Page 109 - 《广西植物》2021年第7期
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ϟ ϟ ሕ ऐ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ϟ 卷
混合酚酸对照品工作液ᖔ选择分离度和峰型相对 ዶʛᆍᤦᔀ ۪ၤᆍᡷᆍ༁ၤᆍᡱ ዹዹ ԡϟँ 软件对图像进行处理ᤥ
较好的色谱柱ᤥ 流动相及检测条件᧥以甲醇ͱ水溶
液或乙腈ͱ水溶液为流动相ᖔ改变水溶液的酸种类 জ 结果与分析
和浓度ܦ梯度洗脱程序ܦ柱温和流速ᖔ以对照品各
色谱峰之间的分离度ܦ样品中主要目标组分的理 ԣॹϓ 色谱条件的确定
论塔板数以及样品中目标组分与干扰峰的分离效 ϟϟ 检测波长的选择জ 酚酸单一对照品紫外扫
果评价系统适应性ᖔ并确定较优的色谱条件ᤥ 描的结果表明᧥原儿茶酸ܦ二氢咖啡酸ܦ根皮酸和
ϟሕ࿗ 方法学验证方法 肉桂酸在 ऐԡ Ⴟቝ 附近有最大吸收峰ଫ绿原酸ܦ咖
ϟሕ࿗ϟ 线性关系和灵敏度试验জ 将混合酚酸对照 啡酸ܦᡱ᥋香豆酸和阿魏酸在 ሕԡ Ⴟቝ 附近有最大吸
品工作液按 ϟሕሕ 优化的色谱条件进行检测ᖔ以色 收峰ᤥ 因此ᖔ选择 ऐԡܦሕԡ Ⴟቝ 作为检测波长ᤥ
谱峰面积为纵坐标ྉ ᡥɯᖔ质量浓度为横坐标ྉ ଝɯ 绘 ϟ 色谱条件优化结果及对照品和样品色谱图
制八种酚酸的标准曲线确定线性方程和线性范 分析জ 色谱柱是 ۪̀ᓂऊ 检测分析的核心部件ᖔ其
围ᖔ以信噪比ྉ୩ᣰ શɯ 为 ሕ 时ᖔ确定检出限ྉᓂᨃ᧕ɯᖔ 性能发挥受到分析样品的化学组成和理化性质的
୩ᣰ શ 为 ϟԡ 时ᖔ确定定量下限ྉᓂᨃ͐ɯ ྉ 陈丹丹等ᖔ 影响ྉ李旻昊等ᖔԡϟँɯᤥ 四种反相色谱柱研究结
ԡϟँɯᖔ重复 ᤃ 次ᤥ 果表明ᖔԻᨃାዶᣮ ୩ା᥋ऊϟऐ 色谱柱在同一分析条件
ϟሕ࿗ 精密度试验জ 精密吸取 ࿗ԡԡ ဂ੫ኼቝᓂ 混 下目标组分峰形相对较好ᖔ因此ᖔ选择该色谱柱用
᥋ϟ
合酚酸对照品工作液ᖔ处理方法同 ϟሕ࿗ϟᖔ连续进 于本实 验 后 续 进一步的研究ᤥ 流动相是影响
样检测 ᤃ 次ᖔ以色谱峰面积计算每个酚酸的变异 ۪̀ᓂऊ 分离 效果的重要因素ᖔ甲醇 ͱ 水溶液或乙
系数ྉ୩᧕ɯ值ᤥ 腈ͱ水溶液是酚酸类成分分析采用较多的流动相ᖔ
ϟሕ ࿗ ሕ 稳定性试验 জ 移取 ጢ ԡܦ ԡ ԡܦ ᤃԡ ԡ 在水溶液中添加适量浓度的酸对改善样品的分离
