Page 61 - 《广西植物》2020年第5期
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５ 期 付美玲等: 落叶松针叶化学成分研究 ６ ５ ７
５Ｃ ＡＲ￣ＩＩ(１０ ｍｍ × ２５０ ｍｍ)ꎬ水︰甲醇 ＝ １︰９ꎬ 空白对照ꎬ每个处理重复 ３ 次ꎮ 用十字交叉法( 田
１８
流速 ２ ｍＬ ｍｉｎ ] 进 一 步 纯 化ꎬ 得 到 化 合 物 ２ 双娥ꎬ２０１９)测量菌落直径ꎬＤ 处理 为处理菌落直径ꎬ
￣１
Ｄ 为对 照 菌 落 直 径ꎬ 并 通 过 以 下 公 式 计 算 抑
(１４.３ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４ 经硅胶柱色谱分离( 二氯甲烷︰ 对照
乙酸乙 酯 ＝ ９ ︰１ꎬ８ ︰２ꎬ７ ︰３)ꎬ 得 到 １６ 个 流 分 菌率ꎮ
(Ｆｒ.４￣１~ ４￣１６)ꎬＦｒ.４￣４ 经过重结晶( 二氯甲烷︰乙 Ｄ 处理 － Ｄ 对照
抑菌率(％) ＝ × １００％ꎮ
酸乙酯 ＝ ８︰２)ꎬ得到化合物 ３(７.１ ｍｇ)ꎬ分别将 Ｄ 处理
Ｆｒ.４￣６ 和 Ｆｒ.４￣１０ 进行重结晶( 二氯甲烷︰乙酸乙
２ 结果与分析
酯 ＝ ７︰３)处理ꎬ得到化合物 ４(９.４ ｍｇ)和化合物 ５
(１２ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４￣１１ 经过重结晶( 乙酸乙酯)ꎬ得到
２.１ 结构鉴定
化合物 ６(９.４ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４￣１３ 经硅胶柱色谱ꎬ以正
化合物 １ 白色晶体( 正 己 烷 － 乙 酸 乙 酯)ꎬ
己烷－乙酸乙酯(７︰３) 洗脱ꎬ得到 ２ 个流分( Ｆｒ.４￣
ｍｐ: １０１ ~ １０２ ℃ ꎬ ＥＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ: ３０６ [Ｍ] ꎬ 分子式
＋
１３￣１~ ４￣１３￣２)ꎬＦｒ.４￣１３￣１ 重结晶( 乙酸乙酯) 得到
１
为 Ｃ Ｈ Ｏ ꎬ Ｈ￣ＮＭＲ (６００ ＭＨｚꎬ ＣＤＣｌ ) δ: ０.６９
化合物 ７(５.５ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４￣１５ 重结晶( 乙酸乙酯) 得 ２０ ３４ ２ ３
到化合物 ８(６.９ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.１ 经硅胶柱色谱分离( 正 (３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣２０)ꎬ １.０１ (３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣１９)ꎬ １.１６ (３Ｈꎬ
ｓꎬ Ｈ￣１８)ꎬ １.２６ (３Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣１６)ꎬ ２.０５ (１Ｈꎬ ｔꎬ Ｊ ＝
己烷︰乙酸乙酯 ＝ ９︰１ꎬ８︰２)ꎬ得到 １２ 个流分
１１.８ Ｈｚꎬ Ｈ￣７)ꎬ ２.６７ (１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝ ４.８ꎬ １２.０ Ｈｚꎬ
(Ｆｒ.１￣１ ~ １￣１２)ꎬＦｒ.１￣２ 经过重结晶( 乙酸乙酯)ꎬ
Ｈ￣７)ꎬ ３.８６ (１Ｈꎬ ｍꎬ Ｈ￣６)ꎬ ４.５９ (１Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ １.４
得到化合物 ９(１６.３ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.２￣６ 经过重结晶( 乙
Ｈｚꎬ Ｈ￣１７)ꎬ ４.８９ (１Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ １.４Ｈｚꎬ Ｈ￣１７)ꎬ ５.０６
酸乙酯)ꎬ得到化合物 １０(５.４ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.５ 经硅胶柱
(１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝ １. ２ꎬ １０. ６ Ｈｚꎬ Ｈ￣１５)ꎬ ５. ２１ ( １Ｈꎬ
