Page 107 - 《广西植物》2026年第3期

３ 期 王嘉蕊等: 厚朴萜类合酶基因家族鉴定及表达模式分析 ４ ８ ３

表 １ ｑＲＴ￣ＰＣＲ 扩增特异性引物
Ｔａｂｌｅ １ Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｒｉｍｅｒｓ ｏｆ ｑＲＴ￣ＰＣＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ
基因名 正向引物 (５′－３′) 反向引物 (３′－５′)
Ｇｅｎｅ ｎａｍｅ Ｆｏｒｗａｒｄ ｐｒｉｍｅｒ (５′－３′) Ｂａｃｋｗａｒｄ ｐｒｉｍｅｒ (３′－５′)
Ａｃｔｉｎ ＡＴＧＧＣＧＡＴＧＣＴＧＣＴＧＡＧＧＡＡ ＴＣＡＣＣＡＣＧＡＧＣＣＧＡＴＧＡＡＧＧ
ＭｏＴＰＳ４２ ＧＣＣＴＡＴＴＴＡＧＣＧＧＡＡＧＣＧＡＧＡＴＧ ＣＣＡＡＴＧＡＧＡＧＡＴＧＣＣＡＣＡＧＡＡＡＧＣ
ＭｏＴＰＳ４１ ＧＣＡＧＴＣＧＣＴＧＡＧＧＡＧＴＧＡＴＴＡＴＧ ＣＴＧＡＴＧＧＡＣＧＡＴＴＧＡＧＣＣＴＴＴＡＧＧ
ＭｏＴＰＳ４０ ＧＣＣＴＡＴＴＴＡＧＣＧＧＡＡＧＣＧＡＧＡＴＧ ＣＣＡＡＴＧＡＧＡＧＡＴＧＧＣＣＡＣＡＧＡＡＡＧＣ
ＭｏＴＰＳ４３ ＧＣＴＧＡＡＧＡＧＣＴＧＡＡＧＧＡＡＧＴＡＧＴＧ ＡＣＡＣＣＡＡＧＧＣＧＴＴＧＡＡＴＣＡＣＡＴＣ
ＭｏＴＰＳ２４ ＧＡＧＣＡＴＣＴＧＧＡＧＣＡＡＣＧＡＣＴＴＣ ＣＡＡＣＧＴＣＴＣＧＣＡＧＣＴＴＣＣＴＴＣ
ＭｏＴＰＳ１３ ＴＧＴＣＣＡＴＣＣＡＴＧＴＣＴＴＣＴＣＣＡＴＣＣ ＡＡＣＧＧＣＡＴＣＣＴＣＣＴＴＡＣＡＡＴＣＡＴＣ

２.５ ＭｏＴＰＳ 家族基因成员的顺式作用元件分析 高表 达ꎬ 仅 有 ＭｏＴＰＳ４６ 在 花 和 果 实 中 高 表 达ꎬ
利用 ＰｌａｎｔＣＡＲＥ 分析厚朴 ＭｏＴＰＳ 基因家族启 ＭｏＴＰＳ１０ 和 ＭｏＴＰＳ５１ 同时在叶片和根皮中高表
动子的顺式作用元件ꎬ一共获得 ２２ 类顺式作用元 达ꎬＭｏＴＰＳ４８ 在花和叶片中高表达ꎬＭｏＴＰＳ１５ 在干

件ꎬ其中出现次数最多的为启动子和增强子区域ꎬ 皮和叶片中高表达ꎮ
共出现 ７７１ 次ꎬ其次为光响应元件 ５９２ 次ꎮ 顺式 ＭｏＴＰＳ 基因在不同花期表达量差异较大ꎬ大