ဂ੫ኼቝᓂ 混合酚酸对照品工 作 液ᖔ 处理方法同 度和峰形有明显的效果ᖔ甲酸或乙酸比较常用ྉ 王
᥋ϟ
ϟሕ࿗ϟᖔ在 ϟʛ 内进样检测 ᤃ 次ᖔ时间间隔 ࿗ၤଫ在 ᤃ 晓梅等ᖔԡϟᤃଫ邓宝安等ᖔԡϟᎮଫ李岩等ᖔԡϟऐଫ邓渝
ʛ 内ᖔ每日同一时间点进样 ϟ 次ᤥ 按照 ϟሕ࿗ 方 等ᖔԡϟऐଫ匡凤元等ᖔԡϟँଫ屈艳勤等ᖔԡϟँɯᤥ 比较
法计算每个酚酸日内和日间的 ୩᧕ 值ᤥ 甲醇ܦ乙腈ܦ甲酸水溶液和乙酸水溶液对目标组分
ϟሕ࿗࿗ 重复性试验জ 精密称取 ϟሕϟ 方法制备 的分离效果ᖔ结果表明᧥以 ԡϟᠮ 乙酸水溶液为流
的大果山楂冻干粉 ԡԡԡ ੫ᖔ共 ᤃ 份ᖔ分别按 ϟሕ 动相时ᖔ甲醇和乙腈的分离效果均不理想ᖔ绿原酸
的方法提取酚酸并进行样品预处理ᖔ进样检测ᖔ按 和二氢咖啡酸大部分重叠ᖔ而以 ԡϟᠮ甲酸水溶液
照 ϟሕ࿗ 方法计算每个酚酸的 ୩᧕ 值ᤥ 为流动相时ᖔ甲醇和乙腈均能改善绿原酸和二氢
ϟሕ࿗ጢ 加标回收率的测定জ 精密称取 ϟሕϟ 方 咖啡酸的分离效果ᖔ两者的分离度分别为 ϟԡ 和
法制备的大果山楂冻干粉 ϟԡԡԡ ੫ᖔ以原有目标化 ԡऐᖔ甲醇稍优于乙腈ᖔ但随着绿原酸和二氢咖啡酸
合物量的 ϟጢԡᠮܦϟԡԡᠮܦጢԡᠮ加入 ऐ 个酚酸对照品 的分离ᖔ相邻咖啡酸与二氢咖啡酸的分离度只能
溶液ᖔ按照 ϟሕ 的方法提取酚酸并进行样品预处 达到 ϟᤥ 以甲醇为流动相ᖔ进一步研究不同浓度
理ᖔ进样检测ᖔ重复 ሕ 次ᖔ将得到的色谱峰面积代 的甲酸水溶液对目标组分分离效果的影响ᖔ当甲
入线性方程ᖔ根据样品和加标样品的浓度计算每 酸水溶液为 ϟԡᠮ时ᖔ八种对照品酚酸之间的分离
个酚酸的加标回收率和 ୩᧕ 值ᤥ 度可达到 ϟጢᖔ基线平稳且色谱峰峰形较好ᖔ因此ᖔ
ϟሕ࿗ᤃ 样品色谱图分析জ 移取 ϟሕ 制备的样 选择甲醇᥋甲酸水溶液作为流动相ᤥ
品进行检测ᖔ比较单一对照品的保留时间并结合 准确地对目标成分进行定性和定量分析ᖔ不仅
相应的紫外光谱对样品中目标组分进行定性ᖔ根 对照品的分离度需要满足要求ᖔ也需考虑样品中的
据标准曲线和峰面积计算对应样品中每个酚酸的 目标成分是否与干扰峰实现到有效分离ᤥ 大果山
含量ᖔ重复 ᤃ 次ᤥ 楂酚酸样品提取过程中不可避免会带入其他黄酮
ϓॹ 数据处理 类成分ᖔ研究发现ᖔ阿魏酸ܦ肉桂酸与大果山楂中的
采用 ጶዹᔀ ԡϟँ 软件进行数据处理ᖔ୩۪୩୩ 黄酮糖苷出峰时间很容易重合或非常接近ᖔ进一步
ሕԡ 软件对数据进行差异性分析 ྉ ዶશᨃዶɯᖔ 调整流动相组成ܦ柱温和流速等参数ᖔ结果显示提
