Page 163 - 《广西植物》2024年第5期
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Ｇｕｉｈａｉａ Ｍａｙ ２０２４ꎬ ４４(５): ９５１－９６０
ＤＯＩ: １０.１１９３１/ ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２３０３０５４
闫海锋ꎬ 吕金凤ꎬ 熊发前ꎬ 等ꎬ ２０２４. 檀香 ＮＤＨ 脱氢酶基因的克隆、定位与启动子分析 [Ｊ]. 广西植物ꎬ ４４(５): ９５１－９６０.
ＹＡＮ ＨＦꎬ ＬÜ ＪＦꎬ ＸＩＯＮＧ ＦＱꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２４. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇꎬ ｌｏｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＮＤＨ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｇｅｎｅ ｆｒｏｍ
Ｓａｎｔａｌｕｍ ａｌｂｕｍ [Ｊ]. Ｇｕｉｈａｉａꎬ ４４(５): ９５１－９６０.
檀香 ＮＤＨ 脱氢酶基因的克隆、定位与启动子分析
闫海锋 １ꎬ２ꎬ３ ꎬ 吕金凤 ꎬ 熊发前 １ꎬ２ꎬ３ ꎬ 丘立杭 １ꎬ２ꎬ３ ꎬ 周慧文 １ꎬ２ꎬ３ ꎬ 陈兴隆 ꎬ 马国华 ６∗
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( １. 广西壮族自治区农业科学院 甘蔗研究所ꎬ 南宁 ５３０００７ꎻ ２. 农业农村部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室ꎬ 南宁 ５３０００７ꎻ
３. 广西甘蔗遗传改良重点实验室ꎬ 南宁 ５３０００７ꎻ ４. 广西林业集团桂钦林浆纸有限公司ꎬ 南宁 ５３００１２ꎻ
５. 广西大学 农学院ꎬ 南宁 ５３０００４ꎻ ６. 中国科学院华南植物园ꎬ 广州 ５１０６５０ )
摘 要: 为研究檀香 ＮＤＨ 脱氢酶基因的功能和调控机制ꎬ该文以檀香心材为材料ꎬ利用 ＲＡＣＥ 技术克隆
ＳａＮＤＨ６ 基因的全长序列ꎬ利用实时荧光定量 ＰＣＲ(ＲＴ￣ｑＰＣＲ) 技术分析其组织和激素处理后的表达模式ꎬ
在拟南芥原生质体观测其亚细胞定位ꎬ利用 ＰｌａｎｔＣＡＲＥ 分析 ＳａＮＤＨ６ 起始密码子 ＡＴＧ 上游 ２ ｋｂ 的启动子
序列ꎬ同时运用 ＰｌａｎｔＲｅｇＭａｐ 预测可能与其结合的转录因子ꎮ 结果表明:(１)ＳａＮＤＨ６ 编码 ３０３ 个氨基酸ꎬ为
疏水蛋白ꎬ亚细胞定位于叶绿体ꎮ (２) 进化树分析表明ꎬ檀香 ＳａＮＤＨ６ 与木本植物 ＮＤＨ６ 进化关系较近ꎮ
(３)ＰｌａｎｔＣＡＲＥ 分析发现ꎬＳａＮＤＨ６ 启动子中除含有 ＡＣＥ、ＡＥ￣ｂｏｘ、Ｂｏｘ ４、Ｇ￣Ｂｏｘ 和 ＧＴ１￣ｍｏｔｉｆ 等大量光响应元
件外ꎬ同时还有茉莉酸甲酯(ＭｅＪＡ)反应元件 ＣＧＴＣＡ￣ｍｏｔｉｆ 和 ＴＧＡＣＧ￣ｍｏｔｉｆꎬ赤霉素(ＧＡ )响应元件 Ｐ￣ｂｏｘꎬ以
３
及防御和胁迫响应元件 ＴＣ￣ｒｉｃｈ ｒｅｐｅａｔｓ 等ꎮ (４)ＰｌａｎｔＲｅｇＭａｐ 分析发现ꎬ有 ７６ 个转录因子可能与 ＳａＮＤＨ６ 启
动子结合ꎬ其中 ＥＲＦ 家族最多ꎬ达 ４０ 个ꎮ (５)ＳａＮＤＨ６ 在檀香的根、心材、叶片和愈伤组织中均有表达ꎬ其中
￣４ ￣１
在叶片中的表达量较高ꎻ用 １×１０ ｍｏｌＬ 的 ＭｅＪＡ 和 ＧＡ 分别处理檀香愈伤组织后ꎬ与处理前(０ ｈ)相比ꎬ
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ＳａＮＤＨ６ 的表达均在 ３ ｈ 后显著升高ꎮ 综上结果表明ꎬ檀香 ＳａＮＤＨ６ 为核基因编码的蛋白ꎬ受光和激素等诱
导表达ꎬＳａＮＤＨ６ 可能参与檀香逆境胁迫反应的过程ꎮ
关键词: 檀香ꎬ 叶绿体ꎬ ＮＤＨ 脱氢酶ꎬ 亚细胞定位ꎬ 表达调控
中图分类号: Ｑ９４３ 文献标识码: Ａ 文章编号: １０００￣３１４２(２０２４)０５￣０９５１￣１０
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇꎬ ｌｏｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ
ＮＤＨ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｇｅｎｅ ｆｒｏｍ Ｓａｎｔａｌｕｍ ａｌｂｕｍ
１ꎬ２ꎬ３ ４ １ꎬ２ꎬ３ １ꎬ２ꎬ３
ＹＡＮ Ｈａｉｆｅｎｇ ꎬ ＬÜ Ｊｉｎｆｅｎｇ ꎬ ＸＩＯＮＧ Ｆａｑｉａｎ ꎬ ＱＩＵ Ｌｉｈａｎｇ ꎬ
１ꎬ２ꎬ３ ５ ６∗
ＺＨＯＵ Ｈｕｉｗｅｎ ꎬ ＣＨＥＮ Ｘｉｎｇｌｏｎｇ ꎬ ＭＡ Ｇｕｏｈｕａ
收稿日期: ２０２３－０７－２７ 接受日期: ２０２３－０８－２５
基金项目: 国家自然科学基金(３２０６０３５８)ꎻ 广东省重点科技项目(２０１５Ｂ０２０２３１００８)ꎻ 广西自然科学基金(２０１９ＧＸＮＳＦＡＡ１８５００５)ꎮ
第一作者: 闫海锋(１９８０—)ꎬ博士ꎬ副研究员ꎬ主要从事林木分子生物学研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｇｓｔｓｙｈｆ＠ １６３.ｃｏｍꎮ
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通信作者: 马国华ꎬ博士ꎬ研究员ꎬ主要从事植物生物技术研究ꎬ(Ｅ￣ｍａｉｌ)ｍａｇｈ＠ｓｃｉｂ.ａｃ.ｃｎꎮ
