Page 15 - 《广西植物》2021年第8期
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ऐ 期 王 雪 等 ᧥ 黄梁木维管组织细胞激光显微切割技术体系建立 ϟ ँ
表 ϓই 黄梁木石蜡切片不同固定剂处理
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编号 固定剂 处理
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表 ԣই 黄梁木石蜡切片不同脱水剂处理
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脱水步骤 ᧕ᔀၤᢃʛʢᑕᡷᔽᆍႿ ༁ᡷᔀᡱ
编号 脱水剂
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第一步 ୩ᡷᔀᡱ ϟ 第二步 ୩ᡷᔀᡱ
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表 ᇺই 黄梁木石蜡切片不同透明剂处理
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透明步骤 ᧧ႿᔽᡷʢᑕᡷᔽᆍႿ ༁ᡷᔀᡱ
编号 透明剂
ऊᆍʛᔀ ᧧ႿᔽᡷʢᑕᡷᔽᆍႿ
第一步 ୩ᡷᔀᡱ ϟ 第二步 ୩ᡷᔀᡱ
ዶ 异丙醇 ጢԡᠮ乙醇 ᣰጢԡᠮ异丙醇ᖔ࿗ ቩ ᖔጢ ቝᔽႿ ϟԡԡᠮ异丙醇ᖔ࿗ ቩ ᖔጢ ቝᔽႿ
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可知ᖔશዶ 有 ऐ୩ܦϟऐ୩ 两条带且无杂带ଫ而卡诺和 明剂置换组织中的脱水剂ᖔ透明剂是石蜡的溶媒ᖔ
èዶዶ 处理ᖔશዶ 无带ᖔશዶ 可能完全降解或该处 为后续浸蜡做准备ᤥ 本研究分别用 Ꭾԡᠮ 乙醇和
理不能提取出 શዶᤥ 由图 ϟ᧥ା 可知ᖔ丙酮固定剂 Ꭾԡᠮ卡诺稀释丙酮作为固定剂ᖔ乙醇 ᣰ 异丙醇和正
处理后茎段组织形态ᖔ组织细胞皱缩严重ᖔ中间髓 丁醇作为 种脱水ܦ透明剂ᖔ共 ࿗ 种组合处理ྉ 表
部向内凹陷ଫ卡诺处理后边缘细胞稍微向内皱缩ᖔ ࿗ɯᤥ 琼脂糖凝胶电泳图结果见图 ᤥ ࿗ 种组合处
细胞整体形态较好ଫèዶዶ 处理后ᖔ细胞形态与对照 理均得到较好质量的 શዶᤥ
组相似ᤥ 保证固定后组织细胞形态和 શዶ 完整 将 ࿗ 种 处 理 进 行后续浸蜡ܦ 包埋ܦ 切片 ྉϟ࿗
性ᖔ是石蜡切片最关键的步骤ᤥ 因此ᖔ选择丙酮为 ဂቝɯܦ漂片ܦ烤片ܦ脱蜡等步骤后ᖔ观察其显微结
固定剂ᖔ分别用 Ꭾԡᠮ乙醇和 Ꭾԡᠮ卡诺稀释丙酮ᖔ进 构ᤥ 结果表明ᖔ以乙醇 ᣰ 异丙醇作为脱水ܦ透明剂ᖔ
行后续脱水和透明ᤥ 细胞皱缩较严重ᖔ髓部出现空洞ᖔ且不能清晰识别
ԣॹԣ 不同脱水ܓ透明剂组合处理结果 维管束各细胞ᖔ严重影响后续激光显微切割目标
脱水剂是与水能在任何比例下均匀混合的有 细胞的识别与获取ྉ 图 ሕ᧥ዶᖔାɯଫ以正丁醇作为脱
机溶剂ᤥ 由于有机溶剂用于交换植物组织中的 水ܦ透明剂ᖔ组织细胞相对完整ᖔ可清晰识别各细
水ᖔ化学脱水也可能损害 ᓂᥘ᧕ 样品ྉ ۪ᆍ༁ᡷᔀʢ ᔀᡷ ᑕᖔ 胞类型ྉ图 ሕ᧥ऊᖔ᧕ɯଫ其中乙醇 ᣰ 丙酮为固定剂时ᖔ
ԡԡᤃɯᤥ 透明是脱水和浸蜡的桥梁ᖔ其作用是使透 髓部出现空洞ᖔ 不能保证形态学完整 ྉ图 ሕ᧥ऊɯᤥ
