Page 93 - 《广西植物》2026年第7期

７ 期 于淼等: 根区亚低温下外源 ＧＡＢＡ 对山定子幼苗根系线粒体功能的影响 １ １ ８ ９

根区温度控制在 ５ ℃ ꎻ(２) γ￣氨基丁酸( ＧＡＢＡ) 处
理:将幼苗放在土壤浇灌 １０ ｍｍｏｌＬ ＧＡＢＡ 溶液 ２ 结果与分析
￣１
的 ５ ℃ 低温槽中ꎻ(３) 氨己烯酸( ＶＧＢ) 处理:幼苗
置于土壤浇灌 ０.１ ｍｍｏｌＬ ＶＧＢ 溶液的 ５ ℃ 低温 ２.１ 根区 ５ ℃亚低温下 ＧＡＢＡ 对山定子根系线粒
￣１
槽中ꎻ(４)对照组(ＣＫ):幼苗在自然根区温度条件 体功能变化的影响
下(光照 １４ ｈ / ２０ ℃ 、黑暗 １０ ｈ / １０ ℃ )生长ꎮ 分别 ２.１.１ 对线粒体膜吸光度的影响 在波长为 ５４０
于处理后 ０、２、４、６、１２、２４ ｈ 进行取样ꎬ每个时间点 ｎｍ 时ꎬ吸光度越高ꎬ膜通透性反而越低ꎬ二者呈显著

选取 ３ 株幼苗ꎬ设置 ３ 次重复ꎬ每次取样共计 ９ 株ꎮ 负相关(Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１９)ꎮ 在本试验中ꎬ根区 ５
１.３ 试验方法 ℃亚低温处理下山定子根系线粒体膜在 ５４０ ｎｍ 处

１.３.１ 呼吸速率测定 根系呼吸方法参照 Ｂｏｕｍａ 的吸光度较对照(ＣＫ) 显著降低ꎬ而且持续降低ꎬ这
等(２００１)的方法ꎻ呼吸途径速率和呼吸途径贡献 说明线粒体功能已经受到了不利影响ꎮ 由图 １ 可

率的计算参照 Ｚｈａｎｇ 等(２０１２)的方法ꎮ 知ꎬＧＡＢＡ 处理下膜吸光度较 ５ ℃处理显著提高(除
１.３.２ 线粒体提取和相关指标测定 参照杨玖英 ２ ｈ 以外)ꎬ在 ４ ｈ 时达到峰值ꎬ较 ５ ℃ 处理提升了
等( ２００４) 的 方 法 提 取 线 粒 体ꎻ 参 照 金 超 芳 等 １６.３６％ꎬ但仍未超过 ＣＫ 处理ꎻ而 ＶＧＢ 则使吸光度
(２００２)的方法测定线粒体膜吸光度ꎻ参照 Ｔｏｎｓｈｉｎ 进一步降低且在 ２４ ｈ 内显著低于 ５ ℃ 处理ꎮ 上述
等(２００３)的方法测定 ｃ / ａ 值ꎮ 结果表明ꎬ外源 ＧＡＢＡ 可缓解亚低温对根系线粒体
１.３.３ 能量物质含量测定 参照 Ｌｉｕ 等(２０１６)的方 结构造成的损伤(图 １)ꎮ
法提 取 山 定 子 根 系 ＡＴＰ、二 磷 酸 腺 苷 ( ａｄｅｎｏｓｉｎｅ
ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅꎬ ＡＤＰ ) 和 一 磷 酸 腺 苷 ( ａｄｅｎｏｓｉｎｅ
ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅꎬＡＭＰ)ꎬ含量测定参照李栋(２０２１)
的方法中的高效液相色谱检测条件ꎮ
１.３. ４ 基 因 表 达 量 测 定 采 用 ＯＭＥＧＡ 试 剂 盒
(Ｐｌａｎｔ ＲＮＡ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ Ｒ６８２７￣０１) 提取样品总 ＲＮＡꎬ
检测细胞色素氧化酶(ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ ｏｘｉｄａｓｅꎬＣＯＸ) 和
交替氧化酶( ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ ｏｘｉｄａｓｅꎬＡＯＸ) 基因的表达
量ꎮ 使用微体积分光光度计测定 ＲＮＡ 浓度ꎬ采用
大连宝生物(Ｔａｋａｒａ)反转录试剂盒构建 ＲＮＡ 反转
录反 应 体 系ꎬ 参 照 Ｌｉｖａｋ 和 Ｓｃｈｍｉｔｔｇｅｎ ( ２００１) 的
方法ꎮ
１.３.５ 抗氧化酶活性的测定 采用 Ｈｅ 等(２０１１)的 不同小写字母表示相同时间下不同处理间有显著性差异
(Ｐ<０.０５)ꎮ 下同ꎮ
方 法 对 超 氧 化 物 歧 化 酶 ( ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅꎬ
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｏｗｅｒｃａｓｅ ｌｅｔｔｅｒｓ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ａｍｏｎｇ
ＳＯＤ)、过氧化氢酶( ｃａｔａｌａｓｅꎬＣＡＴ) 和过氧化物酶 ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ. Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ.
(ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅꎬＰＯＤ)的活性进行测定ꎻ抗坏血酸过氧
图 １ 根区 ５ ℃下不同处理对山定子
化物酶( ａｓｃｏｒｂａｔｅ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅꎬＡＰＸ) 活性测定则参 线粒体膜吸光度的影响
照 Ｐｏｌｌｅ 等(１９９０)的描述进行ꎮ Ｆｉｇ. １ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ｏｎ ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ
１.３.６ 丙二醛( ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅꎬＭＤＡ) 含量的测定 ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｉｎ Ｍａｌｕｓ
ｂａｃｃａｔａ ｕｎｄｅｒ ｒｏｏｔ￣ｚｏｎｅ ５ ℃
参照 Ｌｅｉ 等(２００７)的方法测定 ＭＤＡ 含量ꎮ
１.４ 数据统计与分析
使用 ＷＰＳ Ｏｆｆｉｃｅ、ＳＰＳＳ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２１ 软件对数 ２.１.２ 对细胞色素 ｃ / ａ 值的影响 试验结果(图 ２)
据进行处理和分析ꎬ采用单因素分析法进行方差 显示ꎬ５ ℃处理下ꎬ根系 ｃ / ａ 值显著低于 ＣＫ 组ꎻ与 ５

比较ꎬ采用 Ｄｕｎｃａｎ 方法进行多重比较ꎬ采用 Ｏｒｉｇｉｎ ℃处理相比ꎬＧＡＢＡ 处理可提高 ｃ / ａ 值( 除 ６、１２ ｈ
以外ꎬ其余时间点均达显著性差异)ꎬ２ ｈ 达峰值
２０１８ 软件绘制图表ꎬ在图表中用字母标注显著性ꎬ
并在图中添加误差棒ꎮ (１.０５８)ꎬ但仍低于 ＣＫ 组ꎻＶＧＢ 处理会进一步降低