Page 132 - 《广西植物》2020年第5期

７ ２ ８ 广 西 植 物 ４０ 卷
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｆｒｏｍ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔꎬ ３００ ｅｎｄｏｐｈｙｔ￣
ｉｃ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｄｒａｃａｅｎａ ｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｘｉｓｈｕａｎｇｂａｎｎａꎬ Ｃｈｉｎａ ａｎｄ Ｖｉｅｔｎａｍ ｗｅｒｅ
ｓｔｕｄｉｅｄ. ＳＲＢ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓꎬ ａｇａｒ ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ ａｎｄ ｐｌａｔｅ ｃｏｎｆｒｏｎｔａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ
ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｔｅｓｔ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓꎬ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ＮＲＰＳꎬ ＰＫＳ￣Ｉ ａｎｄ ＰＫＳ￣Ⅱ
ｇｅｎｅｓꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｔａｘｏｎｏｍｉｃ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｖｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｃｔｉｖｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｕｓｉｎｇ １６Ｓ ｒＲＮＡ ｇｅｎｅ ａｎａｌｙｓｉｓ. Ｅｉｇｈｔ
ｍｅｄｉａ ｗｅｒｅ ｄｅｓｉｇｎｅｄ ｔｏ ｃｕｌｔｉｖａｔｅ ｆｉｖｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｃｔｉｖｅ ｓｔｒａｉｎｓ ａｎｄ ｔｈｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅｉｒ ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｏｘｆｏｒｄ￣ｃｕｐ ｔｅｓｔ ａｇａｉｎｓｔ ｔｅｎ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ ａｎｄ ｔｈｒｅｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｉꎬ ｔｈｅ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ
ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ＭＴＴ ａｓｓａｙ ｉｎ ｔｗｏ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ. Ａｓ ａ ｒｅｓｕｌｔꎬ ｆｏｕｒ ｏｆ ｔｈｅ ｆｉｖｅ ａｃｔｉｖｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ ａｓ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ
ｓｐｐ. ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｍａｉｎｉｎｇ ｏｎｅ ａｓ Ｎｏｃａｒｄｉｏｉｄｅｓ ｓｐ. Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｄｉａ ｒｅｓｕｌｔｅｄ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓꎬ ｍｏｓｔ ｍｅｄｉａ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ Ｓ０４
ｓｈｏｗｅｄ ｓｔｒｏｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ａｇａｉｎｓｔ ｅｉｇｈｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔ ｏｆ Ｓ０４ ｉｎ Ｍｅｄｉｕｍ Ｃ ｏｎ
Ｈｅｐ Ｇ２ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ １００％ꎬ ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ａ ｎｏｖｅｌ ｒｅｓｏｕｒｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｍｉｎｉｎｇ ｏｆ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ
ｓｔｕｄｉｅｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｄｒａｃａｅｎａ ｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓꎬ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓꎬ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓꎬ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓꎬ
１６Ｓ ｒＲＮＡ ｇｅｎｅ ａｎａｌｙｓｉｓ

微生物来源的天然产物在人和动植物疾病中 法或从严格表面消毒的植物组织中分离或从植物
发挥着重要作用ꎬ广泛用作抗细菌、抗真菌和抗肿 组织内直接扩增出微生物 ＤＮＡ 的方法来证明其

瘤的临床药物ꎬ在医药行业和农业方面做出了重 内生(朱文勇ꎬ２０１３)ꎮ 内生菌是一类非常重要的
要贡献( Ｋａｔｚ ＆ Ｂａｌｔｚꎬ２０１６)ꎮ 已发现 ３ 万多种微 微生物资源ꎬ它们具有独特的分化和发育过程ꎬ使
生物来源的代谢产物中ꎬ约有 ３０％由放线菌所产 其能够适应植物内部这个特殊的环境ꎬ同时它们

生ꎬ６０％ 由真菌产生ꎬ１０％ 由粘细菌产生( Ｂéｒｄｙꎬ 还能够编码产生多种生物活性物质ꎬ被广泛应用
２０１２ꎻＳｕｂｒａｍａｎｉ ＆ Ａａｌｂｅｒｓｂｅｒｇꎬ２０１２)ꎮ 据保守估 于医药、工业、农业、食品以及环保等领域ꎮ 内生
计ꎬ迄今为止从微生物中发现的次生代谢产物数 菌和高等植物经长时间的协同进化ꎬ为适应宿主

量仅占其基因组所编码总数的 ２０％ ~ ３０％( Ｉｋｅｄａ 体内微环境ꎬ允许自身与宿主植物之间进行基因
ｅｔ ａｌ.ꎬ２００３)ꎬ且自然界中至少 ９０％以上的微生物 信息的交流转移ꎬ使得自身发生遗传变化ꎬ使某些
资源未被人们认识ꎮ 现在普遍认为ꎬ新生境可能 内生菌产生抗生素、植物生长激素等生物活性物
蕴藏新物种ꎬ新物种可能拥有新基因ꎬ新的基因资 质ꎬ尤其是一些内生菌还获得了产生和宿主植物
源可能决定了代谢机制的多样性和新颖性ꎬ从而 相同或相似化合物的能力ꎬ提示我们从植物内生
能极 大 程 度 地 避 免 化 合 物 重 复 发 现 的 问 题 菌尤其药用植物内生菌中挖掘具有宿主植物相似
(Ｔｉｗａｒｉ ＆ Ｇｕｐｔａꎬ２０１２)ꎮ 近年来的统计发现ꎬ从特 活性代谢产物的潜力极大ꎮ 世界范围内对内生菌

殊生境微生物中分离到新的活性物质的概率远高 研究的关注始于 １９９３ 年ꎬＳｔｉｅｒｌｅ 从短叶紫杉的内
于普通土壤微生物ꎬ它们极有可能成为发现新活 生真菌中发现紫杉醇( Ｓｔｉｅｒｌｅ ｅｔ ａｌ.ꎬ１９９３)ꎬ此后喜
性先导 化 合 物 及 新 药 的 重 要 来 源 ( Ｂｕｌｌ ｅｔ ａｌ.ꎬ 树碱、鬼臼毒素和长春新碱等抗癌明星药也陆续
２００５)ꎮ 因此ꎬ人们把研究目光转向栖息于特殊生 从其原产植物的内生真菌中发现( Ａｍｎａꎬ２００６)ꎮ

境的微生物ꎬ如海洋、动植物内生环境、高温热泉、 内生放线菌次生代谢产物的研究较内生真菌少ꎬ
盐湖、洞穴等各种极端环境( Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ２０１３ꎻ张 典型代表是云南美登 木 内 生 放 线 菌 Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ

道锋ꎬ２０１３ꎻ张晓梅ꎬ２０１４)ꎮ ｓｐｐ.ꎬ从中分离得到一系列萘霉素类( ｎａｐｈｔｈｏｍｙｃｉｎ
植物内生菌( ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ) 是指那些生活史的 Ｋ)、巴佛洛霉素类、Ⅲ型聚酮类、大环内酯等类型
部分或全部阶段生活于健康植物组织内部的真菌 的新化合物(Ｌｕ ＆ Ｓｈｅｎꎬ２００７ꎻＬｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ２００８ꎻＹａｎｇ
或细菌ꎬ宿主植物不表现出病症ꎬ可通过组织学方 ｅｔ ａｌ.ꎬ２０１２)ꎬ大部分具有抗菌或抗肿瘤细胞等活