Page 60 - 《广西植物》2026年第1期

５ ６ 广 西 植 物 ４６ 卷
菌落种类数量相对减少ꎮ 这表明根部最佳消毒时 培养基生长ꎬ分生孢子器呈球形、梨形ꎬ单生或丛
间为 ３ ｍｉｎꎬ其他部位最佳消毒时间为 ５ ｍｉｎꎮ 生ꎬ顶部突起ꎮ ＤＹ２ 菌株菌落圆形ꎬ白色绒毛状ꎬ
２.２ 内生真菌的分离 在培养基平板表面形成一层较薄菌丝ꎬ具有一定
经 １.２.２ 所述方法进行分离培养后在 ＰＤＡ 平 层次ꎬ菌丝较长ꎬ有隔ꎬ有分支ꎮ 另外ꎬＤＹ１、ＤＪ３、
板上陆续长出大量形态存在差异的菌落ꎬ经分离 ＹＪ３、ＹＹ２ 四个菌株生长状况类似ꎬ菌落圆形ꎬ呈绒
纯化培养后共得到 ７４ 株内生真菌ꎬ其中根、横走 毛状ꎬ先为白色后为淡黄色ꎬ菌落年轮状ꎬ菌丝较

茎、假鳞茎以及叶片中分别分离出 ５ 株、１４ 株、３０ 短、有隔、有分支ꎮ
株、２５ 株ꎬ４ 种不同组织的分离频率分别为１２.５％、 ２.４ 天贵卷瓣兰内生真菌分子鉴定
３５.０％、７５.０％、６２.５％ꎮ 依据菌落形态及显微结构 将纯化得到的 １６ 种菌株进行测序ꎬ将所得序
特征ꎬ对 ７４ 株内生真菌进行归纳分类ꎬ把同一海 列提交至 ＧｅｎＢａｎｋ 数据库中进行 ＢＬＡＳＴ 比对ꎬ结
拔、同一器官部位的相同菌株归为同一菌株ꎬ最后 果显示ꎬＤＧ１、ＹＨ１、ＹＪ４、ＹＹ１ 四种菌株分别与茄病
共获得 １６ 种内生真菌ꎬ对其进行编号ꎮ 其中ꎬ从 镰 刀 菌 ( Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ ) ( ＭＮ６２５８４６.１、
假鳞茎 中 分 离 到 的 内 生 真 菌 种 类 最 多ꎬ 共 ７ 种 ＰＰ９９０７０２.１、ＡＭ４１２６４３.１、ＭＴ５２９２６６.１) 的一致性
(ＤＪ１、ＤＪ２、ＤＪ３、ＹＪ１、ＹＪ２、ＹＪ３、ＹＪ４)ꎻ其次是叶片ꎬ 最高ꎬ相似度为 ９７.７４％ ~ １００％ꎻ菌株 ＤＹ３ 与尖孢
共 ５ 种(ＤＹ１、ＤＹ２、ＤＹ３、ＹＹ１、ＹＹ２)ꎻ横走茎及根 镰刀菌(Ｆ. ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ) ( ＭＫ３９２０１５.１) 一致性高达
分离到的内生真菌菌株数量最少ꎬ均 ２ 种( ＤＨ１、 １００％ꎻ ＹＧ１ 和 ＹＪ１ 两 种 菌 株 与 炭 疽 菌 属
ＹＨ１、ＤＧ１、ＹＧ１)ꎮ Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ａｒｘｉｉ(ＫＦ６８７７１７.１)相似度最高ꎬ分别
２.３ 内生真菌形态学鉴定 为 ９９.２１％ 和 ９９.０２％ꎻ ＤＨ１ 与 Ｅｄｅｎｉａ 属 Ｅ.
观察并记录培养过程中菌落的形态特征ꎬ菌 ｇｏｍｅｚｐｏｍｐａｅ ( ＭＦ４９５４５０. １ ) 相 似 度 最 高ꎬ 为
丝显微特征观察结果如图 ２ꎮ 各菌落的生长速度 ９９.２３％ꎻ ＤＪ１ 与 黑 孢 属 Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ ｒｕｂｉ
不一致ꎬＤＨ１ 生长最慢ꎬ１.５ ｍｍｄ ꎻＹＪ２ 生长最 (ＭＮ４８６５５３.１)相似度高达 １００％ꎻＤＪ２ 与须壳孢属
￣１
快ꎬ１０.７ ｍｍｄ ꎮ 将纯化后菌株的菌落生长特征 Ｐｙｒｅｎｏｃｈａｅｔａ ｓｐ. ＤｏＦ２０( ＪＱ３８８２６５.１) 相似度达到
￣１
和菌丝特性与« 真菌鉴定手册» 进行比较ꎬ对分离 ９９.６４％ꎻＤＪ３、ＹＪ３、ＤＹ１、ＹＹ２ 四种菌株均与巨座壳
所得内生真菌进行初步鉴定ꎬ通过观察菌落及显 属 Ｍｕｙｏｃｏｐｒｏｎ ａｌｃｏｒｎｉｉ(ＮＲ＿１６４０５２.１)相似度最高ꎬ
微镜 菌 丝 形 态ꎬ 初 步 鉴 定 ＤＧ１、 ＤＹ３、 ＹＨ１、 ＹＪ４、 一 致 性 为 ９９.３４％ ~ ９９.６８％ꎻ ＹＪ２ 与 木 霉 属
ＹＹ１ 属于镰刀霉属ꎬ在 ＰＤＡ 培养基中表现为白色 Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ(ＭＨ９１１４１８.１)、ＤＹ２ 与脉革
绒毛状ꎬ背面为黄色ꎬ菌丝细长、有隔膜ꎬ分生孢子 菌属 Ｐｈｌｅｂｉａ ａｃｅｒｉｎａ( ＭＴ６０１９５２.１) 的相似度均为
梗有分支或不分支ꎬ分生孢子多为镰刀形或圆柱 １００％ꎮ 以毛霉门(Ｍｕｃｏｒｏｍｙｃｏｔａ) 伞形霉科真菌二
形ꎮ ＹＪ２ 属于木霉属真菌ꎬ在 ＰＤＡ 培养基中生长 型伞霉 Ｕｍｂｅｌｏｐｓｉｓ ｄｉｍｏｒｐｈａ( ＫＭ０１３４４０.１) 为外类
迅速ꎬ绒毛状ꎬ初为白色ꎬ３ ｄ 后边缘逐渐为绿色ꎬ 群对照ꎬ构建系统进化树ꎮ 结果( 图 ３) 显示ꎬ菌株
菌丝细长、具有较多分支ꎬ分生孢子为圆形ꎮ 其余 ＤＧ１、ＹＪ４、ＹＨ１、ＹＹ１ 与镰刀菌属真菌( Ｆｕｓａｒｉｕｍ)

