Page 78 - 《广西植物》2024年第10期

１ ８ ８ ０ 广 西 植 物 ４４ 卷
落数量 减 少 或 消 失 ( 邹 淑 华 等ꎬ２０１９)ꎮ 姚 雨 轩 ２~３ 个月幼苗ꎬ试验土壤选自贵州医科大学南校区
(２０２２) 研 究 指 出ꎬ重 金 属 污 染 水 平 是 影 响 刺 槐 农用土壤ꎬ基本理化性质为 ｐＨ ＝ ７.５４ꎬ速效氮 ４.１５
(Ｒｏｂｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏａｃａｃｉａ) 内生菌群落组成差异的关 ｍｇｋｇ ꎬ有机磷 ０.７４ ｍｇｋｇ ꎬ速效钾 ８７.４０ ｍｇ
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键因子之一ꎬ随着重金属含量增加ꎬ内生菌群落多 ｋｇ ꎬ有机质 １. ３１ ｍｇ ｋｇ ꎬ土壤 Ｃｄ 的背景值为
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样性(Ｓｈａｎｎｏｎ 指数)降低ꎬ而丰富度(Ｃｈａｏ１ 指数) ０.０３１ ｍｇｋｇ ꎮ 本试验采用盆栽培养ꎬ设置两个处
增加ꎬ同时ꎬ内生菌共现网络模块的平均度、聚类 理 [无 Ｃｄ 处理组(Ｃｄ０ꎬ种植土壤无外源 Ｃｄ 添加)
系数、网络节点密度和连接边数均随重金属含量 和 Ｃｄ 处理组( Ｃｄ２ꎬ种植土壤 Ｃｄ 添加浓度为 ２.０
增 加 而 减 少ꎮ Ｃｕ￣Ｃｄ 矿 区 和 良 田 蓖 麻 ( Ｒｉｃｉｎｕｓ ｍｇｋｇ )]ꎬ每个处理组 ６ 个重复ꎬ每盆分装 ５ ｋｇ 试
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ｃｏｍｍｕｎｉｓ)内生细菌群落多样性和丰富度研究结果 验土ꎬ种植大小一致的幼苗一株ꎬ共 １２ 株ꎮ
表明ꎬ无 Ｃｄ 区蓖麻内生细菌群落的多样性和丰富 １.２ 样本采集
度均大于 Ｃｄ 污染区( Ｌｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２３)ꎮ 在邹淑华 盆栽培养 １７０ ｄ 后ꎬ每处理组各采收 ３ 株生长
等(２０１９)研究中ꎬ耐 Ｃｄ 型( ＨＥ) 东南景天( Ｓｅｄｕｍ 健康的艾纳香( 无菌斑、虫咬缺口和机械损伤) 植
ａｌｆｒｅｄｉｉ)叶 片 内 生 细 菌 的 丰 富 度 在 Ｃｄ ( 未 添 加 株连同土壤一并带回实验室ꎬ用软毛刷收集植物
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Ｃｄ)土壤上最大ꎬ而茎和根系内生细菌的丰富度在 根际土壤ꎬ并保存于－ ８０ ℃ ꎮ 用自来水冲洗艾纳
￣１ 香植株完毕后ꎬ室温晾干ꎬ并将根、茎、叶分别称其
Ｃｄ (土壤 Ｃｄ 添加水平为 ５ ｍｇｋｇ )土壤上最大ꎮ
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另外ꎬ器官内生菌共发生网络结构受重金属的积 鲜重ꎮ 一部分根、茎、叶样品烘干至恒重、磨碎、过
累量影响ꎬ如刺槐根中因积累了大量的 Ｃｄ ꎬ导致 ６０ 目尼龙筛ꎬ储存于干燥器中用于各器官 Ｃｄ 含量
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其根部共发生网络结构较地上部简单( 姚雨轩ꎬ 测定ꎻ一 部 分 样 品 进 行 表 面 消 毒 后 用 于 内 生 菌
２０２２)ꎮ 但在不同 Ｚｎ 污染水平上ꎬ东南景天茎和 ＤＮＡ 提取ꎮ
叶不仅积累大量的 Ｚｎꎬ而且其内生菌丰富度大多 １.３ 植株和土壤样品的化学分析
高于根部(陆丽婷ꎬ２０１８)ꎮ 参考陈子涵等(２０２２) 的方法ꎬ分别称取 ０.１ ｇ
艾纳香( Ｂｌｕｍｅａ ｂａｌｓａｍｉｆｅｒａ) 是贵州省道地药 植物样品( 根、茎、叶) 及土样ꎬ加入 ７ ｍＬ ＨＮＯ －
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材ꎬ可用于治疗鼻窦炎、绞痛、咳嗽、肾结石、流感 Ｈ Ｏ (体积比 Ｖ ∶ Ｖ ＝ ５ ∶ ２) 酸泡过夜ꎬ再置于电热
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等疾病(Ｗｉｄｈｉａｎｔａｒａ ＆ Ｊａｗｉꎬ ２０２１)ꎮ 艾纳香对 Ｃｄ 板上 １５０ ℃ 消解ꎬ消解至体积不足 １ ｍＬ(呈澄清或
具有富集作用ꎬ富集系数为 ２.５ ~ １５.８ꎬ各器官 Ｃｄ 淡黄色)ꎬ冷却、定容ꎬ用石墨炉原子吸收光谱仪
积累量表现为叶>茎>根(梁娟等ꎬ２０１６ꎻ陈子涵等ꎬ (ｃｏｎｔｒＡＡ ７００) 测定 Ｃｄ 含量ꎬ进而计算各器官 Ｃｄ
２０２２)ꎬ由于定殖于植物器官、组织中与植物生长、 质量分数ꎮ 根际土壤 Ｃｄ 的测定参考«土壤环境质
生理 密 切 相 关 的 内 生 菌 通 常 具 有 耐 重 金 属 性 量标准»(夏家淇等ꎬ１９９５)ꎮ 根据公式(１)、(２) 计
(Ｍｕｆｔｉ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５)ꎬ因此有必要探究不同器官 Ｃｄ 算转移系数和富集系数ꎮ
积累量对其内生菌群落结构的影响ꎬ为从内生菌 富集系数 ＝ 艾纳香体内 Ｃｄ 含量 / 土壤中 Ｃｄ 含量
角度探讨不同器官耐 Ｃｄ 差异性提供新思路ꎮ 因 (１)

