Page 171 - 《广西植物》2026年第4期
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4 期 陆雯文等: 钝叶酢浆草花粉活力测定与贮藏温度研究 7 2 9
花粉为实验材料ꎬ基于代谢活性、内含物和细胞完 纱’上、下轮花粉萌发率均产生极显著影响ꎬ氯化
整性等不同判断标准ꎬ采用 TTC 染色法( 江鸣涛ꎬ 钙影响显著ꎬ而硼酸影响不显著( 表 5)ꎮ 根据 F
2016)、醋酸洋红染色法( 付强等ꎬ2020)、I  ̄KI 染 值排序ꎬ影响程度从强到弱依次为蔗糖、氯化钙、
2
色法(张超仪ꎬ2012) 和亚历山大染色法( 王士泉ꎬ 硼酸ꎬ与极差分析结果一致ꎮ
2020)共 4 种染色方法来测定花粉活力ꎮ 2.1.2 最适培养条件的筛选 不同培养温度和时
同时ꎬ采用 1.2.1 和 1.2.2 获得的最佳培养基 间对‘面纱’花粉萌发的影响存在显著性差异ꎮ 当
和最适培养条件进行花粉离体培养ꎬ将得到的花 温度为 25 ℃ 时ꎬ‘ 面纱’ 上、下轮花粉的萌发率均
粉萌发结果与花粉染色结果进行比较ꎮ 达到最大值ꎬ分别为 26.09 %和 22.07 %ꎬ显著高于
1.2.4 花粉低温贮藏 以‘蜡笔’ (短花柱)、‘阳光’ 其他 3 种温度处理(图 1:A)ꎮ 温度过高或过低均
(中花柱)、‘ 甜心’ ( 长花柱) 的花粉为实验材料ꎮ 会抑制花粉的生理活性ꎬ影响其萌发能力ꎮ 从培
将新鲜花粉装入 2 mL 离心管中ꎬ每管花粉量为1 / 10 养时间来看ꎬ培养时间过短花粉不能完全萌发ꎬ过
离心管体积ꎬ在室内通风使花粉自然阴干ꎮ 干燥后 长则易导致花粉管衰老或破裂ꎮ 对于上轮花粉而
将花粉分别放在常温(28 ℃)、4、-20、-80 ℃ 4 种温
言ꎬ培养 3、4、5 h 时花粉萌发率显著高于其他时间
度下贮藏ꎮ 为更好体现花粉活力下降的趋势及长
处理ꎬ其中 4 h 显著高于 5 hꎬ二者与 3 h 之间差异
期贮藏的稳定性ꎬ分别在贮藏 0、1、2、5、10、15、20、
不显著ꎻ对于下轮花粉而言ꎬ花粉萌发率在培养 3、
25、30、40、50、60 d 时ꎬ取出花粉进行离体培养ꎬ计算
4、5 h 时显著高于 1 h(图 1:B)ꎮ 这说明‘面纱’花
萌发率ꎬ其中-20 ℃贮藏的花粉用自来水冲洗解冻ꎬ
粉最佳离体萌发时间为 4 hꎮ
-80 ℃贮藏的花粉用 37 ℃水浴解冻ꎮ
2.2 钝叶酢浆草花粉染色法与离体萌发法
由图 2:A-D 可知ꎬ除 TTC 染色法以外ꎬ其余 3
2 结果与分析
种染色方法均能使钝叶酢浆草花粉着色ꎬ并且染色
后能够明显区分有活力花粉和无活力花粉ꎮ 由图
2.1 钝叶酢浆草花粉活力培养条件的筛选
2:E 可知ꎬ离体萌发法能够直接准确观察到花粉管
2.1.1 最佳培养基配方的筛选 蔗糖、硼酸、氯化
是否萌发、生长ꎬ从而有效判断花粉的活力状态ꎮ
3
钙 L (5 ) 正交试验结果表明ꎬ各处理对‘ 面纱’
25 亚历山大染色法具有很好的染色效果ꎬ在室
上、下轮花粉的影响存在一定差异ꎮ 其中ꎬ14 号处
温下染色 1.5 h 即可观察结果且容易辨别ꎬ把有活
理的上、下两轮花粉的萌发率均显著高于其他处
力花粉的原生质染成红色ꎬ花粉壁染成绿色ꎬ把无
理ꎬ分别为 30.78%和 27.62%ꎻ8 号处理和 19 号处
理的花粉萌发率也较高且花粉萌发率相同ꎬ上轮 活力花粉的原生质和花粉壁染成绿色( 图 2:B)ꎮ
I  ̄KI 染色法的染色效果较为明显ꎬ淀粉遇碘后变
花粉萌发率为 25.65%ꎬ下轮花粉萌发率为 24.75% 2
成蓝色ꎬ有活力花粉呈蓝黑色ꎬ而无活力或活力较
(表 3)ꎮ 这表明蔗糖、硼酸和氯化钙的协同作用
弱的花粉呈黄褐色( 图 2:C)ꎮ 醋酸洋红染色法的
可能对花粉萌发具有重要影响ꎮ
采用极差分析量化蔗糖、硼酸和氯化钙对‘ 面 染色效果也较为明显ꎬ有活力花粉被染成红色ꎬ无
纱’花粉萌发率的影响ꎬ其中极差 K 值越大表明该 活力或活力较弱的花粉不变色( 图 2:D)ꎮ 但是ꎬ
因素影响程度越高ꎮ 由表 4 可知ꎬ蔗糖在 K3 水平 实验过程中发现ꎬ醋酸洋红染色法若染色超过 10
(蔗糖浓度为 100 gL )时对‘面纱’ 上、下轮花粉 minꎬ几乎所有花粉均呈现红色ꎬ此时无法获得准
 ̄1
萌发率的影响最大ꎬ硼酸和氯化钙在 K4 水平(浓度 确的数据ꎬ因此该方法不适用于钝叶酢浆草花粉
均为 200 mgL )时对其花粉萌发率影响最大ꎮ 极 活力的测定ꎮ
 ̄1
差 R 值能够体现各因素对实验结果的作用程度ꎬR 将‘面纱’‘极光’和‘ 红心皇后’ 上、下轮花粉
值越大表明影响程度越显著ꎮ 其中ꎬ实验 3 因素对 的 3 种染色结果与离体萌发培养结果进行比较ꎬ
‘面纱’上、下轮花粉萌发率的影响具有一致性ꎬ对 发现 4 种方法的测定结果存在差异ꎬ并且每个方法
其影响程度关系为蔗糖>氯化钙>硼酸ꎮ 测定的结果均显示上轮花粉活力略高于下轮花粉
在极差分析基础上进行方差分析ꎬ进一步明 活力(表 6)ꎮ 醋酸洋红染色法和 I  ̄KI 染色法测定
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确各因子的显著性ꎮ 蔗糖浓度对钝叶酢浆草‘ 面 的花粉活力显著高于离体培养法的花粉萌发率ꎬ 说

