Page 181 - 《广西植物》2023年第11期
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１１ 期 冯树慧等: 烟管头草的化学成分及其体外抗白血病活性研究 ２ １ ４ １
ｋｇ 浸膏ꎮ 取 １.０ ｇ 浸膏留样ꎬ其余浸膏加水搅拌使
１ 材料与仪器 之呈现悬浮状态ꎬ再用乙酸乙酯萃取ꎬ得到乙酸乙
酯层和水层ꎮ 将 ９６０.０ ｇ 乙酸乙酯萃取物用 ４０ ~ ８０
１.１ 材料 目粗硅胶拌样ꎬ待样品干燥后ꎬ运用 ３００ ~ ４００ 目的
药材:烟管头草药材于 ２０１６ 年 １０ 月在贵州省 硅胶柱层析ꎬ以石油醚－丙酮(６０ ∶ １→１ ∶ １)进行洗
安顺市镇宁县采集ꎬ由贵州中医药大学药学院孙 脱ꎬ洗脱部分用 ＴＬＣ 薄层板展开ꎬ在紫外分析仪下
庆 文 教 授 鉴 定 为 天 名 精 属 植 物 烟 管 头 草 观察 ＴＬＣ 薄层板荧光情况ꎬ并用 １０％硫酸乙醇溶液
(Ｃａｒｐｅｓｉｕｍ ｃｅｒｎｕｕｍ)ꎬ标本存放于贵州省安顺市人 显色ꎬ合并荧光及显色相似部分ꎬ用甲醇处理硅胶
民医院药学实验室ꎬ标本号为 Ａｓｓｒｍｙｙ２０１６０８ꎮ 柱ꎬ得到 ７ 个馏分(Ｆｒ.１~ Ｆｒ.７)ꎮ
细胞株:人白血病细胞(Ｋ５６２ 和 ＨＥＬ) 购买于 将第一馏分 Ｆｒ.１(６４.０ ｇ) 用粗硅胶拌样后上
ＡＴＣＣ 细胞库ꎬ存放于贵州省中国科学院天然产物 硅胶 柱 层 析ꎬ 采 用 石 油 醚 － 乙 酸 乙 酯 ( ６０ ∶ １ →
化学重点实验室李艳梅教授课题组ꎮ １ ∶ １)作为洗脱剂进行洗脱ꎬ得到 ４ 个馏分(Ｆｒ.１－
１.２ 实验仪器和试剂 １ ~ Ｆｒ.１－４)ꎮ Ｆｒ.１－１ 经硅胶柱层析ꎬ使用石油醚－
仪器:ＩＮＯＶＡ￣４００ ＭＨｚ 和 ＩＮＯＶＡ￣５００ ＭＨｚ 超 丙酮(６０ ∶ １→１０ ∶ １) 作为洗脱剂进行分离ꎬ并用
导核 磁 共 振 波 谱 仪 ( 美 国 Ｖａｒｉａｎ 公 司)ꎻ Ｂｒｕｋｅｒ 重结 晶 方 法 进 一 步 纯 化ꎬ 得 到 化 合 物 １１ ( １６. ５
ＨＣＴ / Ｅｓｑｕｉｒｅ 和 Ｗａｔｅｒｓ Ａｕｔｏｓｐｅｃ Ｐｒｅｍｉｅｒ Ｐ７７６ 质谱 ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.１－２ 用硅胶柱层析ꎬ以石油醚－乙酸乙酯
仪( 德 国 Ｂｒｕｋｅｒ 公 司ꎬ 美 国 Ｗａｔｅｒｓ 公 司)ꎻ Ｂｒｕｋｅｒ (３０ ∶ １ → １ ∶ １ ) 作 为 洗 脱 剂 进 行 分 离ꎬ 并 用
Ｔｅｎｓｏｒ￣２７ 傅里叶红外光谱仪( 德国 Ｂｒｕｋｅｒ 公司)ꎻ Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 柱层析ꎬ以甲醇作为洗脱剂进一步
Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＵＶ￣２４０１ＰＣ 紫外可见分光光度仪( 日本 纯化ꎬ得到化合物 ６(１２.４ ｍｇ)ꎮ
Ｓｈｉｍａｄｚｕ 公 司 )ꎻ ＪＡＳＣＯ Ｐ￣１０２０ 旋 光 仪 ( 日 本 将第四馏分 Ｆｒ.４(１０３.５ ｇ)用大孔吸附树脂柱
ＪＡＳＣＯ 公司)ꎻ Ｗａｔｅｒｓ １５２５ ＥＦ 高 效 液 相 色 谱 仪 层析ꎬ以甲醇－水(２０％、４０％、６０％、８０％、９５％) 作
(美国 Ｗａｔｅｒｓ 公司)ꎻ０ＳＢ￣２２００ 型旋转蒸发仪( 上 为洗 脱 剂 进 行 洗 脱ꎬ 得 到 ５ 个 馏 分 ( Ｆｒ. ４ － １ ~
海爱朗仪器有限公司)ꎻ倒置光学显微镜( Ｚｅｉｓｓ 公 Ｆｒ.４－５)ꎮ Ｆｒ.４－３ 经硅胶柱层析ꎬ用石油醚－丙酮
