Page 39 - 《广西植物》2020年第7期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ｊｕｌ. ２０２０ꎬ ４０(７): ９３５－９４３
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１９０７０４１
张晓宁ꎬ 黄宁ꎬ 覃子海ꎬ 等. 无菌马尾松种子超低温保存技术研究 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ２０２０ꎬ ４０(７): ９３５－９４３.
ＺＨＡＮＧ ＸＮꎬ ＨＵＡＮＧ Ｎꎬ ＱＩＮ ＺＨꎬ ｅｔ ａｌ. Ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｒｉｌｅ Ｐｉｎｕｓ ｍａｓｓｏｎｉａｎａ ｓｅｅｄｓ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ ２０２０ꎬ ４０(７): ９３５－９４３.
无菌马尾松种子超低温保存技术研究
张晓宁 １ꎬ２ ꎬ 黄 宁 １ꎬ２ ꎬ 覃子海 １ꎬ２ ꎬ 姚瑞玲 １ꎬ２ ꎬ 杨 红 ３ꎬ４ ꎬ 刘海龙 １ꎬ２∗
( １. 广西壮族自治区林业科学研究院ꎬ 南宁 ５３０００２ꎻ ２. 广西特色经济林培育与利用重点实验室ꎬ
南宁 ５３０００２ꎻ ３. 中国科学院昆明植物所ꎬ 昆明 ６５０２０１ꎻ ４. 中国科学院大学ꎬ 北京 １０００４９ )
摘 要: 该研究利用液氮将不同含水量的无菌马尾松种子(２７.４％、２４.６％、２２.７％、１６.８％、１５.８％、１０.７％、
７.５％、６.１％、４.８％、３.２％)进行超低温保存ꎮ 结果表明:(１) 在 ３.２％ ~ ６.１％含水量范围内ꎬ经液氮冷冻保存
后的发芽率随着含水量升高而逐渐升高ꎬ在含水量 ６.１％时ꎬ发芽率达到最大值(９１.３３％)ꎻ当含水量大于
６.１％时ꎬ发芽率逐渐下降ꎬ尤其是当含水量大于 １５.８％时ꎬ发芽率迅速下降ꎻ在 ３.２％ ~ ７.５％含水量范围内冻
存后发芽率在 ８０％以上ꎮ (２)冷冻、化冻方式影响超低温保存效果ꎮ 种子无需低温预冷ꎬ直接投入液氮保
存(快速冷冻)效果最好ꎻ室温空气化冻(缓慢化冻) 较 ４２ ℃ 水浴化冻发芽率高ꎬ且后者容易发生种皮炸裂
现象ꎮ (３)种皮对马尾松种子超低温保存过程起到保护作用ꎬ使其免受机械损伤ꎬ去掉外种皮的种子冻存后
发芽率显著下降ꎬ且容易出现形态不正常的幼苗ꎮ (４) 超低温保存对马尾松种子萌发具有一定“ 刺激” 作
用ꎬ在最适含水量 ６.１％时ꎬ经超低温保存后种子的发芽率显著大于对照种子ꎮ 总之ꎬ含水量、冷冻方法、化
冻方法、种皮结构显著影响超低温保存效果ꎬ马尾松种子超低温保存的最优方法是将种子含水量控制在
６.１％ꎬ直接投入液氮快速冷冻后室温空气缓慢化冻ꎬ冻后发芽率可在 ９０％以上ꎮ 马尾松种子超低温保存技
术体系的建立ꎬ为其种质资源的长期保存提供了技术支持ꎮ
关键词: 马尾松种子ꎬ 超低温保存ꎬ 干燥ꎬ 含水量ꎬ 安全含水量范围ꎬ 发芽率
中图分类号: Ｑ９４５ 文献标识码: Ａ
文章编号: １０００￣３１４２(２０２０)０７￣０９３５￣０９ 开放科学(资源服务)标识码(ＯＳＩＤ):
Ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｒｉｌｅ Ｐｉｎｕｓ ｍａｓｓｏｎｉａｎａ ｓｅｅｄｓ
１ꎬ２ １ꎬ２ １ꎬ２
ＺＨＡＮＧ Ｘｉａｏｎｉｎｇ ꎬ ＨＵＡＮＧ Ｎｉｎｇ ꎬ ＱＩＮ Ｚｉｈａｉ ꎬ
１ꎬ２ ３ꎬ４ １ꎬ２∗
ＹＡＯ Ｒｕｉｌｉｎｇ ꎬ ＹＡＮＧ Ｈｏｎｇ ꎬ ＬＩＵ Ｈａｉｌｏｎｇ
( １. Ｇｕａｎｇｘｉ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅꎬ Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００２ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２. Ｇｕａｎｇｘｉ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ Ｅｃｏｎｏｍｉｃ Ｆｏｒｅｓｔｓꎬ Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００２ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ３. Ｋｕｎｍｉｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙꎬ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ
Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５０２０１ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ４. Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００４９ꎬ Ｃｈｉｎａ )
收稿日期: ２０１９－０９－１５
基金项目: 国家自然科学基金 (３１９６０３１１)ꎻ 广西自然科学基金 (２０１６ＧＸＮＳＦＢＡ３８０２２４)ꎻ广西科技计划项目 (桂科 ＡＤ１７１９５０７８)ꎻ广
西主要用材林资源高效培育与利用人才小高地专项项目 (桂财社函 [２０１９]１３０) [Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ
ｏｆ Ｃｈｉｎａ (３１９６０３１１)ꎻ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ (２０１６ＧＸＮＳＦＢＡ３８０２２４)ꎻ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｐｒｏｇｒａｍ (１７１９５０７８)ꎻ
Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｓｏｃｉａｌ Ｓｅｃｕｒｉｔｙ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｚｈｕａｎｇ Ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ Ｒｅｇｉｏｎꎬ Ｃｈｉｎａ ( [２０１９]１３０) ]ꎮ
作者简介: 张晓宁(１９８５－)女ꎬ内蒙古乌兰察布人ꎬ硕士ꎬ助理研究员ꎬ主要从事林木种质资源离体保存技术研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ) ｓｆｌｚｘｎ
＠ １６３.ｃｏｍꎮ
∗
通信作者: 刘海龙ꎬ博士ꎬ高级工程师ꎬ研究方向为林木遗传育种ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)５０６６９２９１＠ ｑｑ.ｃｏｍꎮ
