Page 16 - 《广西植物》2021年第8期

ϟ ԰ ሕ ԡ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ϟ 卷

ዛ঎ 不同固定剂处理后 ኏શዶ 电泳图ଫ ଧ঎ 不同固定剂处理后茎段组织形态图ᤥ
ዛ঎ ኏શዶ ᔀ᤟ᔀዹᡷʢᆍᡱၤᔀʢᆍ੫ʢᑕቝ ᑕ஦ᡷᔀʢ ᡷʢᔀᑕᡷቝᔀႿᡷ༁ औᔽᡷၤ ʛᔽ஦஦ᔀʢᔀႿᡷ ஦ᔽ଴ᑕᡷᔽ׹ᔀ༁ଫ ଧ঎ ᥘᆍʢᡱၤᆍ᤟ᆍ੫ᢃ ᆍ஦ ༁ᡷᔀቝ ༁ᔀ੫ቝᔀႿᡷ༁ ᑕ஦ᡷᔀʢ ᡷʢᔀᑕᡷቝᔀႿᡷ༁ औᔽᡷၤ ʛᔽ஦஦ᔀʢᔀႿᡷ ஦ᔽ଴ᑕᡷᔽ׹ᔀ༁঎
图 ϟজ 不同固定剂处理后 ኏શዶ 电泳及茎段组织形态比较
èᔽ੫঎ ϟজ ጶ஦஦ᔀዹᡷ༁ ᆍ஦ ʛᔽ஦஦ᔀʢᔀႿᡷ ஦ᔽ଴ᑕᡷᔽ׹ᔀ༁ ᆍႿ ኏શዶ ᔽ༁ᆍ᤟ᑕᡷᔽᆍႿ ᑕႿʛ ༁ᡷᔀቝ ቝᆍʢᡱၤᆍ᤟ᆍ੫ᢃ

表 ྽ই 不同固定剂和脱水透明剂处理组合 凝胶电泳结果表明ᖔ被稀释后的丙酮ྉ 浓度
ఋᑕᤦ᤟ᔀ ࿗জ ᧕ᔽ஦஦ᔀʢᔀႿᡷ ዹᆍቝᤦᔽႿᑕᡷᔽᆍႿ༁ ᆍ஦ ஦ᔽ଴ᑕᡷᔽ׹ᔀᖔ ϟԡᠮ ጲ ᤃԡᠮɯ作为固定剂ᖔ组织经过脱水ܦ透明后均
ʛᔀၤᢃʛʢᑕᡷᔽᆍႿ ᑕႿʛ ᔽႿ஦ᔽ᤟ᡷʢᑕᡷᔽᆍႿ
得到质量较好的 ኏શዶྉ 图 ࿗ɯᤥ 由图 ጢ 可知ᖔ当丙
处理 固定剂 脱水ܦ透明剂 酮体积占比大于卡诺时ᖔ切片不完整ᖔ髓部出现空
ఋʢᔀᑕᡷቝᔀႿᡷ èᔽ଴ᑕᡷᔽ׹ᔀ ᧕ᔀၤᢃʛʢᑕᡷᔽᆍႿ ᑕႿʛ ᔽႿ஦ᔽ᤟ᡷʢᑕᡷᔽᆍႿ
洞ᖔ细胞皱缩严重ᖔ不能清晰识别维管束各细胞ᤥ
ሙ 乙醇շ丙酮 乙醇շ异丙醇 因此ᖔ丙酮浓度为 ϟԡᠮ ጲ ጢԡᠮ时ᖔ经正丁醇脱水ܦ透
ጶᡷၤᑕႿᆍ᤟շዶዹᔀᡷᆍႿᔀ ጶᡷၤᑕႿᆍ᤟շ᧧༁ᆍᡱʢᆍᡱᑕႿᆍ᤟
明后提取 ኏શዶ 质量较好ᖔ石蜡切片后细胞形态完
֒ 卡诺շ丙酮 乙醇շ异丙醇
ऊᑕʢႿᆍᢃշዶዹᔀᡷᆍႿᔀ ጶᡷၤᑕႿᆍ᤟շ᧧༁ᆍᡱʢᆍᡱᑕႿᆍ᤟
整ᖔ满足激光显微切割上机前的要求ᤥ
ᎏ 乙醇շ丙酮 正丁醇 ԣॹ྽ 激光显微切割参数调试
ጶᡷၤᑕႿᆍ᤟շዶዹᔀᡷᆍႿᔀ Ⴅ᥋ାࣼᡷᑕႿᆍ᤟
᤻ 卡诺շ丙酮 正丁醇 根据切片厚度和收集的靶细胞不同ᖔ对应的
ऊᑕʢႿᆍᢃշዶዹᔀᡷᆍႿᔀ Ⴅ᥋ାࣼᡷᑕႿᆍ᤟
激光参数有较大的改变ᤥ 经过参数调试ᖔ摸索出
适合黄梁木形成层ܦ韧皮部和木质部的 ᓂᥘ᧕ 最佳
因此ᖔ选择以 Ꭾԡᠮ卡诺稀释丙酮作为固定剂ᖔ正丁 参数ᖔ结果见表 ጢᤥ 图 ᤃ 展示了形成层ܦ韧皮部和
醇作为脱水ܦ透明剂能得到较好的成片效果ᖔ且脱 木质部切割前ᖔ切割路径和收集管盖中的细胞显
水透明后 ኏શዶ 质量较好ᖔ达到激光显微切割上机 微结构图ᖔ说明不同类型细胞切割参数不同ᖔ其中
放大倍数ܦ激光能量和切割孔径影响最大ᤥ 特别
前的要求ᤥ
ԣॹᇺ 卡诺 ᣑ 丙酮不同配比处理结果 是形成层细胞壁薄ᖔ需在更大物镜倍数下且严格
为进一步确定卡诺稀释丙酮的最适浓度ᖔ建 控制激光能量完成切割ᤥ
立黄梁木幼苗茎段石蜡切片体系ᖔ本研究分别用 用 ኏Ⴟᔀᑕ༁ᢃ ᥘᔽዹʢᆍ Ҵᔽᡷྉ͐ᔽᑕ੫ᔀႿɯ提取微量 ኏શዶᖔ用

ँԡᠮܦऐԡᠮܦᎮԡᠮܦᤃԡᠮܦጢԡᠮܦ࿗ԡᠮ的卡诺稀释丙酮ᖔ ዶ੫ᔽ᤟ᔀႿᡷ ኏શዶ ᤃԡԡԡ ۪ᔽዹᆍ ᣽ᔽᡷ 检测 ኏શዶ 的完整性ྉ 图
正丁醇脱水ܦ透明后进行 ኏શዶ 提取及凝胶电泳ྉ图 Ꭾɯᤥ 由图 Ꭾ 可知ᖔ形成层 ኏᧧શ ᢉ ጢ঎ԡᖔ韧皮部 ኏᧧શ ᢉ

࿗ɯᖔ石蜡包埋切片后进行显微结构观察ྉ图 ጢɯᤥ ᤃ঎ᤃᖔ 木质部 ኏᧧શ ᢉ Ꭾ঎ँᤥ ኏શዶ 完整性指数 ྉ኏શዶ