Page 200 - 《广西植物》2025年第10期

１ ９ ３ ０ 广 西 植 物 ４５ 卷
处理下ꎬＰｍＷＲＫＹ２ 和 ＰｍＷＲＫＹ６ 均呈上调表达趋
势ꎬ在第 ５ 天表达量达到最高且显著高于对照组
(图 ４:Ａ)ꎮ 以上结果表明ꎬＡＢＡ 和 ＡＢＡ＋Ｃａ 处理
２＋
可能正向调控 ＰｍＷＲＫＹ２ 和 ＰｍＷＲＫＹ６ 的表达ꎮ
在 ＳＡ 处理下ꎬＰｍＷＲＫＹ２ 和 ＰｍＷＲＫＹ６ 随着处
理时间的增加而上调ꎬ均在处理第 ５ 天表达量最
２＋
高ꎻ在 ＣＫ＋Ｃａ 处理下ꎬＰｍＷＲＫＹ２ 的表达量在第 １
天显著高于对照ꎬ在第 ３ 天和第 ５ 天无显著性差
２＋
异ꎬ 推 测 Ｃａ 处 理 早 期 能 诱 导 ＰｍＷＲＫＹ２ 表 达ꎬ
ＰｍＷＲＫＹ６ 的表达呈先下降后上升的趋势ꎬ在整个
过程中ꎬ表达量均显著高于对照组ꎬ说明 Ｃａ 能诱
２＋
２＋
导 ＰｍＷＲＫＹ６ 的 表 达ꎻ 在 ＳＡ ＋ Ｃａ 处 理 下ꎬ
ＰｍＷＲＫＹ２ 在整个过程中呈上调表达趋势且在第 ３
天和第 ５ 天显著高于 ＣＫ＋Ｃａ 处理ꎬ在第 ３ 天显著
２＋
高于 ＳＡ 处理ꎬ但在第 ５ 天其表达量显著低于 ＳＡ
处理ꎬＰｍＷＲＫＹ６ 呈先下降后上升趋势ꎬ在第 ５ 天
显著高于对照和 ＳＡ 处理( 图 ４:Ｂ)ꎮ 以上结果说
２＋
明ꎬＳＡ 和 Ｃａ 可能正向调控这两个基因的表达ꎬ
２＋
图 １ ＰｍＷＲＫＹ２ (Ａ)和 ＰｍＷＲＫＹ６(Ｂ)蛋白的 其中 Ｃａ 处理前期能显著诱导 ＰｍＷＲＫＹ２ 表达ꎮ
系统进化树分析 在 ＭｅＪＡ 处 理 下ꎬ ＰｍＷＲＫＹ２ 与 ＰｍＷＲＫＹ６ 的
Ｆｉｇ. １ Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＰｍＷＲＫＹ２(Ａ)ａｎｄ 表达量随处理时间的增加而上调ꎬ在处理第 １ 天
ＰｍＷＲＫＹ６(Ｂ) ｐｒｏｔｅｉｎｓ ＰｍＷＲＫＹ２ 基 因 与 对 照 组 相 比 无 显 著 变 化ꎬ 而
ＰｍＷＲＫＹ６ 基因显著低于对照ꎬ随着处理时间延长
炬松只在 Ｃ 端含有 １ 个 ＷＲＫＹ 保守结构域ꎬ属于 至第 ３ 天和第 ５ 天ꎬ这两个基因的表达量均显著高
Ⅱｃ 家族成员ꎬ马尾松与其余物种的蛋白序列在 Ｃ 于对照ꎬ说明 ＭｅＪＡ 的积累能够诱导 ＰｍＷＲＫＹ２ 与
２＋
