Page 156 - 《广西植物》2025年第8期

１ ５ ２ ２ 广 西 植 物 ４５ 卷

Ｍ. ＤＬ２０００ꎻ １－１６. Ｔ ０ 代株系ꎻ ＷＴ. 阴性对照(野生型)ꎻ ＣＫ. 阴性对照(水)ꎻ Ｐ. 阳性对照(农杆菌菌液)ꎮ
Ｍ. ＤＬ２０００ꎻ １ － １６. Ｔ ０ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｓｔｒａｉｎｓꎻ ＷＴ. Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ( ｗｉｌｄ ｔｙｐｅ )ꎻ ＣＫ. Ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ( ｗａｔｅｒ )ꎻ Ｐ. Ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ
(Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐｐ. ｌｉｑｕｉｄ).
图 １ ＢｄＦＫＦ１ 转 ＳＲ１ 的 ＰＣＲ 检测结果
Ｆｉｇ. １ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ＰＣＲ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＢｄＦＫＦ１ ｔｏ ＳＲ１

ｌｉｋｅ)、ｇｅｎｅ＿４３８５０(ＮＰＲ５￣ｌｉｋｅ)、ｇｅｎｅ＿２７８０９(ＵＶＲ８)ꎬ
下调基因 ７ 个ꎬ分别是 ｇｅｎｅ＿５０８１４(ＦＴＳＨ ６)、ｇｅｎｅ＿
６５０１７(ＧＩ)、ｇｅｎｅ＿８３２５５(ＰＲＲ３７)、ｇｅｎｅ＿５２３６３(ＤＮＡ
ｄａｍａｇｅ￣ｂｉｎｄｉｎｇ)、ｇｅｎｅ ＿１５５６ ( ＣＯＮＳＴＡＮＳ￣ＬＩＫＥ ２)、
ｇｅｎｅ＿１３１００(ＡＰＲＲ７)、ｇｅｎｅ＿５７５５３(ＨＹ５)ꎮ
２.３.５ 与光周期相关的差异表达基因 ＧＯ 和 ＫＥＧＧ
功能富集分析 将与光周期相关的差异表达基因
进行 ＧＯ 和 ＫＥＧＧ 功能富集分析ꎬ在 ＳＲ１ ｖｓ ＦＫＦ１
组中结果如图 ７ 和图 ８ 所示ꎬ其中在 ＧＯ 功能富集
气泡图中发现ꎬ与光周期相关的差异表达基因显
著富集在锌离子结合、ｍｅｒ 的营养－生殖相变、射击
系统开发、对辐射的反应、对光刺激的反应、对非
生物刺激的反应、生殖芽系统发育、射击系统开发
的规律、生殖过程的调节、胚胎后发育的调控、多

ＷＴ. 对 照 组ꎬ ｜ ｌｏｇ ２ ( Ｆｏｌｄ Ｃｈａｎｇｅ ) ｜ ＝ １ꎻ ＢｄＦＫＦ１￣ＯＥ. 细胞生物过程的调控、多细胞生物发育的调控、花
ＢｄＦＫＦ１ 转基因烟草ꎻ . 差异极显著(Ｐ<０.０００ １)ꎮ
发育调控、发育过程的调节、光周期和开花、光周
ＷＴ. Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐꎬ ｜ ｌｏｇ ２ ( Ｆｏｌｄ Ｃｈａｎｇｅ ) ｜ ＝ １ꎻ ＢｄＦＫＦ１￣
期、磷脂酰乙醇胺结合、大环内酯结合、花朵发育、
ＯＥ. ＢｄＦＫＦ１ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｔｏｂａｃｃｏꎻ . Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ａｒｅ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ
ＦＫ５０６ 结合 ２０ 条通路中ꎬ其中富集程度较大的在
ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ (Ｐ<０.０００ １).
图 ２ 转基因烟草中 ＢｄＦＫＦ１ 基因表达量 ＦＫ５０６ 结合、大环内酯结合、光周期、光周期和开
Ｆｉｇ. ２ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＢｄＦＫＦ１ ｇｅｎｅ ｉｎ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｔｏｂａｃｃｏ 花、磷脂酰乙醇胺结合、花发育调控 ６ 条通路中ꎮ
ＫＥＧＧ 富集气泡图发现显著富集在植物激素信号
２.３.４ 与光周期相关的差异表达基因聚类热图分 转导和昼夜节律－植物 ２ 条通路中ꎮ
析 将与光周期相关的差异表达基因进行聚类分 ２.４ 转 ＢｄＦＫＦ１ 基因烟草表型分析
析ꎬ结果如图 ６ 所示ꎬ其中在 ＳＲ１＿ｖｓ＿ＦＫＦ１ 组中检 以野生型烟草(ＳＲ１)为对照组ꎬ对转基因烟草
测 到 上 调 基 因 ７ 个ꎬ 分 别 是 ｇｅｎｅ ＿ １１４１９ ( ｒｏｏｔ (ＢｄＦＫＦ１￣ＯＥ) 的第一朵花开放时间进行记录ꎬ结
ｐｈｏｔｏｔｒｏｐｉｓｍ ｐｒｏｔｅｉｎ ２)、ｇｅｎｅ＿２５６５２ ( ａｕｘｉｎ￣ｒｅｇｕｌａｔｅｄ 果(图 ９) 发现ꎬ野生型烟草平均第一朵花开放时
ｐｒｏｔｅｉｎ)、ｇｅｎｅ＿５２１４４(ＡＲＲ９￣ｌｉｋｅ)、ｇｅｎｅ＿６３１９６( ＡＢＣ 间为 ６８.３ ｄꎬ转基因烟草平均第一朵花开放时间为
ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ Ｂ ｆａｍｉｌｙ ｍｅｍｂｅｒ １９)、ｇｅｎｅ＿３１６２３(ＩＡＡ２９￣ ６４.４ ｄꎬ比野生型提前开花 ３.９ ｄꎮ 这表明 ＢｄＦＫＦ１