Page 133 - 《广西植物》2025年第8期
P. 133

8 期                     冯雨等: 热形态建成中 HY5 抑制 SAUR1 / 2 / 3 / 4 的转录                          1 4 9 9

                                                 表 1  qRT ̄PCR 引物序列
                                        Table 1  The primer sequences used for qRT ̄PCR
                   引物                   序列 (5′→3′)                   引物                  序列 (5′→3′)
                   Primer              Sequence (5′→3′)             Primer             Sequence (5′→3′)

                  UBQ1 ̄F           TTCCTTGATGATGCTTGCTC            SAUR2 ̄R          GGCTTTACGCAACAAGGCTT
                  UBQ1 ̄R           TTGACAGCTCTTGGGTGAAG            SAUR3 ̄F          ACTTCAGGGCTTGTTCCGAA
                  SAUR1 ̄F          TGATCGGACTCTCTCAGGCA            SAUR3 ̄R          GGTATCGTCAAGCCACCCAT
                  SAUR1 ̄R          GTACCCGACGTAGCCAAGAG            SAUR4 ̄F          TGTCGCGTGTGATCAACTCT
                  SAUR2 ̄F         GGAGAAGACGAGATGGAGACG            SAUR4 ̄R         TCTCCGACATAAACCGCAACA



                                                表 2  ChIP ̄qPCR 引物序列
                                       Table 2  The primer sequences used for ChIP ̄qPCR
                   引物                   序列 (5′→3′)                   引物                  序列 (5′→3′)
                   Primer              Sequence (5′→3′)             Primer             Sequence (5′→3′)
                 SAUR1 ̄F1          GGGTCAAGAGGTCACGAGGA            SAUR3 ̄F1       TGTGTCTTAAACGCGATATCTTTT
                 SAUR1 ̄R1          ACTTCATTATGTTCTAGAAAC           SAUR3 ̄R1         AGCAACAAACCTTCACCCCT
                 SAUR1 ̄F2         AGCCACCTTTGAGAGAAAGCA            SAUR3 ̄F2        GGAGAAGACGAGATGGAGACG
                 SAUR1 ̄R2          TGGGAACAAAAGCATCTGCA            SAUR3 ̄R2      AGAATCTACCAACTGTATTAGTGCG
                 SAUR1 ̄F3         AGCCACCTTTGAGAGAAAGCA            SAUR3 ̄F3      GCAAATAGCTATAGATCTATGGGGA
                 SAUR1 ̄R3          TTGTTTGTGGGGTGAGGCAT            SAUR3 ̄R3      TGTTTGTTAAATTTTCAGCTCCATAGA
                 SAUR1 ̄F4         AGGACAAGGCATAAGCATGTGA           SAUR3 ̄F4         TGAGCTAAGCCATGTGAGCC
                 SAUR1 ̄R4         TGCAAATGAGTAAGAAGGGAGA           SAUR3 ̄R4       AAACAGTACGATGCGATATTTTGA
                 SAUR2 ̄F1         GGAACCACAAACCTCTTCTTCTC          SAUR4 ̄F1      TGGTTGAAAAATCCATCTTACAAAGA
                 SAUR2 ̄R1      TCCAAACATAAATAAGAAGACATGGGT         SAUR4 ̄R1        TGATGTAAGTCAGAGCTGGGT
                 SAUR2 ̄F2          AGACAACGAGGGGAAGAAGT            SAUR4 ̄F2         AGGATGGTGGATCACATGCA
                 SAUR2 ̄R2          AGCTAAGCCATGTGAGCCAG            SAUR4 ̄R2      TGATAAAATTGTGCAGTACTGTTTCA

                 SAUR2 ̄F3        TCAGCTCCATAGATAGTTTTGATCA         SAUR4 ̄F3     ATAAATAATGGAAATGAAACACGTGAC
                 SAUR2 ̄R3          AGCCACAGTCACAATCATCCT           SAUR4 ̄R3      TTAATCAGTTGAGTTAATATCACTGCT
                 SAUR2 ̄F4       AAAATCATGCACTAATTAAGACTTCAC        SAUR4 ̄F4         GCCACCATTTTCAAGAGCCA
                 SAUR2 ̄R4        AGAATCTACCAACTGTATTAGTGCG         SAUR4 ̄R4        AGTTTGCAGAGTTTCACATGGT



            (mut) 和 pEASY ̄SAUR4p( mut)ꎮ 将来自 pEASY ̄             验中作为报告基因使用)ꎮ
            HY5(经 EcoR I 和 Xho I 酶切)的 HY5 编码区插入                1.9 双荧光素酶报告基因检测
            pGreenII 62 ̄SK 载体(经 EcoR I 和 Xho I 酶切)中产               瞬时启动子激活实验采用双荧光素酶报告基
            生 35S:HY5(在实验中作为效应基因使用)ꎮ 通过                        因检测法进行(Ji et al.ꎬ 2021)ꎮ

            Xho I 和 BamH I 酶 切 pEASY ̄SAUR1p、 pEASY ̄            1.10 数据分析
            SAUR2p、pEASY ̄SAUR3p 和 pEASY ̄SAUR4p 及其                  采用 IBM SPSS Statistics 进 行 单 因 素 方 差 分
            突变版本以获得启动子区片段ꎬ再将这些片段插                              析ꎬ采用 Duncan’ s 多重比较检验数据间的差异ꎮ
            入 pGreenII 0800 ̄LUC 载体(经 Xho I 和 BamH I 酶          ∗表示差异达到显著水平(P<0.05)ꎬ∗∗表示差异
            切)ꎬ 从 而 得 到 pSAUR1: LUC、 pSAUR2: LUC、              达到极显著水平(P<0.01)ꎬ以及用不同小写字母
            pSAUR3:LUC 和 pSAUR4:LUC 及其突变版本( 在实                 表示差异显著ꎮ
   128   129   130   131   132   133   134   135   136   137   138