色谱分离( 二氯甲烷︰甲醇 ＝ ９︰１)ꎬ得到 ９ 个流
ｄｄꎬ Ｊ ＝ １.２ꎬ １７.１ Ｈｚꎬ Ｈ￣１５)ꎬ ５.９１ (１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝
分(Ｆｒ.５￣１~ ５￣９)ꎬＦｒ.５￣７ 经过重结晶( 甲醇)ꎬ得到
１０. ９ꎬ １７. １ Ｈｚꎬ Ｈ￣１４ )ꎻ １３ Ｃ￣ＮＭＲ ( １５０ ＭＨｚꎬ
化合物 １１(２０ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４￣１３￣２ 经过重结晶( 乙酸
ＣＤＣｌ ) δ: ３９.３ (Ｃ￣１)ꎬ １９.２ (Ｃ￣２)ꎬ ４３.８ (Ｃ￣３)ꎬ
乙酯)ꎬ得到化合物 １２(８.６ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４￣１４ 经硅胶 ３
３３.９ (Ｃ￣４)ꎬ ６０.６ ( Ｃ￣５)ꎬ ７１.７ ( Ｃ￣６)ꎬ ４９.２ ( Ｃ￣
柱色谱ꎬ以正己烷－乙酸乙酯(７︰３) 洗脱ꎬ得到化
７)ꎬ １４５. ６ ( Ｃ￣８)ꎬ ５６. ５ ( Ｃ￣９)ꎬ ３９. ６ ( Ｃ￣１０)ꎬ
合物 １３(７.１ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４－７ 经硅胶柱色谱ꎬ以正己
１８.１ (Ｃ￣１１)ꎬ ４１.４ ( Ｃ￣１２)ꎬ ７３.６ ( Ｃ￣１３)ꎬ １４５.３
烷－乙酸乙酯( ７ ︰３) 洗脱ꎬ经过重结晶( 乙酸乙
(Ｃ￣１４)ꎬ １１１.７ ( Ｃ￣１５)ꎬ ２７.８ ( Ｃ￣１６)ꎬ １０８.５ ( Ｃ￣
酯) 得 到 化 合 物 １４ ( ７. ２ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ. １ － ５ 经 ＨＰＬＣ
１７)ꎬ ３６.７ ( Ｃ￣１８)ꎬ ２２.７ ( Ｃ￣１９)ꎬ １６.１ ( Ｃ￣２０)ꎮ
[Ｃｏｓｍｏｓｉｌ ５Ｃ ＡＲ￣ＩＩ(１０ ｍｍ × ２５０ ｍｍ)ꎬ水︰甲
１８ 根据文献报道( 杨保华ꎬ２００４)ꎬ鉴定化合物 １ 为
醇 ＝ ５︰９５ꎬ流速 ２ ｍＬｍｉｎ ] 进一步纯化得到化
￣１
Ｌａｒｉｘｏｌꎮ
合物 １５(２０.３ ｍｇ)ꎮ
化合物 ２ 黄色油状物( 正己烷￣乙酸乙酯)ꎬ
１.３ 抑菌活性实验 ＋
ＥＩ￣ＭＳ ｍ / ｚ: ３０１ [ Ｍ ] ꎬ 分 子 式 为 Ｃ Ｈ Ｏ ꎬ
１７ １７ ５
乙酸乙酯萃取物以丙酮作为溶剂ꎬ配制浓度 １
Ｈ￣ＮＭＲ ( ６００ ＭＨｚꎬ ＣＤＣｌ ) δ: ２. ０５ ( １Ｈꎬ ｓꎬ
３
分别为 １００、５０、２０、１０ 和 ５ ｍｇｍＬ 溶液ꎬ用于抑
￣１
ＣＨ ￣６)ꎬ ２.７６ (１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝ ２.７ꎬ １７.１ Ｈｚꎬ Ｈ￣３)ꎬ
３
菌活性测定ꎮ 参照赵赟鑫(２０１０) 的实验方法ꎬ首 ３.０９ ( １Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝ １３. １ꎬ １７. １ Ｈｚꎬ Ｈ￣３)ꎬ ３. ８３
先ꎬ选择直径为 ９ ｃｍ 培养皿制备 ＰＤＡ 平板ꎬ灭菌ꎻ (３Ｈꎬ ｓꎬ ＯＣＨ ￣７)ꎬ ５.３５ (１Ｈꎬ ｄｄꎬ Ｊ ＝ ２.７ꎬ １３.１
３
再用涂布器在平板上均匀涂布大肠杆菌、枯草芽 Ｈｚꎬ Ｈ￣２)ꎬ ６.０７ (１Ｈꎬ ｓꎬ Ｈ￣８)ꎬ ６.８８ (２Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝
孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的菌悬 ８.３ Ｈｚꎬ Ｈ￣３′ꎬ Ｈ￣５′)ꎬ ７.３４ ( ２Ｈꎬ ｄꎬ Ｊ ＝ ８.３ Ｈｚꎬ
液ꎻ最后ꎬ采用打孔法ꎬ用直径为 ６ ｍｍ 的无菌打孔 Ｈ￣２′ꎬ Ｈ￣６′)ꎬ １２. ０６ ( ＯＨ￣５ )ꎻ １３ Ｃ￣ＮＭＲ ( １５０
器在已涂布菌悬液的培养基上打孔ꎬ每孔加入上 ＭＨｚꎬ ＣＤＣｌ ) δ: ７９.１ ( Ｃ￣２)ꎬ ４３.３ ( Ｃ￣３)ꎬ１９６.１
３
述不同浓度萃取物药液 ５０ μＬꎬ以等体积的丙酮为 ( Ｃ￣４)ꎬ １６０.４ (Ｃ￣５)ꎬ １０６.０ (Ｃ￣６)ꎬ １６５.８ (Ｃ￣７)ꎬ
