Page 18 - 《广西植物》2021年第8期

ϟ ԰ ሕ ԰ 广জ 西জ 植জ 物 ࿗ϟ 卷

ዛ঎ 乙醇 ᨒ 丙酮 ᢉ Ꭾԡ ᨒ ሕԡྉႬᣑ Ⴌɯଫ ଧ঎ 卡诺 ᨒ 丙酮 ᢉ Ꭾԡ ᨒ ሕԡྉႬᣑ Ⴌɯᖔ乙醇 ᣰ 异丙醇为脱水ܦ透明剂ଫ ࣷ঎ 乙醇 ᨒ 丙酮 ᢉ Ꭾԡ ᨒ ሕԡྉ Ⴌᣑ Ⴌɯଫ
ᦵ঎ 卡诺 ᨒ 丙酮 ᢉ Ꭾԡ ᨒ ሕԡྉႬᣑ Ⴌɯᖔ正丁醇为脱水ܦ透明剂ᤥ ۗᔠ঎ 髓部ଫ ۗᐹ঎ 薄壁细胞ଫ ᣏᡥ঎ 木质部ଫ ࣷऊ঎ 形成层区域ଫ ۗ၊঎ 韧皮部ᤥ 标
尺 ᢉ ϟቝቝଫ 局部放大图标尺为 ԰ԡԡ ဂቝᤥ 下同ᤥ
ዛ঎ ጶᡷၤᑕႿᆍ᤟ ᨒ ዶዹᔀᡷᆍႿᔀᢉᎮԡ ᨒ ሕԡྉႬᣑ Ⴌɯଫ ଧ঎ ऊᑕʢႿᆍᢃ ᨒ ዶዹᔀᡷᆍႿᔀ ᢉ Ꭾԡ ᨒ ሕԡྉႬᣑ Ⴌɯᖔ ᔀᡷၤᑕႿᆍ᤟ᣰ ᔽ༁ᆍᡱʢᆍᡱᑕႿᆍ᤟ ஦ᆍʢ ʛᔀၤᢃʛʢᑕᡷᔽᆍႿ ᑕႿʛ ᔽႿ஦ᔽ᤟ᡷʢᑕᡷᔽᆍႿଫ ࣷ঎ጶᡷၤᑕႿᆍ᤟ ᨒ
ዶዹᔀᡷᆍႿᔀᢉᎮԡ ᨒ ሕԡྉႬᣑ Ⴌɯଫ ᦵ঎ऊᑕʢႿᆍᢃ ᨒ ዶዹᔀᡷᆍႿᔀᢉᎮԡ ᨒ ሕԡྉႬᣑ Ⴌɯᖔ Ⴅ᥋ାࣼᡷᑕႿᆍ᤟ ஦ᆍʢ ʛᔀၤᢃʛʢᑕᡷᔽᆍႿ ᑕႿʛ ᔽႿ஦ᔽ᤟ᡷʢᑕᡷᔽᆍႿ঎ ۗᔠ঎۪ᔽᡷၤଫ ۗᐹ঎ ۪ᑕʢᔀႿዹၤᢃቝႿଫ ᣏᡥ঎ ᣮᢃ᤟ᔀቝଫ
ࣷऊ঎ ऊᑕቝᤦᔽࣼቝ झᆍႿᔀଫ ۗ၊঎۪ၤ᤟ᆍᔀቝ঎ ାᑕʢ༁ᢉϟ ቝቝଫ ᓂᆍዹᑕ᤟ ᔀႿ᤟ᑕʢ੫ᔀቝᔀႿᡷ ᤦᑕʢ༁ ᑕʢᔀ ԰ԡԡ ဂቝ঎ ఋၤᔀ ༁ᑕቝᔀ ᤦᔀ᤟ᆍऔ঎
图 ሕজ 不同处理组合石蜡切片显微结构图
èᔽ੫঎ ሕজ ᥘᔽዹʢᆍ༁ᡷʢࣼዹᡷࣼʢᔀ ᆍ஦ ᡱᑕʢᑕ஦஦ᔽႿ ༁ᔀዹᡷᔽᆍႿ༁ औᔽᡷၤ ʛᔽ஦஦ᔀʢᔀႿᡷ ᡷʢᔀᑕᡷቝᔀႿᡷ ዹᆍቝᤦᔽႿᑕᡷᔽᆍႿ༁