几株菌株形态差异较大ꎬ难判断具体种类ꎮ 其中ꎬ 聚为 小 类ꎬ 而 ＤＹ３ 与 尖 孢 镰 刀 菌 Ｆ. ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ
ＹＧ１ 和 ＹＪ１ 菌株表面相似ꎬ菌落圆形ꎬ３ ｄ 后菌落 ( ＭＫ３９２０１５. １ ) 聚 为 小 类ꎮ ＹＪ１ 和 ＹＧ１ 与
中部呈现白色ꎬ往外依次为黑色、白色ꎬ５ ~ ７ ｄ 后逐 Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ａｒｘｉｉ( ＫＦ６８７７１７.１) 聚为一类且与镰
渐形成年轮状ꎬ紧贴培养基生长ꎬ通过显微镜观察 刀菌 属 ( Ｆｕｓａｒｉｕｍ) 菌 株 聚 为 １ 个 大 类ꎮ ＤＨ１ 与

到其菌丝细长、浅褐色、有隔ꎬ分生孢子椭圆形ꎬ１０ Ｅｄｅｎｉａ ｇｏｍｅｚｐｏｍｐａｅ( ＭＦ４９５４５０. １) 聚为一类ꎬＤＪ２
ｄ 左右平板背面有菌核长出ꎮ ＤＨ１ 菌株菌落圆形ꎬ 与 Ｐｙｒｅｎｏｃｈａｅｔａ ｓｐ. ＤｏＦ２０(ＪＱ３８８２６５.１)聚为一类ꎬ
在培养基正面呈现白色ꎬ背面中心为褐色ꎬ外部为 而这 ４ 种菌株聚为 １ 个大类ꎬ判断其亲缘关系较

棕黄色ꎬ菌丝细长、有隔、有分支、分生孢子圆形ꎮ 近ꎮ ＤＪ１ 与 Ｎｉｇｒｏｓｐｏｒａ ｒｕｂｉ(ＭＮ４８６５５３.１)聚为 １ 个
ＤＪ１ 菌株菌落不规则ꎬ棉絮状ꎬ先为白色后变为黑 小 类ꎬ 并 与 木 霉 属 真 菌 Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ａｃｅｒｉｎａ
褐色ꎬ菌丝垂直生长迅速ꎬ有隔ꎬ分生孢子顶生、黑 ( ＭＴ６０１９５２. １ ) 以 及 巨 座 壳 属 真 菌 Ｍｕｙｏｃｏｐｒｏｎ
色球形ꎮ ＤＪ２ 菌株生长缓慢ꎬ菌落圆形ꎬ５ ~ ７ ｄ 菌 ａｌｃｏｒｎｉｉ(ＮＲ＿１６４０５２.１) 聚为 １ 个大类ꎮ 另外ꎬＤＹ２
落直径仅 １ ｃｍꎬ中心褐色绒毛状ꎬ边缘白色ꎬ紧贴 与脉革菌属真菌 Ｐｈｌｅｂｉａ ａｃｅｒｉｎａ (ＭＴ６０１９５２.１)聚为