端、Ｎ 端各含有 １ 个 ＷＲＫＹ 保守结构域ꎬ锌指结构 ＰｍＷＲＫＹ６ 的表达ꎻ在 ＣＫ＋Ｃａ 处理下ꎬＰｍＷＲＫＹ２
为 Ｃ２Ｈ２(Ｃ￣Ｘ４￣Ｃ￣Ｘ２３￣Ｈ￣Ｘ￣Ｈ) 型ꎬ属于Ⅰｃ 家族成 的表达量在处理第 １ 天显著高于对照组ꎬ在第 ３ 天
员(图 ２)ꎻＰｍＷＲＫＹ６ 蛋白与其他 １５ 条序列 Ｎ 端 和第 ５ 天该基因的表达与对照组无显著性差异ꎬ
２＋
均含有 １ 个高度保守的 ＷＲＫＹＧＱＫ 七肽结构域ꎬ 说明 Ｃａ 处理前期能够诱导 ＰｍＷＲＫＹ２ 的表达ꎬ其
在 Ｃ 端含有 １ 个 Ｃ２Ｈ２ 型锌指结构序列ꎬ其配体模 诱导效应可能随着时间延长而减弱ꎬ而 ＰｍＷＲＫＹ６
式为 Ｃ￣Ｘ５￣Ｃ￣Ｘ２３￣Ｈ￣Ｘ￣Ｈꎬ 属于 ＷＲＫＹ 家族的Ⅱｂ 呈先下降后上升的表达趋势ꎬ其表达量在整个处
亚家族成员(图 ３)ꎮ 理过程均显著高于对照组( 图 ４:Ｃ)ꎮ 以上结果说
２.２ ＰｍＷＲＫＹ２ 和 ＰｍＷＲＫＹ６ 基因表达分析 明ꎬ ＭｅＪＡ 和 ＭｅＪＡ ＋ Ｃａ ２＋ 处 理 均 能 显 著 诱 导
利用 荧 光 定 量 ＰＣＲ 技 术 分 析 ＰｍＷＲＫＹ２ 和 ＰｍＷＲＫＹ２ 与 ＰｍＷＲＫＹ６ 的表达ꎮ
２＋
ＰｍＷＲＫＹ６ 在不同外源激素及相应 Ｃａ 添加处理 在 ＧＡ 处理下ꎬＰｍＷＲＫＹ２ 与 ＰｍＷＲＫＹ６ 的表
下的 表 达 模 式ꎮ 结 果 表 明ꎬ 在 ＡＢＡ 处 理 下ꎬ 达在处理第 １ 天与对照组相比没有显著性差异ꎬ
２＋
ＰｍＷＲＫＹ２ 和 ＰｍＷＲＫＹ６ 的表达均随着处理时间的 在第 ３ 天和第 ５ 天均显著高于对照ꎻＣＫ＋Ｃａ 处理
增加而上调且显著高于对照处理ꎬ表明 ＡＢＡ 能诱 下ꎬＰｍＷＲＫＹ２ 在第 １ 天 显 著 高 于 对 照 和 其 他 处
２＋ 理ꎬ在第 ３ 天和第 ５ 天与对照组无显著性差异ꎬ而
导这两个基因表达ꎻ在 ＣＫ＋Ｃａ 处理下ꎬＰｍＷＲＫＹ２
在第 １ 天显著高于对照组ꎬ第 ３ 天和第 ５ 天与对照 ＰｍＷＲＫＹ６ 的表达在整个过程中均显著高于对照
２＋
无明显差异ꎬＰｍＷＲＫＹ６ 呈先下降后上升的趋势ꎬ 组ꎬ说明 Ｃａ 处理能诱导这两个基因的表达ꎻ在
整个过程均显著高于对照ꎬ说明 Ｃａ 对这两个基 ＧＡ＋Ｃａ 处理下ꎬＰｍＷＲＫＹ２ 与 ＰｍＷＲＫＹ６ 表达量
２＋
２＋
２＋ 均高于对照组ꎬ呈现上调表达趋势( 图 ４:Ｄ) ꎮ 以
因的表达具有一定的诱导作用ꎻＡＢＡ 和 ＡＢＡ＋Ｃａ