ྉሕɯ样品聚焦不当不仅会干扰靶细胞的准确识别ᖔ
还会妨碍切割过程中激光束聚焦ᖔ使靶细胞不能
成功捕获ᤥྉ࿗ɯ在低放大率下ᖔ激光不够强大ᖔ甚
至不够精确ᖔ而高放大率ྉ 例如 ࿗ԡ ġɯ 显著减慢了
收集效率ᤥ 因此ᖔ需要对目标组织或细胞进行激
光参数调试ᖔ不同物种不同组织对应的切割参数
不同ᤥྉጢɯ可以将含有 ᓂᥘ᧕ 组织的多个管合并提
取 ኏શዶᖔ但应在ͱ ऐԡ ቩ 的裂解液中稳定፪ϟ 个月
ྉऊၤᑕ׹ᑕႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ԰ԡϟऐɯᤥ
ϟͱᤃ 代表卡诺 ᣰ 丙酮比例ྉ Ⴌᣑ Ⴌɯ 依次为 ँԡ ᨒ ϟԡܦऐԡ ᨒ ԰ԡܦ
特别注意的是ᖔ固定是确保获得高质量产量
Ꭾԡ ᨒሕԡܦᤃԡ ᨒ࿗ԡܦጢԡ ᨒጢԡܦ࿗ԡ ᨒᤃԡᤥ
的最关键步骤ᖔ这取决于固定剂的选择ܦ渗透时间
ᓂᑕႿᔀ༁ ϟ ͱ ᤃ ᔽႿʛᔽዹᑕᡷᔀ ዹᑕʢႿᆍᢃᣰ ᑕዹᔀᡷᆍႿᔀ ʢᑕᡷᔽᆍ ྉႬᣑ Ⴌɯᑕʢᔀ ँԡ ᨒ ϟԡᖔ
的长短ܦ温度和组织大小ᤥ 材料的固定一方面是
ऐԡ ᨒ ԰ԡᖔ Ꭾԡ ᨒ ሕԡᖔ ᤃԡ ᨒ ࿗ԡᖔ ጢԡ ᨒ ጢԡᖔ ࿗ԡ ᨒ ᤃԡᖔ ʢᔀ༁ᡱᔀዹᡷᔽ׹ᔀ᤟ᢃ঎
图 ࿗জ 卡诺ᣰ 丙酮不同配比处理 ኏શዶ 凝胶电泳图 使细胞的新陈代谢瞬时停止ᖔ保持组织或细胞形
èᔽ੫঎ ࿗জ ᥈ᔀ᤟ ᔀ᤟ᔀዹᡷʢᆍᡱၤᆍʢᔀ༁ᔽ༁ ᆍ஦ ኏શዶ ࣼႿʛᔀʢ 态结构的完整性ଫ另一方面稳定细胞内容物及组
ᡷʢᔀᑕᡷቝᔀႿᡷ༁ ᆍ஦ ʛᔽ஦஦ᔀʢᔀႿᡷ ʢᑕᡷᔽᆍ༁ ᆍ஦ ዹᑕʢႿᆍᢃᣰ ᑕዹᔀᡷᆍႿᔀ 织中 核酸和蛋白质的稳定性 ྉऊၤᑕ׹ᑕႿ ᔀᡷ ᑕ᤟঎ᖔ
԰ԡϟऐɯᤥ 固定剂还能达到使组织变硬从而便于切
显微切割的细胞移出收集平台时ᖔ要非常小心地 片ᖔ令细胞易于着色的目的ᖔ同时具有防腐作用

进行ᖔ如果收集管帽受到碰撞ᖔ样品可能会丢失ᤥ 等ᤥ 然而ᖔ 固定这个过程会致命地损害用于分析