Page 135 - 《广西植物》2024年第2期

２ 期 李竹梅等: 花魔芋软腐病原真菌分离鉴定 ３ ３ ７

率的统计ꎮ 从魔芋软腐病株中分离得到的轮纹镰
刀菌出现的频率最高ꎬ其相对丰度为 ４５.４５％ꎻ菌株
粉红螺旋聚孢霉和单孢根霉出现的频率较高ꎬ其相
对丰度为 １３.６４％ꎻ菌株 Ｆｕｓａｒｉｕｍ ａｍｂｒｏｓｉｕｍ 和拜尼
尔毛霉出现的频率较低ꎬ其相对丰度为 ９.０９％ꎻ菌株
尖孢镰刀菌和氯氮卓青霉出现的频率最低ꎬ其相对
丰度为 ４.５５％ꎬ由此可以推断ꎬ轮纹镰刀菌是魔芋软

腐病致病菌的概率最大(表 ３)ꎮ
２.３ 柯赫氏法则检测
将鉴定出的 ７ 个菌株直径 ０.５ ｃｍ 的菌饼接种

在健康的魔芋球茎切片上ꎬ２８ ℃ 保湿培养 ３ ｄ 后ꎬ
接种轮纹镰刀菌菌饼的球茎切片可以闻到明显的
臭味ꎬ并且接菌处附近均出现了明显的发黑软腐
症状且面积不断扩大ꎬ此现象与魔芋软腐病的发
病症状相同ꎬ而空白对照处无发病的症状ꎮ 从接
种发病的魔芋球茎上又可以重新分离到接种菌
株ꎬ因此可以确定该菌株可能是魔芋软腐病的致
Ａ. 整株软腐病症状ꎻ Ｂ. 茎秆软腐症状ꎻ Ｃ. 球茎软腐早期 病真菌(图 ５)ꎮ 同时接种轮纹镰刀菌和胡萝卜果
症状ꎻ Ｄ. 球茎、茎秆基部软腐晚期症状ꎮ
胶杆菌(Ｆ＋Ｐ) 处理软腐组织重量显著高于单接种
Ａ. Ｓｏｆｔ ｒｏｔ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｏｆ ｗｈｏｌｅ ｐｌａｎｔꎻ Ｂ. Ｓｏｆｔ ｒｏｔ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｏｆ ｓｔｅｍꎻ
处理(Ｆ 和 Ｐ)处理ꎬ说明在野外环境中魔芋软腐病
Ｃ. Ｓｏｆｔ ｒｏｔ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｏｆ ｃｏｒｍ ｉｎ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ ｐｅｒｉｏｄꎻ Ｄ. Ｓｏｆｔ ｒｏｔ
ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｏｆ ｓｔｅｍ ａｎｄ ｃｏｒｍ ｉｎ ｌａｔｅｒ ｐｅｒｉｏｄ. 可能是由真菌和细菌复合侵染引起的ꎻ病原细菌
图 １ 花魔芋软腐病症状图 胡萝卜果胶杆菌在相同条件下致病性高于轮纹镰
Ｆｉｇ. １ Ｓｏｆｔ ｒｏｔ ｃｈａｒａｃｔｅｒ ｏｆ Ａｍｏｒｐｈｏｐｈａｌｌｕｓ ｋｏｎｊａｃ 刀菌(图 ６)ꎮ

和 ９９.２３％且支持度为 １００％ꎬ可认为它们是同一物 ３ 讨论与结论
种ꎻＭ２１ 的 ＩＴＳ 和 ＬＳＵ 基因序列与拜尼尔毛霉菌株
的相似 度 分 别 是 ９１. ３９％ 和 ９９. ２０％ 且 支 持 度 为 植物病害病原种类的确定ꎬ对于防治植物病
１００％ꎬ因此 Ｍ２１ 应该是毛霉属真菌ꎮ Ｍ１８ 和 Ｍ２３ 害起着关键性作用ꎮ 本研究对花魔芋病样球茎进
的 ＩＴＳ 和 ＬＳＵ 基 因 序 列 与 单 孢 根 霉 ( Ｒｈｉｚｏｐｕｓ 行分离、纯化ꎬ获得 ２２ 株真菌ꎬ根据形态特征结合
ａｚｙｇｏｓｐｏｒｕｓ) 的模式菌株相似度大于 ９８％且支持度 分子生物学手段ꎬ共鉴定出 ７ 种真菌ꎬ其中镰刀菌
为 ９７％ꎬ可认为 Ｍ１８ 和 Ｍ２３ 与单孢根霉是同一菌 有轮纹镰刀菌、尖孢镰刀菌和 Ｆ. ａｍｂｒｏｓｉｕｍ ３ 种ꎬ
种ꎻＭ２０ 的 ＩＴＳ 和 ＬＳＵ 基因序列与单孢根霉菌株的 毛霉属真菌、根霉属真菌单孢根霉、青霉属真菌

相似度分别是 ９８.８９％和 ８５.８５％且支持率为 １００％ꎬ (Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ.)和粉红螺旋聚孢霉各 １ 种ꎮ 根据
可认为 Ｍ２０ 是根霉属真菌ꎮ Ｍ２４ 在 ＮＣＢＩ 数据库中 柯赫氏法则检测本研究发现轮纹镰刀菌具有致病
的 ＩＴＳ 和 ＬＳＵ 基因序列与氯氮卓青霉( Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ 性ꎬ推断轮纹镰刀菌可能是云南曲靖市地区魔芋

ｓｏｌｉｔｕｍ)菌株的相似度是 ９１.８０％且支持率为 ９６％ꎬ 软腐病 原 真 菌ꎮ 据 报 道 轮 纹 镰 刀 菌 也 是 辣 椒
可认为 Ｍ２４ 是青霉属真菌(Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ.)ꎮ (Ｃａｐｓｉｃｕｍ ａｎｎｕｕｍ ) 果 实 软 腐 病 ( Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ
综上所述ꎬ结合形态鉴定结果共鉴定出轮纹镰 ２０１３)、玉米( Ｚｅａ ｍａｙｓ) 穗腐病( Ｄｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ２０２０)、
刀菌、尖孢镰刀菌和 Ｆｕｓａｒｉｕｍ ａｍｂｒｏｓｉｕｍ ３ 种ꎬ占总 罗汉 松 ( Ｐｏｄｏｃａｒｐｕｓ ｍａｃｒｏｐｈｙｌｌｕｓ) 萎 蔫 病 ( Ｑｉｎ ｅｔ

分离真菌种类的 ４３.８６％ꎻ毛霉属真菌拜尼尔毛霉、 ａｌ.ꎬ２０２１) 和 玫 瑰 茄 ( Ｈｉｂｉｓｃｕｓ ｓａｂｄａｒｉｆｆａ) 果 斑 病
单孢根霉、青霉属真菌(Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ.) 和粉红螺旋 (Ｒａｈｉｍ ｅｔ ａｌ.ꎬ２０２０) 的病原真菌ꎮ 云南地区魔芋
聚孢霉各 １ 种ꎬ各占总分离真菌种类的 １４.２９％ꎮ 大田规模化栽培往往与玉米套种ꎬ这可能会增加
根据鉴定结果ꎬ对不同种类菌株进行了分离频 魔芋真菌性软腐病和玉米穗腐病的风险ꎮ 何斐等