Page 57 - 《广西植物》2026年第1期

１ 期 王雅珂等: 天贵卷瓣兰内生真菌分离鉴定及其促生作用研究 ５ ３

Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｉｓｏｌａｔｅ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ Ｂｕｌｂｏｐｈｙｌｌｕｍ ｔｉａｎｇｕｉｉꎬ ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅｉｒ ｇｒｏｗｔｈ￣
ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓꎬ ａｎｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅｉｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ. Ｂ. ｔｉａｎｇｕｉｉ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｙａｃｈａｎｇ
Ｏｒｃｈｉｄ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｓｅｒｖｅ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ. Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ａｎｄ
ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｆｒｏｍ Ｂ. ｔｉａｎｇｕｉｉ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ ｔｉｓｓｕｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄꎬ ａｎｄ ｗｅｒｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ
ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ. Ｔｈｅ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ＩＡＡ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ
ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ￣ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ Ｂ. ｔｉａｎｇｕｉｉ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ｗｅｒｅ ｖｅｒｉｆｉｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｐｏｔ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: (１) Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ７４ ｆｕｎｇａｌ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ Ｂ.
ｔｉａｎｇｕｉｉ. Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｔｒａｉｎｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｒｏｏｔｓꎬ ｒｈｉｚｏｍｅｓꎬ ｐｓｅｕｄｏｂｕｌｂｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ ｗｅｒｅ ５ꎬ １４ꎬ ３０ ａｎｄ ２５ꎬ
ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ ｗｅｒｅ １２.５％ꎬ ３５.０％ꎬ ７５.０％ ａｎｄ ６２.５％ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. (２) Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ
ｃｏｌｏｎｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓꎬ ａｆｔｅｒ ｒｅｍｏｖｉｎｇ ｄｕｐｌｉｃａｔｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓａｍｅ
ａｌｔｉｔｕｄｅ ｏｒ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｓｓｕｅꎬ １６ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｓｔｒａｉｎｓ ｒｅｍａｉｎｅｄ. Ｔｈｅｓｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｃｏｖｅｒ ２ ｐｈｙｌａꎬ ４ ｃｌａｓｓｅｓꎬ ７ ｏｒｄｅｒｓꎬ ８ ｆａｍｉｌｉｅｓꎬ
ａｎｄ ８ ｇｅｎｅｒａ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ｍｅｔｈｏｄｓ. (３) Ａｍｏｎｇ ｔｈｅ １６ ｓｔｒａｉｎｓꎬ ４ ｓｔｒａｉｎｓ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｈｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｔｏ
ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅ ｏｒｇａｎｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓꎬ ４ ｓｔｒａｉｎｓ ｃｏｕｌｄ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｅ ｉｎｏｒｇａｎｉｃ ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓꎬ ａｎｄ ３ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ
ＩＡＡ. (４) Ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｂｒｏｔｈ ｏｆ ｓｏｍｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｗａｓ ｓｐｒａｙｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ Ｂ. ｔｉａｎｇｕｉｉ ｓｅｅｄｌｉｎｇｓꎬ ａｎｄ ｓｔｒａｉｎ ＹＪ２
ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｏｖｅｒａｌｌ ｇｒｏｗｔｈ￣ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｍｏｎｇ ａｌｌ ｔｅｓｔｅｄ ｓｔｒａｉｎｓ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ. Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｉｓｏｌａｔｅｄ
ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｆｒｏｍ ｖａｒｉｏｕｓ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ Ｂ. ｔｉａｎｇｕｉｉ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｉｔｈ ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ￣ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ
ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓꎬ ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ ｖａｌｕａｂｌｅ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｆｏｒ ｓｅｅｄｌｉｎｇ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ Ｂ. ｔｉａｎｇｕｉｉ ａｎｄ ｌａｙｉｎｇ ａ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ
ｆｕｒｔｈｅｒ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｉｎｔｏ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｂｕｌｂｏｐｈｙｌｌｕｍ ｔｉａｎｇｕｉｉꎬ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉꎬ ｉｓｏｌａｔｉｏｎꎬ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬ ｇｒｏｗｔｈ￣ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ

