Page 96 - 《广西植物》2020年第7期

９ ９ ２ 广 西 植 物 ４０ 卷

Ａ. 中间片段ꎻ Ｂ. 全长 ＯＲＦꎻ Ｃ. ３′ Ｒａｃｅꎻ Ｄ. ５′ Ｒａｃｅꎮ 图中自左至右分别为 ＬｃＡＯＸ１ａ、ＬｃＡＯＸ１ｂ、ＬｃＡＯＸ２ꎮ
Ａ. Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ ｆｒａｇｍｅｎｔꎻ Ｂ. Ｆｕｌｌ ｌｅｎｇｔｈ ＯＲＦꎻ Ｃ. ３′ Ｒａｃｅꎻ Ｄ. ５′ Ｒａｃｅ. Ｆｒｏｍ ｌｅｆｔ ｔｏ ｒｉｇｈｔ ａｒｅ ＬｃＡＯＸ１ａꎬ ＬｃＡＯＸ１ｂꎬ ＬｃＡＯＸ２ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ.
图 １ 鹅掌楸 ＡＯＸ 基因克隆
Ｆｉｇ. １ ＰＣＲ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ＬｃＡＯＸ ｇｅｎｅｓ

２.２ 鹅掌楸 ＡＯＸ 家族基因编码蛋白理化性质分析 溶性蛋白指数为 ８９.９４ꎬ不稳定系数为 ４８.１７ꎬ疏水
克隆出的 ３ 个 ＡＯＸ 基因编码蛋白均含有 ＡＯＸ 性平均值为 － ０.２５１ꎮ 通过在线预测软件 ＥｘＰＡＳｙ
保守结构域ꎬ其中 ＬｃＡＯＸ１ａ、ＬｃＡＯＸ１ｂ 为 ＡＯＸ１ 亚 ＴＭｐｒｅｄ 对 ＡＯＸ 蛋白跨膜区进行解析ꎬ结果显示
家族ꎬＬｃＡＯＸ２ 为 ＡＯＸ２ 亚家族成员ꎮ ＬｃＡＯＸ１ａ 基 ＡＯＸ 蛋白为典型的跨膜蛋白ꎬ且疏水性变化大的
因全长 １ ３０５ ｂｐꎬＯＲＦ 长 ８５８ ｂｐꎬ编码 ２８５ 个氨基 区域为其跨膜区ꎮ

酸ꎬ理论等电点为 ７.２３ꎬ脂溶性蛋白指数为 ８０.１１ꎬ ２.３ 鹅掌楸 ＡＯＸ 家族基因编码蛋白同源性分析
不稳 定 系 数 为 ３６. １７ꎬ 疏 水 性 平 均 值 为 －０.２６４ꎮ 分别 将 鹅 掌 楸 ＡＯＸ 家 族 蛋 白 的 ＬｃＡＯＸ１ａ、
ＬｃＡＯＸ１ｂ 基因全长 １ ４０５ ｂｐꎬＯＲＦ 长 １ ０３２ ｂｐꎬ编 ＬｃＡＯＸ１ｂ、ＬｃＡＯＸ２ 与 ＮＣＢＩ 数据库数据库中序列
码 ３４３ 个氨基酸ꎬ理论等电点为 ８.３７ꎬ脂溶性蛋白 进行比对ꎬ结果表明鹅掌楸 ＡＯＸ 家族蛋白序列高
指数为 ８５.０４ꎬ不稳定系数为 ３９.７１ꎬ疏水性平均值 度保守ꎬ尤其在 Ｃ 端保守性极高(图 ２)ꎬ且不同物
为 － ０. １８１ꎮ ＬｃＡＯＸ２ 基 因 全 长 １ ３７６ ｂｐꎬ ＯＲＦ 长 种 ＡＯＸ 蛋白均含有 ＡＯＸ 家族特有的“ ＥＸＸＨ”、
１ ０４４ ｂｐꎬ编码 ３４７ 个氨基酸ꎬ理论等电点 ９.０２ꎬ脂 “ＥＥＥ￣Ｙ”铁离子结合保守结构域ꎬ ６ 个保守的组