Page 131 - 《广西植物》2020年第5期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ｍａｙ ２０２０ꎬ ４０(５): ７２７－７３４
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０１８１２００７
田守征ꎬ 黄之镨ꎬ 赵玉瑛ꎬ 等. 剑叶龙血树内生放线菌活性菌株的筛选和鉴定 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ２０２０ꎬ ４０(５): ７２７－７３４.
ＴＩＡＮ ＳＺꎬ ＨＵＡＮＧ ＺＰꎬ ＺＨＡＯ ＹＹꎬ ｅｔ ａｌ. Ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ ｆｒｏｍ Ｄｒａｃａｅｎａ ｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ [ Ｊ].
Ｇｕｉｈａｉａꎬ ２０２０ꎬ ４０(５): ７２７－７３４.
剑叶龙血树内生放线菌活性菌株的筛选和鉴定
田守征 ꎬ 黄之镨 ꎬ 赵玉瑛 ꎬ 赵 庆 ꎬ 张晓梅 １∗
２
２
１
２
( １. 云南中医药大学 基础医学院ꎬ 昆明 ６５０５００ꎻ ２. 云南中医药大学 中药学院ꎬ 昆明 ６５０５００ )
摘 要: 为筛选具有抗菌抗肿瘤活性的药用植物内生菌资源ꎬ该文对 ３００ 余株分离自中国云南西双版纳及
越南地区剑叶龙血树的内生放线菌采用琼脂块扩散法进行抗病原细菌活性筛选、平板对峙法进行抗真菌活
性筛选、ＳＲＢ 法测定菌株的细胞毒活性及 ＰＣＲ 扩增方法筛选非核糖体肽合成酶 ＮＲＰＳ 基因及聚酮合酶
ＰＫＳ￣Ｉ、ＰＫＳ￣Ⅱ基因ꎻ对得到的优势菌株经 ８ 种培养基进行发酵ꎬ采用 １０ 种病原细菌、３ 种病原真菌及 ２ 种人
肿瘤细胞株测试其发酵粗提物的抗菌及抗肿瘤活性以确定最佳发酵培养基ꎻ用 １６Ｓ ｒＲＮＡ 基因测序方法初
步鉴定 ５ 株优势菌株的分类地位ꎮ 结果表明:初筛得到 ５ 株抗菌活性、体外细胞毒活性及 ＮＲＰＳ、ＰＫＳ 相关
基因表达阳性的菌株 Ｓ０１－Ｓ０５ꎬ其中 ４ 株(Ｓ０１－Ｓ０４)属于链霉菌属、１ 株(Ｓ０５)属于类诺卡氏菌属ꎻ菌株经不
同培养基发酵后产物的抗菌和抗肿瘤活性不同ꎬ其中 Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ. Ｓ０４ 在 ７ 种培养基中的发酵提取物对 ８
种测试病原菌均有较强抑制作用ꎬ且该菌株用 Ｍｅｄｉｕｍ Ｃ 的发酵提取物对人肝癌 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞株抑制率达到
１００％ꎬ为剑叶龙血树内生菌活性成分挖掘及新型抗菌药物筛选奠定了基础ꎮ
关键词: 剑叶龙血树ꎬ 内生放线菌ꎬ 抗菌活性ꎬ 抗肿瘤活性ꎬ １６Ｓ ｒＲＮＡ 基因分析
中图分类号: Ｑ９３９ 文献标识码: Ａ
文章编号: １０００￣３１４２(２０２０)０５￣０７２７￣０８ 开放科学(资源服务)标识码(ＯＳＩＤ):
Ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ
ｆｒｏｍ Ｄｒａｃａｅｎａ ｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ
１ ２ ２
ＴＩＡＮ Ｓｈｏｕｚｈｅｎｇ ꎬ ＨＵＡＮＧ Ｚｈｉｐｕ ꎬ ＺＨＡＯ Ｙｕｙｉｎｇ ꎬ
２ １∗
ＺＨＡＯ Ｑｉｎｇ ꎬ ＺＨＡＮＧ Ｘｉａｏｍｅｉ
( １. Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ Ｙｕｎｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５０５００ꎬ Ｃｈｉｎａꎻ ２. Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ
Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ Ｙｕｎｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅꎬ Ｋｕｎｍｉｎｇ ６５０５００ꎬ Ｃｈｉｎａ)
收稿日期: ２０１９－０２－１３
基金项目: 国 家 自 然 科 学 基 金 ( ２１６６２０４８ꎬ ３１６０００１８)ꎻ 云 南 省 科 学 技 术 厅 － 云 南 中 医 学 院 应 用 基 础 研 究 联 合 专 项 项 目
[２０１７ＦＦ１１６( －００２)]ꎻ广东省热带亚热带植物资源重点实验室开放课题( ＰｌａｎｔＫＦ１０) [ Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ
Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ(２１６６２０４８ꎬ ３１６０００１８)ꎻＹｕｎｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ａｎｄ Ｙｕｎｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂａｓｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｊｏｉｎｔ Ｐｒｏｇｒａｍ [２０１７ＦＦ１１６( － ００２)]ꎻＧｕａｎｇｄｏｎｇ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ ａｎｄ Ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ
Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ Ｏｐｅｎ Ｐｒｏｇｒａｍ (ＰｌａｎｔＫＦ１０)]ꎮ
作者简介: 田守征(１９８８－)ꎬ男ꎬ河南睢县人ꎬ硕士ꎬ实验师ꎬ研究方向为药用植物内生菌分离及活性代谢产物发掘ꎬ( Ｅ￣ｍａｉｌ)
Ｔｉａｎｓｈｚｈ＿０１０１＠ １２６.ｃｏｍꎮ
∗
通信作者: 张晓梅ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ研究方向为药用植物内生菌活性代谢产物发掘ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｍｅｉｍｅｉｚｈａｎｇ.ｎｅｔ＠ １６３.ｃｏｍꎮ
