Page 160 - 《广西植物》2026年第3期

５ ３ ６ 广 西 植 物 ４６ 卷
生ꎬ而高比例的细胞分裂素与生长素可诱导茎再 表 １ 激素配比及浓度
生(Ｓｋｏｏｇ ＆ Ｍｉｌｌｅｒꎬ１９９６)ꎮ 孟书亦(２０１７) 研究发 Ｔａｂｌｅ １ Ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
现ꎬ６￣苄氨基嘌呤(６￣ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｏｐｕｒｉｎｅꎬ６￣ＢＡ) 和 １￣ 激素配比及浓度 命名
萘乙酸(１￣ｎａｐｔｈａｌｅｎｅａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄꎬＮＡＡ) 可有效诱导 Ｈｏｒｍｏｎｅ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ Ｎａｍｅ
黄芩的带节茎段和小叶形成愈伤组织ꎮ 同样ꎬ利 ＣＫ ＣＫ
￣１ ＢＡ
ＭＳ＋６￣ＢＡ(１.０ ｍｇＬ )
用植物组织培养技术生产次生代谢产物受多种物
￣１
理及化学因素干扰( Ｓｈｅｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００８)ꎬ如甜菜碱 ＭＳ＋ＮＡＡ(１.０ ｍｇＬ ) ＮＡＡ
￣１
和细胞分裂素通过刺激细胞分裂和伸长来促进细 ＭＳ＋２ꎬ４￣Ｄ(０.２５ ｍｇＬ ) Ｄ
￣１ ￣１ ＢＡ＿ＮＡＡ
胞生 长 进 而 诱 导 愈 伤 组 织 形 成 ( Ｃａｓｔｒｏ ｅｔ ａｌ.ꎬ ＭＳ＋６￣ＢＡ(１.０ ｍｇＬ ) ＋ＮＡＡ(１.０ ｍｇＬ )
２０１６)ꎮ 蔗糖、麦芽糖和 Ｄ￣葡萄糖可有效促进黄芩 ＭＳ＋６￣ＢＡ(１.０ ｍｇＬ ) ＋２ꎬ４￣Ｄ(０.２５ ｍｇＬ ) ＢＡ＿Ｄ
￣１
￣１
￣１
￣１
愈伤组织 的 生 长ꎬ 并 且 促 进 黄 酮 生 成 ( 吴 银 生ꎬ ＭＳ＋６￣ＢＡ(１.０ ｍｇＬ ) ＋ＮＡＡ(１.０ ｍｇＬ ) ＋ ＢＡ＿ＮＡＡ＿Ｄ
￣１
２ꎬ４￣Ｄ(０.２５ ｍｇＬ )
１９８７)ꎮ 毕宇(２０１６) 利用 ６￣ＢＡ 和 ＮＡＡ 建立了黄
芩细胞悬浮培养体系ꎬ并且添加酵母提取物和苯
丙氨酸有利于黄芩苷的积累ꎮ 木酚、过氧化氢(Ｈ Ｏ )、６￣苄氨基嘌呤(６￣ＢＡ)、α￣
２ ２
目前ꎬ已有黄芩组织培养的相关报道(王玉芬 萘乙酸(ＮＡＡ)和 ２ꎬ４￣二氯苯氧乙酸(２ꎬ４￣Ｄ) 均购
等ꎬ２０２２ꎻ李鑫晨等ꎬ２０２５)ꎬ但是其愈伤组织形成 自北京索莱宝科技有限公司ꎬ邻苯二酚购自上海
过程的分子机制研究相对较少ꎬ而愈伤组织的形 阿拉丁生化科技股份有限公司ꎮ
成主要取决于植物内部许多复杂的信号通路ꎬ其 １.３ 转录组测序、分析与注释
中植物激素信号转导途径是最重要的一个信号通 采用 Ｔｒｉｚｏｌ 法提取样品总 ＲＮＡꎬ对其纯度和完
路ꎮ 本文以黄芩愈伤组织形成机理为研究方向ꎬ 整性检测后送至联川生物技术股份有限公司进行
以黄芩组培苗茎段为材料ꎬ依托高通量测序平台ꎬ 转录组学测序ꎮ 原始数据经预处理、接头、去除低
采用转录组学测序及酶活性测定的方法ꎬ拟探讨 质量序列和重复序列后得到有效数据ꎬ对所有样
以下问题:(１)６￣ＢＡ、ＮＡＡ 和 ２ꎬ４￣Ｄ ３ 种激素及不 本 的 基 因 或 转 录 本 进 行 初 组 装 并 合 并ꎬ 用
同组合对黄芩愈伤组织基因表达的影响ꎻ(２) 不同 ＧｆｆＣｏｍｐａｒｅ 软件检测得到最终组装注释结果( 张
组合激素处理对 ７、１４、２１ ｄ 的黄芩愈伤组织超氧 岩ꎬ２０２１)ꎮ
化物歧化酶(ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅꎬＳＯＤ)、过氧化物 １.４ 差异表达基因分析
酶(ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅꎬＰＯＤ)、过氧化氢酶( ｃａｔａｌａｓｅꎬＣＡＴ) 利用 ＦＰＫＭ 和 Ｒ 包对样本进行定量和显著性
和和苯丙氨酸解氨酶( ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ ａｍｍｏｎｉａｌｙａｓｅꎬ 差异分析ꎬ将 ｜ ｌｏｇ Ｆｏｌｄ ｃｈａｎｇｅ ｜ ≥１ 且 Ｑ<０.０５ 的基
２
ＰＡＬ)酶活性的影响ꎻ(３) 筛选与黄芩愈伤组织酶 因定 义 为 差 异 表 达 基 因ꎬ 并 对 其 进 行 ＧＯ ( ｇｅｎｅ
活性相关的差异表达基因ꎮ 以期为黄芩愈伤组织 ｏｎｔｏｌｏｇｙ) 功能注释和 ＫＥＧＧ( ｋｙｏｔｏ ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ
大规模培养体系的建立及愈伤组织形成的分子机 ｇｅｎｅｓ ａｎｄ ｇｅｎｏｍｅｓ)富集分析ꎮ
１.５ 生理生化指标测定
理提供一定的理论依据ꎮ
分别采用氮蓝四唑法(孙群ꎬ２００５)、愈创木酚
１ 材料与方法 法(Ｊａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００１)、紫外吸收法( Ｊｉａｎｇ ＆ Ｚｈａｎｇꎬ
２００１)对 ７、１４、２１ ｄ 的黄芩愈伤组织进行超氧化物
１.１ 植物材料 歧化酶( ＳＯＤ)、过氧化物酶( ＰＯＤ)、过氧化氢酶
本试验以 ６￣ＢＡ、ＮＡＡ 和 ２ꎬ４￣Ｄ ３ 种不同浓度 (ＣＡＴ)和苯丙氨酸解氨酶(ＰＡＬ)活力测定ꎮ
和不同组合激素处理的黄芩茎段为材料ꎬ黄芩茎
段采自山西农业大学生命科学学院试验基地栽培 ２ 结果与分析
的山西黄芩ꎬ处理 ７ ｄ 后取样进行转录组测序( 图

１)ꎬ激素配比及浓度见表 １ꎮ ２.１ 转录组测序结果统计
１.２ 主要试剂 本研究对黄芩茎段不同处理组的转录组数据
甲硫氨酸、 氯化硝基四氮唑蓝、 核黄素、愈创 进行了分析ꎮ 如表 ２ 所示ꎬ 经过去除衔接子序列