Page 42 - 《广西植物》2020年第7期
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   于 1.8 mL 冷冻管ꎬ直接投入液氮保存 24 hꎬ室温空
   气化冻后ꎬ测定发芽率ꎮ
   1.2.5 超低温保存对种子发芽率的影响  取含水
   量为 27.4%、10.7%、6.1%和 3.2%的种子装于 1.8
   mL 冷冻管中直接投入液氮保存 24 hꎬ室温空气化
   冻后置于含三层湿润滤纸的培养皿测定冻存后发
   芽率ꎻ对照不经液氮直接放入相同条件培养皿测

   定发芽率ꎮ
   1.3 数据分析
       试验设置 3 个重复ꎬ每个重复 100 粒种子ꎮ 采
   用 Microsoft Office Excel(2016) 软件对数据进行统
                                                       不同小写字母表示在 0.05 水平差异显著ꎮ
   计分析和绘图ꎮ 试验结果为 3 个重复的平均值±                            Different lowercase letters indicate significant difference at 0.05 level.
   标准误ꎮ 数据差异的显著性采用 SPSS 方差分析                         图 1  含水量对超低温保存后马尾松种子发芽率的影响

   中的 Duncan 新复极差法进行估算ꎮ                             Fig. 1  Effects of water content on germination percentage of
                                                                cryopreserved masson pine seeds
   2  结果与分析



   2.1 种子的质量特性及含水量梯度的建立
       待测马尾松种子千粒重为 11.48 gꎬ含水量为
   9.56%ꎬ发芽率为 90.25%ꎮ 利用浸种和硅胶干燥的
   方式获取含水量为 27.4%、 24.6%、22.7%、16.8%、
   15.8%、10.7%、7.5%、6.1%、4.8%、3.2%等 10 个梯度

   的种子ꎬ用以进行超低温保存等后续研究ꎮ
   2.2 不同含水量对超低温保存后种子发芽率的影响
       10 个不同含水量梯度的马尾松种子冻存后发

   芽率结果如图 1 所示ꎮ 随着含水量的下降ꎬ冻存后
   发芽率逐渐增高ꎬ直到含水量降为 6.1%时ꎬ发芽率                           不同小写字母表示同一含水量不同冷冻方式之间在 0.05
                                                       水平差异显著ꎮ
   达到最大值 91.33%ꎬ当继续干燥ꎬ发芽率不再上升ꎬ
                                                       Different lowercase letters indicate germination percentage with
   甚至有轻微的下降ꎬ6.1%为马尾松种子超低温保存                            the same water content and different freezing methods are signifi ̄
   的最适含水量ꎮ 含水量为 6.1% ~ 15.8%时ꎬ发芽率                      cant differences at 0.05 level.
   缓慢下降ꎻ当含水量大于 15.8%时ꎬ发芽率急剧下                                  图 2  冷冻方式对超低温保存后
                                                                 马尾松种子发芽率的影响
   降ꎮ 含水量从 15. 8% 增加到 16. 8% 时ꎬ 发芽率从
                                                         Fig. 2  Effect of freezing methods on germination
   69.33%迅速下降到 45.67%ꎮ 马尾松种子适宜超低                          percentage of cryopreserved masson pine seeds

   温保存的含水量范围很广ꎬ将冻后发芽率在 80%以
   上的含水量范围 3.2% ~ 7.5%作为马尾松种子超低                      保存ꎬ结果表明将马尾松种子直接投入液氮保存
   温保存的安全含水量范围ꎮ                                      效果优于先在-20 ℃ 预冻不同时间再投入液氮ꎮ
   2.3 不同冷冻方式对超低温保存后种子发芽率的影响                         2.4 不同化冻方式对马尾松种子超低温保存后发
       不同冷冻方式对超低温保存效果的影响如图                           芽率的影响
   2 所示ꎮ 不同含水量的种子利用缓冻和慢冻法进                               室温空气化冻和 42 ℃ 水浴化冻对马尾松种
   行超低温保存后发芽率均不同程度地低于快冻法                             子超低温保存效果的影响如图 3 所示ꎮ 图 3 结
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