Page 171 - 《广西植物》2026年第4期
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4 期                     陆雯文等: 钝叶酢浆草花粉活力测定与贮藏温度研究                                            7 2 9

            花粉为实验材料ꎬ基于代谢活性、内含物和细胞完                             纱’上、下轮花粉萌发率均产生极显著影响ꎬ氯化
            整性等不同判断标准ꎬ采用 TTC 染色法( 江鸣涛ꎬ                         钙影响显著ꎬ而硼酸影响不显著( 表 5)ꎮ 根据 F
            2016)、醋酸洋红染色法( 付强等ꎬ2020)、I  ̄KI 染                   值排序ꎬ影响程度从强到弱依次为蔗糖、氯化钙、
                                                    2
            色法(张超仪ꎬ2012) 和亚历山大染色法( 王士泉ꎬ                        硼酸ꎬ与极差分析结果一致ꎮ
            2020)共 4 种染色方法来测定花粉活力ꎮ                             2.1.2 最适培养条件的筛选  不同培养温度和时
                 同时ꎬ采用 1.2.1 和 1.2.2 获得的最佳培养基                  间对‘面纱’花粉萌发的影响存在显著性差异ꎮ 当
            和最适培养条件进行花粉离体培养ꎬ将得到的花                              温度为 25 ℃ 时ꎬ‘ 面纱’ 上、下轮花粉的萌发率均

            粉萌发结果与花粉染色结果进行比较ꎮ                                  达到最大值ꎬ分别为 26.09 %和 22.07 %ꎬ显著高于
            1.2.4 花粉低温贮藏  以‘蜡笔’ (短花柱)、‘阳光’                     其他 3 种温度处理(图 1:A)ꎮ 温度过高或过低均
            (中花柱)、‘ 甜心’ ( 长花柱) 的花粉为实验材料ꎮ                       会抑制花粉的生理活性ꎬ影响其萌发能力ꎮ 从培
            将新鲜花粉装入 2 mL 离心管中ꎬ每管花粉量为1 / 10                     养时间来看ꎬ培养时间过短花粉不能完全萌发ꎬ过
            离心管体积ꎬ在室内通风使花粉自然阴干ꎮ 干燥后                            长则易导致花粉管衰老或破裂ꎮ 对于上轮花粉而
            将花粉分别放在常温(28 ℃)、4、-20、-80 ℃ 4 种温
                                                               言ꎬ培养 3、4、5 h 时花粉萌发率显著高于其他时间
            度下贮藏ꎮ 为更好体现花粉活力下降的趋势及长
                                                               处理ꎬ其中 4 h 显著高于 5 hꎬ二者与 3 h 之间差异
            期贮藏的稳定性ꎬ分别在贮藏 0、1、2、5、10、15、20、
                                                               不显著ꎻ对于下轮花粉而言ꎬ花粉萌发率在培养 3、
            25、30、40、50、60 d 时ꎬ取出花粉进行离体培养ꎬ计算
                                                               4、5 h 时显著高于 1 h(图 1:B)ꎮ 这说明‘面纱’花
            萌发率ꎬ其中-20 ℃贮藏的花粉用自来水冲洗解冻ꎬ
                                                               粉最佳离体萌发时间为 4 hꎮ
            -80 ℃贮藏的花粉用 37 ℃水浴解冻ꎮ
                                                               2.2 钝叶酢浆草花粉染色法与离体萌发法
                                                                   由图 2:A-D 可知ꎬ除 TTC 染色法以外ꎬ其余 3
            2  结果与分析
                                                               种染色方法均能使钝叶酢浆草花粉着色ꎬ并且染色
                                                               后能够明显区分有活力花粉和无活力花粉ꎮ 由图
            2.1 钝叶酢浆草花粉活力培养条件的筛选
                                                               2:E 可知ꎬ离体萌发法能够直接准确观察到花粉管
            2.1.1 最佳培养基配方的筛选  蔗糖、硼酸、氯化
                                                               是否萌发、生长ꎬ从而有效判断花粉的活力状态ꎮ
                    3
            钙 L (5 ) 正交试验结果表明ꎬ各处理对‘ 面纱’
                25                                                 亚历山大染色法具有很好的染色效果ꎬ在室
            上、下轮花粉的影响存在一定差异ꎮ 其中ꎬ14 号处
                                                               温下染色 1.5 h 即可观察结果且容易辨别ꎬ把有活
            理的上、下两轮花粉的萌发率均显著高于其他处
                                                               力花粉的原生质染成红色ꎬ花粉壁染成绿色ꎬ把无
            理ꎬ分别为 30.78%和 27.62%ꎻ8 号处理和 19 号处
            理的花粉萌发率也较高且花粉萌发率相同ꎬ上轮                              活力花粉的原生质和花粉壁染成绿色( 图 2:B)ꎮ
                                                               I  ̄KI 染色法的染色效果较为明显ꎬ淀粉遇碘后变
            花粉萌发率为 25.65%ꎬ下轮花粉萌发率为 24.75%                      2
                                                               成蓝色ꎬ有活力花粉呈蓝黑色ꎬ而无活力或活力较
            (表 3)ꎮ 这表明蔗糖、硼酸和氯化钙的协同作用
                                                               弱的花粉呈黄褐色( 图 2:C)ꎮ 醋酸洋红染色法的
            可能对花粉萌发具有重要影响ꎮ
                 采用极差分析量化蔗糖、硼酸和氯化钙对‘ 面                         染色效果也较为明显ꎬ有活力花粉被染成红色ꎬ无
            纱’花粉萌发率的影响ꎬ其中极差 K 值越大表明该                           活力或活力较弱的花粉不变色( 图 2:D)ꎮ 但是ꎬ
            因素影响程度越高ꎮ 由表 4 可知ꎬ蔗糖在 K3 水平                        实验过程中发现ꎬ醋酸洋红染色法若染色超过 10
            (蔗糖浓度为 100 gL )时对‘面纱’ 上、下轮花粉                     minꎬ几乎所有花粉均呈现红色ꎬ此时无法获得准
                                  ̄1
            萌发率的影响最大ꎬ硼酸和氯化钙在 K4 水平(浓度                          确的数据ꎬ因此该方法不适用于钝叶酢浆草花粉
            均为 200 mgL )时对其花粉萌发率影响最大ꎮ 极                      活力的测定ꎮ
                            ̄1
            差 R 值能够体现各因素对实验结果的作用程度ꎬR                               将‘面纱’‘极光’和‘ 红心皇后’ 上、下轮花粉
            值越大表明影响程度越显著ꎮ 其中ꎬ实验 3 因素对                          的 3 种染色结果与离体萌发培养结果进行比较ꎬ
            ‘面纱’上、下轮花粉萌发率的影响具有一致性ꎬ对                            发现 4 种方法的测定结果存在差异ꎬ并且每个方法
            其影响程度关系为蔗糖>氯化钙>硼酸ꎮ                                 测定的结果均显示上轮花粉活力略高于下轮花粉
                 在极差分析基础上进行方差分析ꎬ进一步明                           活力(表 6)ꎮ 醋酸洋红染色法和 I  ̄KI 染色法测定
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            确各因子的显著性ꎮ 蔗糖浓度对钝叶酢浆草‘ 面                            的花粉活力显著高于离体培养法的花粉萌发率ꎬ 说
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