司)ꎻ台式高速冷冻离心机( Ｂａｃｋｍａｎ 公司)ꎻ可调 (１５ ∶ １→３ ∶ １) 进 行 梯 度 洗 脱ꎬ 得 到 ３ 个 馏 分
微 量 移 液 器 ( Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ 公 司 )ꎻ 细 胞 培 养 箱 (Ｆｒ.４－３－１ ~ Ｆｒ.４－ ３ － ３)ꎮ Ｆｒ.４ － ３ － ２ 用硅胶柱层
(Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｆｏｒｍａ 公 司)ꎻ 多 功 能 酶 标 仪 析ꎬ以石油醚－丙酮(１０ ∶ １→３ ∶ １) 作溶剂系统进
(Ｇｅｎｅ 公司)ꎮ 行分离ꎬ得到化合物 １(２.０ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４－４ 经硅胶柱
试剂:Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 葡聚糖凝胶( 日本三菱 层析ꎬ以石油醚－丙酮(８ ∶ １→１ ∶ １)作为洗脱剂进
化学公司)ꎻ柱层析硅胶(３００ ~ ４００ 目ꎬ青岛海洋化 行洗脱ꎬ得到 ５ 个馏分( Ｆｒ.４ － ４ － １ ~ Ｆｒ.４ － ４ － ５)ꎮ
工厂)ꎻ硅胶 ＧＦ 薄层板(青岛海洋化工厂)ꎻ高效 Ｆｒ.４－４－２ 经 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 柱层析ꎬ以氯仿－甲醇
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液相所用的乙腈、甲醇为色谱纯( 萨恩化学技术有 (１ ∶ １)作为洗脱剂进行分离ꎬ得到 ６ 个馏分( Ｆｒ.４
限公司)ꎻ丙酮、氯仿等为分析纯( 重庆川东化工集 －４－２－１ ~ Ｆｒ.４－４－２－６)ꎮ Ｆｒ.４－４－２－３ 经硅胶( 石
团有限公司)ꎻ二甲基亚砜( ＤＭＳＯꎬ生工生物工程 油醚 ∶ 丙 酮 ＝ １０ ∶ １ →３ ∶ １) 和 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ － ２０
(上海)股份有限公司)ꎻ噻唑蓝( ＭＴＴꎬ北京索莱宝 (ＣＨＣｌ ∶ ＭｅＯＨ ＝ １ ∶ １) 反复柱层析ꎬ得到化合物 ５
３
科技有限公司)ꎻ胎牛血清( ＦＢＳꎬＨｙＣｌｏｎｅ 公司)ꎻ (５.０ ｍｇ)、７(６.０ ｍｇ)和 １０(４.５ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４－４－２－４
细胞培养基 ＲＰＭＩ １６４０(Ｇｉｂｃｏ 公司)ꎮ 经硅胶(石油醚 ∶ 丙酮 ＝ １０ ∶ １→３ ∶ １) 和 Ｓｅｐｈａｄｅｘ
ＬＨ￣２０(ＭｅＯＨ)反复柱层析ꎬ并用制备高效液相色谱
２ 实验方法 (ＣＨ ＣＮ ∶ Ｈ Ｏ ＝ ４０％ ∶ ６０％) 纯化ꎬ得到化合物 ２
２
３
(１０.６ ｍｇ)、３(６.５ ｍｇ)和 ４(４.０ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.４－５ 经硅胶
２.１ 提取与分离 柱层析ꎬ以石油醚－乙酸乙酯(１０ ∶ １→１ ∶ １)梯度洗
称取 ２０.０ ｋｇ 干燥的烟管头草全草ꎬ粉碎后用 脱ꎬ得到 ５ 个馏分(Ｆｒ.４－５－１~ Ｆｒ.４－５－５)ꎮ Ｆｒ.４－５－
９５％乙醇在 ８０ ℃下加热回流提取 ３ 次(每 ３ 小时 １ １ 经硅胶柱层析ꎬ以石油醚－丙酮(１０ ∶ １→１ ∶ １)进
次)ꎬ将所有提取液合并后浓缩ꎬ回收乙醇ꎬ得到 ２.０ 行分离ꎬ得到化合物 ８(３.５ ｍｇ)和 ９(２.０ ｍｇ)ꎮ