此ꎬ本研究设置了 ２ 个不同实验组( Ｃｄ０ 和 Ｃｄ２)ꎬ 转移系数 ＝ 艾纳香地上部 Ｃｄ 含量 / 根部 Ｃｄ 含量
利用 １６Ｓ ｒＲＮＡ 基因高通量测序技术进行艾纳香 (２)
根、茎、叶内生菌群落组成分析ꎬ并结合内生菌分 １.４ 样本表面消毒
子生态网络分析ꎬ以了解 Ｃｄ 积累对内生菌群落结 将采 集 的 根、 茎、 叶 样 品 剪 成 大 段 ( 长 约 ５
构特征变化的影响ꎬ以及与器官 Ｃｄ 积累密切相关 ｃｍ)ꎬ无菌水彻底清洗后ꎬ先用 ７５％酒精表面消毒
的内生细菌种类ꎬ为今后开发利用功能内生菌治 (根 １ ｍｉｎ、茎和叶 １０ ｓ)ꎬ无菌蒸馏水漂洗 １ 次ꎬ再

理 Ｃｄ 污染土壤提供科学依据ꎮ 用 １.０％ ＮａＣｌＯ 消毒 ３ ｍｉｎꎬ然后用无菌水清洗 ３
次ꎬ收集最后 １ 次无菌水冲洗液ꎬ吸取 １００ μＬ 涂布
１ 材料与方法 至 ＬＢ 培养基( 胰蛋白胨 １０ ｇＬ ꎬ酵母提取物 ５
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ｇＬ ꎬ氯化钠 １０ ｇＬ ꎬ琼脂 １５ｇＬ ) 平板恒温
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１.１ 艾纳香植株培育 (２８ ℃ )培养 ２ ~ ３ ｄꎬ以检查组织表面消毒是否彻
试验幼苗选自贵州省罗甸县艾纳香种植基地 底ꎮ 将表面消毒彻底的样本转移到无菌研钵中ꎬ