植物内生真菌( ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ) 是指一类整 及属(刘准等ꎬ２０１３)、金线莲属( 郭顺星等ꎬ２０００)
个或一段生命周期内都能够在健康寄主植物器官 等ꎬ多数集中于根系内生真菌多样性及促生功能等
内生活ꎬ并且不引起宿主植株产生不良疾病的菌 方面研究(王美娜等ꎬ２０２１)ꎮ 其内生真菌种类主要
群(李姝臻等ꎬ２０２４)ꎬ包括部分潜伏性病原真菌和 隶 属 于 担 子 菌 门 ( Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔａ )、 子 囊 菌 门
菌根真菌等ꎮ 自然界中ꎬ内生真菌主要分布于植 (Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ) 及毛霉门( Ｍｕｃｏｒｏｍｙｃｏｔａ)ꎬ担子菌门
物的根、茎、叶片、种子等细胞间ꎬ能够与大多数植 是最为常见也是最早被发现的兰科菌根真菌门
物共存( Ｃａｒｒｏｌｌꎬ１９８８)ꎮ 植物内生真菌的存在不 ( Ｅｒｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５ )ꎬ 包 括 瘤 菌 根 菌 属
仅对植物的生长发育具有一定的促进作用并提高 (Ｅｐｕｌｏｒｈｉｚａ)、角担菌属(Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ)、Ｓｉｓｔｏｔｒｅｍａ、
植物抗逆性(巨凤等ꎬ２０２１)ꎬ而且其代谢产物还具 胶膜菌属(Ｔｕｌａｓｎｅｌｌａ)等(王美娜等ꎬ２０２１)ꎮ
有抗肿瘤、抗氧化、抗菌等功能ꎬ在医药、农业、环 天贵卷瓣兰( Ｂｕｌｂｏｐｈｙｌｌｕｍ ｔｉａｎｇｕｉｉ) 属于兰科
境保护等方面应用广泛ꎬ可作为抗生素、抗癌药物 (Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ) 石豆兰属( Ｂｕｌｂｏｐｈｙｌｌｕｍ) 附生草本
以及农药的研究ꎬ具有重要的经济价值ꎮ 兰科植 植物ꎬ其花色艳丽夺目ꎬ花形奇特ꎬ姿态优美典雅ꎬ
物作为单子叶植物的一大科ꎬ其因生境等原因内 具有较高的观赏价值与药用价值( 郎楷永和罗敦ꎬ

生真菌更为丰富( Ｄｅａｒｎａｌｅｙꎬ２００７)ꎮ 自然条件下ꎬ ２００７ꎻ肖妮洁ꎬ２０２３)ꎮ 然而ꎬ自然状态下其种子结
兰科植物种子的萌发以及幼苗阶段完全依赖真菌 实率低且对生境有较强的依赖性等原因ꎬ导致野
为其提供养分来进行生长发育ꎬ并且兰科植物内 外种群较少( 赵熙黔等ꎬ２０１３ꎻ蒋强等ꎬ２０２０ꎻ柴胜
生真菌具有一定的专一性ꎬ受到共生真菌的分布 丰等ꎬ２０２２)ꎬ目前已被列入«广西壮族自治区重点
限制( Ｓｔöｃｋｅｌ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１４ꎻ杨建文等ꎬ２０１８)ꎬ这种 保护野生植物名录» 及« 中国生物多样性红色名
高度特化的共生关系对野生兰科的生存至关重 录—高等植物卷»ꎮ 尽管目前已有对该植物组织
要ꎮ 因此ꎬ深入研究其内生真菌的特点ꎬ对珍稀濒 培养的报道ꎬ但仍存在无菌苗及驯化苗生长缓慢
危兰科植物种群的生态恢复具有重要意义( 盖雪 的问题(王雅珂等ꎬ２０２４)ꎮ 因此ꎬ内生真菌的分离
鸽等ꎬ２０１４)ꎮ 目前ꎬ已有多种兰科植物内生真菌 鉴定及其促生作用分析对促进其种苗繁育ꎬ以及
研究的相关报道ꎬ如石斛属( Ｙｕａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ２００９)、白 种质资源的保护具有重要意义ꎮ 目前国内外对石