Page 136 - 《广西植物》2020年第5期
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                            表 2  剑叶龙血树内生放线菌不同培养基的发酵产量
  Table 2  Yields of extract produced by the endophytic actinomycetes from Dracaena cochinchinensis in different fermented media

                                                 不同培养基发酵产量
                                                                         ̄1
     菌株编号                              Yields in different fermented media (mg100 mL )
     Strain code
                  A          B          C         D          E          F          G         H
       S01       81.10     74.00      45.90      37.50      34.30      43.60     79.30      20.30
       S02       50.30     73.00      55.00      53.40      48.30      42.10     109.70     22.50
       S03       60.50     98.20      105.00     43.70      20.90      26.70     27.50      12.60

       S04       30.30     52.60      55.70      20.80      21.50      10.70     32.90      12.50
       S05       30.00     74.60      47.80      39.50      17.20      36.70     21.60      11.70


   响ꎬ设计 8 种培养基对筛出的 5 株阳性菌株分别进                            以上结果表明ꎬ5 种优势菌株在 C 培养基中的
   行小量发酵ꎬ结合菌株长势ꎬ发酵提取物产量及抗                            长势、发酵粗提物产量及活性相对于其他培养基
   菌活性综合确定菌株高产活性代谢产物的发酵培                             较好ꎬ可作为下一步对目标菌株活性成分挖掘的

   养基ꎮ 不同培养基发酵粗提物产量如表 2 所示ꎬ                          目标发酵培养基ꎮ
   综合来看ꎬ8 种培养基中 C 培养基的产量和长势相
   对于其他培养基较好ꎬ菌株在 A 和 H 培养基上生                         3  讨论
   长状况较差ꎻ且菌株在不同培养基产色素不同ꎬ 预
   示不同培养基产生不同代谢产物ꎮ                                       从剑叶龙血树内生放线菌菌种库的 300 余株
       5 株剑叶龙血树内生放线菌不同培养基发酵                          内生菌中筛选出 5 株兼具抗多种病原菌和细胞毒
   产物抑菌活性筛选结果见表 3ꎮ 5 株内生菌的发                          活性且 NRPS、PKS 基因簇阳性的菌株ꎬ并以 10 株
   酵提取物对 8 种或以上测试菌有不同程度的抑菌                           临床常见的致病菌:白色葡萄球菌、金黄色葡萄球

   活性ꎬ菌株 S4 抑菌活性较强ꎬS02 和 S03 次之ꎬS01                  菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、克雷
   和 S05 活性较弱ꎻ其中所有菌株的各种发酵提取                          伯氏菌、粪肠球菌、白色念珠菌、鼠伤寒沙门氏菌

   物对 鼠 伤 寒 沙 门 氏 菌 ( Salmonella typhimurium    χ    和铜绿假单胞菌以及人乳腺癌肿瘤细胞株、人肝
   8956) 均 无 抑 制 作 用ꎬ 对 铜 绿 假 单 胞 菌                  癌细胞株为靶标ꎬ对这 5 株菌高产活性成分的发
   (Pseudomonas aeruginosa PA01)仅有菌株 S04 的 C         酵培养基进行优化ꎬ确定其最佳培养基ꎬ为下一步
   培养基发酵产物表现出活性ꎬ抑菌圈直径为 12.06                         从目标菌株中挖掘活性成分奠定了基础ꎮ
   mmꎬ故以上两株病原菌的情况未在标中列出ꎮ 从                               药用植物内生放线菌是新天然产物及活性物
   表中可以看出ꎬ大多数菌株的 B、C、D、E、F、G 6 种                     质发掘的重要源泉ꎬ本研究筛选出的 5 株优势菌
   培养基发酵提取物抑菌活性较 A 和 H 两种培养基                         经分类鉴定为 2 个属的 4 个种ꎬ其中 S01 -S04 为

   发酵提取物强ꎮ                                           链霉菌属ꎬ链霉菌是放线菌中资源最多ꎬ产生抗生
       对菌株不同培养基发酵提取物进行体外细胞                           素种类最多的一个属ꎬ部分目标菌株来源于其他

   毒 活 性 测 试 结 果 表 明ꎬ S04C ( 为 菌 株 S04 在             环境的同种菌株已有产生活性成分的报道( Su et
   Medium C 中 的 粗 提 物 的 简 写ꎬ 下 同) 对 人 肝 癌            al.ꎬ2013ꎻPrakasham et al.ꎬ2014ꎻPan et al.ꎬ2015ꎻ
   Hep G2 细胞株具有较强的抑制作用ꎬ抑制率达到                         Aehtesham et al.ꎬ2018)ꎬ可见筛选出的活性内生链
   100%ꎻS01C 和 S02C 具有中等强度的抑制作用ꎬ                     霉菌具有产生多种活性成分的潜力ꎬ但本研究的
   抑制率为 60%ꎬ其余发酵产物表现出微弱或无抑                           目标菌株来源于传统药用植物剑叶龙血树内生ꎬ
   制作用ꎮ                                              这个特殊的新环境能否产生有别于其他环境菌株
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