Page 100 - 《广西植物》2025年第1期
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                 Abstract: In order to exploreꎬ the ecological adaptation mechanisms of Anemone shikokiana in two distinct habitatsꎬ
                 namely full ̄light hilltop scrub and shady mixed broadleaved ̄coniferous forestꎬ and to develop its molecular markersꎬ
                 Illumina high ̄throughput sequencing technology for leaves of A. shikokiana collected during the flowering stage to obtain
                 functional annotation and differentially expressed genes (DEGs). The results were as follows: (1) A total of 53 536
                 Unigenes sequences were obtainedꎬ of which 27 448 were successfully annotated. (2) A total of 5 635 DEGs were
                 obtainedꎬ 1 600 up ̄regulated and 4 035 down ̄regulated genes comparing A. shikokiana in full ̄light hilltop scrub and in
                 shady mixed coniferous forest. A total of 2 460 DEGs were annotated to 2 533 tertiary entries in GO database. In
                 additionꎬ 1 051 DEGs were involved in 113 KEGG pathways. (3) The metabolic pathways adapted to heterogeneous
                 habits in A. shikokiana mainly involved photosytheis ̄antenna protein pathway and flavonoid biosynthesis pathway. In the
                 photosynthesis ̄antenna protein pathwayꎬ the expression of lhca5 was up ̄regulatedꎬ while the expressions of lhcb1ꎬ lhcb2
                 and lhcb3 were down ̄regulated. Meanwhileꎬ in the flavonoid biosynthesis pathwayꎬ the expressions of chsꎬ c4hꎬ f3′hꎬ
                 f3hꎬ flsꎬ ansꎬ chiꎬ ccoaomt and hct were all up ̄regulated. (4) A total of 6 006 Unigenes containing 7 146 SSRs were
                 obtained from the transcriptome data of A.shikokiana. In the identified SSRsꎬ the dominant repeat motifs were single
                 nucleotide repeats in 106 repetitive motif types. Among the 100 pairs of EST ̄SSR primersꎬ a total of 68 pairs were
                 effective and 11 pairs with polymorphismꎬ and 24 polymorphic fragments were amplified. Overallꎬ in this paperꎬ for the
                 first time EST ̄SSR molecular markers were developedꎬ which would provide important molecular marker resource for the
                 conservation and utilization of A. shikokiana.
                 Key words: heterogeneous habitatꎬ Anemone shikokianaꎬ transcriptomeꎬ EST ̄SSRꎬ ecological adaptation mechanisms



                山东银莲花( Anemone shikokiana) 是毛茛科银               调控(张椿雨等ꎬ2007)ꎮ 转录组作为特定组织或
            莲花属(Anemone)的多年生草本植物ꎬ间断分布于                         细胞在某一发育阶段或功能状态下所有 mRNA 的
            中国胶东半岛和日本四国岛( 王鸷等ꎬ2014)ꎮ 在                         集合ꎬ是研究基因功能与结构的有效手段( 鲁艳辉
            中国被列入« 世界自然保护联盟濒危物种红色名                             等ꎬ2021)ꎮ 运用 Illumina 高通量测序技术对植物
            录»(IUCN) 易危( VU) 等级ꎬ为典型的稀有物种                       转录组进行测序分析ꎬ可高效、精准地获得大量特
            (陈春利等ꎬ2018)ꎮ 其根可入药ꎬ有清热解毒、止                         定组织或细胞中表达的基因序列ꎬ实现在无参考
            血除湿的功效(刘琼ꎬ2014)ꎻ因其株型优美、花大、                         基因组的基础上进行分析( 郭连安等ꎬ2021)ꎮ 同
            花期长ꎬ在园艺上具有潜在的开发价值( 侯元同和                            时ꎬ转录组 分 析 应 用 于 两 色 金 鸡 菊 ( 孙 浩 男 等ꎬ
            刘冰ꎬ2010)ꎮ                                          2024)、直立型扁蓿豆( 乌日娜等ꎬ2022) 等多种植
                 山东银莲花生长在海拔 600 m 以上的山顶灌                       物ꎬ并且已广泛应用于探究不同生境下植物的适
            丛和针阔混交林下两种异质生境中ꎬ山东灌丛常                              应性(周春苗等ꎬ2022ꎻ韦陈彬等ꎬ2022)ꎮ
            年全光照ꎬ土壤是以碎石、沙粒为主的砂质性土                                  分子标记可用于植物的系统进化分析、功能
            壤ꎻ而针阔混交林下阴暗潮湿ꎬ土壤为营养丰富且                             基因标记和分子辅助育种等ꎬ随着高通量测序技
            疏松 的 腐 殖 土 ( Pang et al.ꎬ 2020)ꎮ 岳 喜 元 等           术的发展ꎬ由转录组测序得到的 EST ̄SSR 分子标
            (2023)研究表明ꎬ黄河三角洲的芦苇通过调整个                           记被作为最常用的分子标记技术之一ꎮ 其操作简
            体大小与叶性状适应异质生境下水分条件变化ꎬ                              单ꎬ具有共显性遗传、稳定性好和准确度高等优于
            王妍方等(2023)通过木棉表型可塑性探究其适应                           其他分子标记的特点(岳远灏等ꎬ2022)ꎮ EST ̄SSR
            干热河谷和热带雨林两种极端环境的机制ꎮ 山东                             标记开发成本低ꎬ适用于无参考基因组的物种ꎬ可
            银莲花则通过改变叶片、根系的形态结构及生理                              有效地推动分子标记技术在植物遗传多样性分
            等策 略 适 应 完 全 不 同 的 生 长 环 境 ( 于 文 英 等ꎬ              析、指纹图谱构建、种质资源保护、品种鉴定等方
            2019ꎻPang er al.ꎬ 2020ꎻ逄玉娟等ꎬ2022)ꎮ 然而ꎬ             面的应用(杨雄等ꎬ2021)ꎬ目前已在大麻(边境等ꎬ
            至今对该种适应异质生境的分子机制尚不清楚ꎮ                              2023)、辣 椒 ( 田 怀 志 等ꎬ 2023)、 枫 香 ( 李 辉 等ꎬ
            植物适应环境的本质是基因特异性表达的结果ꎬ                              2023)等植物中开发与应用ꎮ 然而ꎬ关于山东银莲
            基因的特异性表达在一定程度上由转录水平进行                              花分子标记的报道尚不多见ꎬ未见公开报道的可
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