作用元件按功能可分为四类ꎬ即与激素调节相关、 多数基因均仅在 １ 个时期高表达ꎬ在初花期表达
与环境胁迫相关、与发育和组织特异性调控相关 量高的 １３ 个基因中ꎬ８ 个属于 ＴＰＳ￣ａ 亚家族、１ 个
及与代谢调控相关( 图 ５)ꎮ 其中ꎬ与激素调节相 属于 ＴＰＳ￣ｂ 亚家族、１ 个属于 ＴＰＳ￣ｅ / ｆ 亚家族、２ 个
关的顺式作用元件有赤霉素响应(６３ 次)、水杨酸 属于 ＴＰＳ￣ｇ 亚家族、１ 个属于 ＴＰＳ￣ｃ 亚家族ꎻ在展
反应(２５３ 次)、茉莉酸甲酯(ＭｅＪＡ)响应(１７６ 次)ꎻ 瓣期高表达的 ３ 个基因均属于 ＴＰＳ￣ｂ 亚家族ꎻ在盛
与环境胁迫相关的顺式作用元件有厌氧诱导(１０５ 花期高表达的 １１ 个基因中ꎬ６ 个属于 ＴＰＳ￣ａ 亚家
次)、干旱诱导(６０ 次)、低温响应(５０ 次) 及防御 族、３ 个属于 ＴＰＳ￣ｂ 亚家族、２ 个属于 ＴＰＳ￣ｅ / ｆ 亚家
和应激反应(２５ 次)ꎻ与发育和组织特异性调控相 族(图 ６)ꎮ
关的有胚乳表达(１９ 次)、分生组织表达(３５ 次) ２.７ ＭｏＴＰＳ 基因在不同时期厚朴花中的表达 量
和种子特异性调控(８ 次)ꎻ与代谢调控相关的元 分析
件有生长素响应(５７ 次)、黄酮类生物合成基因调 为验证转录组数据的可靠性ꎬ随机选取 ６ 个
控(４ 次)和玉米蛋白代谢调控(５４ 次)ꎮ 在盛花期中表达量高的基因进行 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 验证ꎬ
２.６ 利用 ＲＮＡ￣ｓｅｑ 分析 ＭｏＴＰＳ 基因表达模式 ６ 个差异表达基因的相对表达量与转录组数据的
基于 ５５ 个 ＭｏＴＰＳ 基因在花、干 皮、叶 片、根 ＦＰＫＭ 值变化趋势基本一致(图 ７)ꎬ说明转录组数
皮、果实及初花期、展瓣期、盛花期厚朴花中的表 据结果可靠ꎮ
达量ꎬ绘制了表达量热图ꎮ 图 ６ 结果表明ꎬＭｏＴＰＳ
在厚朴不同部位的表达量存在显著性差异ꎬ在花 ３ 讨论与结论
中表达量高的基因有 ６ 个属于 ＴＰＳ￣ａ 亚家族ꎬ８ 个
属于 ＴＰＳ￣ｂ 亚家族ꎬ１ 个属于 ＴＰＳ￣ｃ 亚家族ꎻ在干 ＴＰＳ 是萜类物质生物合成途径中的关键酶ꎬ催
皮中表达量高的 １２ 个基因中ꎬ１１ 个为 ＴＰＳ￣ａ 亚家 化萜类前体转化成不同类型的萜烯骨架ꎬ决定萜
族成员ꎬ１ 个为 ＴＰＳ￣ｂ 亚家族成员ꎻ在叶片中表达 类结构和功能的多样性( 刘琬菁等ꎬ２０１７)ꎮ 在厚
量高 的 ９ 个 基 因 分 别 来 源 于 ＴＰＳ￣ａ、 ＴＰＳ￣ｅ / ｆ 和 朴中共筛选鉴定到 ５５ 个 ＴＰＳ 基因家族成员ꎬ分为
ＴＰＳ￣ｇ 亚家族ꎻ在根皮中表达量高的 ６ 个基因分别 ５ 个亚家族ꎬ这与在望春花( Ｄｏｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２１)、小
来源于 ＴＰＳ￣ａ、ＴＰＳ￣ｂ 和 ＴＰＳ￣ｇ 亚家族ꎻ在果实中表 麦(Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２４) 等物种中 ＴＰＳ 基因家族的分
达量高 的 ５ 个 基 因 分 别 来 源 于 ＴＰＳ￣ａ、 ＴＰＳ￣ｂ 和 布一致ꎮ 其中ꎬ４７ 个 ＭｏＴＰＳ 基因不均匀地分布在
ＴＰＳ￣ｅ / ｆ 亚家族ꎮ 此外ꎬ大多数基因仅在 １ 个部位 １０ 条染色体上ꎬ 其中在第 １７ 号染色体上富集了