: / / smart.embl ̄heidelberg.de /
Conserved domains analysis
蛋白互作分析
STRING https: / / string ̄db.org /
Protein interaction analysis
顺式作用元件分析
Plantcare http: / / bioinformatics.psb.ugent.be / webtools/ plantcare / html/
Cis ̄acting regulatory element analysis
顺式作用元件可视化
TBtools Chen et al.ꎬ 2020
Visualization of cis ̄acting regulatory elements
F / R 为引物ꎬ克隆芥菜 BjGSTF12 基因ꎮ 经过 PCR 片段 与 甘 蓝 型 油 菜 BnGSTF12 ( B. napusꎬ XM _
扩展ꎬ获得目的条带如图 1 所示ꎮ 测序结果显示ꎬ 013794351)、 白菜(Brassica rapaꎬXM_009127922.3)、
芥菜 BjGSTF12 基因的基因组序列和开放阅读框 拟 南 芥 AtGSTF12 ( Arabidopsis thalianaꎬ NM _
序列分别为 808、651 bpꎮ 121728.4)核苷酸序列的同源性分别为 94%、94%
利用 Gene Structure Display Server 2.0 软件绘制 和 88%ꎮ 因此ꎬ将该芥菜基因命名为 BjGSTF12ꎮ
芥菜 BjGSTF12 基 因 结 构 图ꎮ 由 图 2 可 知ꎬ 芥 菜 2.2 芥菜 BjGSTF12 蛋白序列的生物信息学分析
BjGSTF12 基因序列中包含 2 个内含子ꎬ内含子序列 利用 ProtParam 对芥菜 BjGSTF12 基因编码氨
分别 在 148 ~ 232 bp、 282 ~ 353 bp 之 间ꎮ 芥 菜 基酸序列进行分析发现ꎬ芥菜 BjGSTF12 基因编码
BjGSTF12 基因全长 CDS 序列为 651 bpꎬ编码 216 个 216 个氨基酸ꎬ分子量为 24.80 kDaꎬ原子组成为
氨基酸ꎮ 通过 BLAST 在线比对ꎬ芥菜 GSTF12 基因 C 1121 H 1765 N 297 O 313 S ꎬ主要由亮氨酸( Leuꎬ11.6%)、
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