Page 53 - 《广西植物》2023年第10期
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10 期                王雪芹等: 基于质体基因组学方法研究广义玄参科的系统发育                                          1 8 0 7

            科包括约 220 属4 500余种ꎬ我国有 61 属 681 种ꎮ                  1.2 构建矩阵
            «中国植物志» 所采用的玄参科的范畴ꎬ即为上文                                基于蛋白质编码基因ꎬ我们构建了用于后续
            所述广义玄参科ꎮ 前人关于广义玄参科的研究多                             系统发育分析的矩阵ꎮ 每个物种的蛋白质编码基
            采用少数叶绿体片段ꎬ所获得的系统发育关系ꎬ部                             因按基因名称的字母进行排序和连接ꎬ采用在线
            分 支 系 的 支 持 率 不 够 高ꎬ 如 车 前 科                       软 件 MAFFT version 7 ( https: / / mafft. cbrc. jp /
            (Plantaginaceae)、玄参科和紫葳科( Bignoniaceae)            alignment/ server / )(Katoh et al.ꎬ 2019) 进行比对ꎬ
            的单系仅得到中等支持率的支持ꎻ紫葳科、马鞭草                             参数设置为默认值ꎮ 比对结果采用 MEGA 7.0 软
            科(Verbenaceae)、爵床科( Acanthaceae) 和狸藻科              件(Kumar et al.ꎬ 2016) 进行部分人工校正ꎬ并对
            (Lentibulariaceae)等的关系并没有得到很好的解                    矩阵的长度、变异位点的数目等信息进行统计ꎮ
            决(Liu et al.ꎬ2020) 等ꎬ因此有待进一步的研究ꎮ                   1.3 系统发育分析
            本文基于质体基因组数据ꎬ以广义玄参科及相关                                  基于 所 获 得 的 矩 阵ꎬ 分 别 采 用 最 大 似 然 法
            类群为主要研究对象ꎬ利用质体基因组数据中的                              (maximum likelihoodꎬ ML)及贝叶斯推断( Bayesian
            蛋白质编码基因ꎬ重建其系统发育树ꎬ对原隶属于                             inferenceꎬBI) 进 行 系 统 发 育 分 析ꎮ 采 用 CIPRES
            广义玄参科相关物种的归属问题进行研究ꎬ并对                              Science Gateway ( Miller et al.ꎬ 2010) 在 线 工 具
            唇形目内部科间关系进行探讨ꎮ                                     RaxML ver. 8.2.12( Stamatakisꎬ 2014) 进行 RaxML
                                                               分析ꎬ 选 择 GTRGAMMA 模 型ꎬ 采 用 快 速 靴 代 值
            1  材料与方法                                           (rapid bootstrap) 分 析ꎬ 重 复 1 000 次 ( bootstrapꎬ

                                                               BS)ꎮ 采用 CIPRES Science Gateway( Miller et al.ꎬ
            1.1 研究数据                                           2010) 在 线 工 具 MrBayes v 3. 2. 7a ( Ronquist &
                 从 GenBank 数据库下载已发表的玄参科及相                      Huelsenbeckꎬ 2003) 进 行 贝 叶 斯 推 断 分 析ꎬ 选 择
            关类群 107 属 129 个物种的质体( 包括叶绿体基                       GTR+GAMMA 模型ꎮ BI 分析的参数设置如下:采
            因组) 序 列 及 蛋 白 质 编 码 基 因 ( coding sequenceꎬ         用 MCMC ( Markov chain monte carlo) 算 法ꎬ 运 行
            CDS)(表 1)ꎮ 物种挑选的原则为隶属于广义玄参                         1 000 000代ꎬ每 1 000 代取样一次ꎬ开始的 25%样
            科的物种均包括在内ꎻ除此之外ꎬ参考已发表相关                             本作为老化样本( Burn ̄in samples) 舍弃ꎬ以剩余样
            文献下载了同隶属于唇形目相关科的部分物种ꎬ                              本构建主要规则一致树ꎬ并计算各分支的后验概
            包括木犀科( Oleaceae)、苦苣苔科( Gesneriaceae)、              率(posterior probabilityꎬ PP)ꎮ
            狸藻科、爵床科、胡麻科( Pedaliaceae)、马鞭草科、
            紫 葳 科、 唇 形 科 ( Lamiaceae )、 透 骨 草 科                2  结果与分析
            (Phrymaceae)和列当科等ꎬ其中木犀科不属于核
            心唇形目(core Lamiales)ꎬ而苦苣苔科据文献记载                     2.1 基因组大小
            与广义玄参科关系较远ꎬ因而这两个科虽然已发                                  我们共下载了 132 个物种的基因组序列( 包
            表的物种序列较多ꎬ而本研究中下载的物种数较                              括外类群)ꎬ其中 127 个为质体全基因组序列ꎬ5 个
            少ꎬ其余的科ꎬ下载的种属均较多ꎬ母草科、狸藻科                            为部分基因组序列ꎬ包括 Neobartsia inaequalis、裸
            等包括物种较少的原因为目前可获得已经公开发                              花 紫 珠 ( Callicarpa nudiflora )、 Calamphoreus
            表的种属数目较少ꎮ                                          inflatus、 Glycocystis beckeri 和 柳 穿 鱼 ( Linaria
                 选 择 夹 竹 桃 科 ( Apocynaceae ) 的 长 春 花           vulgaris)(表 1)ꎮ 由表 1 可知ꎬ这 5 个部分基因组
            ( Catharanthus roseusꎬ KC561139. 1 )、 龙 胆 科        序列中ꎬ柳穿鱼的基因组序列较短ꎬCDS 数目仅为
            (Gentianaceae)的蓝玉簪龙胆(Gentiana veitchiorumꎬ         13ꎬ其余 4 个物种的基因组序列较完整ꎬCDS 数目
            MG192310. 1 ) 及 茜 草 科 ( Rubiaceae ) 的 团 花          在 82 ~ 87 之间ꎮ 质体全基因组数据中ꎬ列当科的
            (Neolamarckia cadambaꎬMG572117.1) 共 3 个物种ꎬ         Conopholis americana CDS 数目最少为 21 个ꎬ紫葳
            作为外类群ꎮ 用 Excel 统计内类群所有物种的基因                        科的 Anemopaegma acutifolium 具有最多的 CDSꎬ其
            组信息ꎬ包括基因组大小及蛋白质编码基因数目ꎮ                             数目为 98ꎮ
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