Page 59 - 《广西植物》2025年第10期
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１０ 期 李晶等: 羊开口化学成分及其抑制一氧化氮生成活性的研究 １ ７ ８ ９
活性ꎬ拟探讨以下问题:(１) 羊开口还存在哪些结 组分 Ｆｒ.１ － Ｆｒ. １１ꎮ Ｆｒ. １ (４０. ０ ｇ) 以 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ
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构独特的成分ꎻ(２) 这些成分是否具有抗炎活性ꎮ (０ ∶ １００→ １００ ∶ ０ꎬ Ｖ/ Ｖ ) 为 洗 脱 剂 进 行 Ｄｉａｉｏｎ
本研究以期进一步揭示羊开口的药效物质基础ꎬ ＨＰ２０ＳＳ 柱层析ꎬ合并相同的组分并减压浓缩得到 ９
为后续抗炎药的研发提供科学依据ꎮ 个组分 Ｆｒ.１.１－Ｆｒ.１.９ꎮ 以 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (１０ ∶ ９０→
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２０ ∶ ８０ꎬＶ/ Ｖ) 为流动相ꎬ用反相半制备 ＨＰＬＣ 色谱
１ 材料与方法 对 Ｆｒ.１.３ (１.５ ｇ)进行分离得到化合物 １３ (ｔ ＝ １２.５
Ｒ
ｍｉｎꎬ２.２ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.１.５ (１２.２ ｇ)上反相 Ｃ 色谱柱ꎬ以
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１.１ 药材来源 洗脱剂 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ ( ０ ∶ １００→４０ ∶ ６０ꎬＶ/ Ｖ) 进行
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样品于 ２０２２ 年 ９ 月采自广西桂林市雁山镇ꎬ 洗脱ꎬ分离得到化合物 ２ (５.６ ｍｇ)、４ (６.１ ｍｇ)、
经黄俞 淞 研 究 员 鉴 定 为 展 毛 野 牡 丹 ( Ｍｅｌａｓｔｏｍａ ７ (１６.３ ｍｇ)ꎮ 以 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (０ ∶ １００→１００ ∶ ０ꎬ
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ｎｏｒｍａｌｅ)的根ꎬ标本( 编号:２０２２０９１２) 保存于广西 Ｖ/ Ｖ)为洗脱剂对 Ｆｒ.２(６２.０ ｇ) 部分进行 Ｓｅｐｈａｄｅｘ
植物研究所天然产物研究中心ꎮ ＬＨ￣２０ 柱(１０ ｃｍ × ４０ ｃｍ) 层析ꎬ合并得到 １０ 个组
１.２ 实验仪器及试剂 分 Ｆｒ.２.１－Ｆｒ.２.１０ꎮ 对 Ｆｒ.２.７ (１０.０ ｇ) 上反相硅胶
ＡｖａｎｃｅⅢ ＨＤ￣５００ ＭＨｚ 核磁共振仪(德国布鲁 柱层析ꎬ用洗脱剂 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (０ ∶ １００→５０ ∶ ５０ꎬ
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克公司)ꎻＬＣ￣ＭＳ / ＩＴ￣ＴＯＦ 液相色谱 －质谱仪( 日本 Ｖ/ Ｖ)进行洗脱ꎬ随后上 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 层析柱ꎬ用
岛津公司)ꎻ半制备液相色谱仪 [ 赛谱锐思( 北京) 洗脱剂ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (１０ ∶ ９０→６０ ∶ ４０ꎬＶ/ Ｖ)进行洗
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科技有限公司]ꎻ ＭＣＯ￣１５ＡＣ ＣＯ 培养箱 ( 日本三 脱ꎬ分离得到化合物 １ (７.６ ｍｇ)、３ (６.０ ｍｇ)、５ (６.４
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洋公司)ꎻＳｐａｒｋ 多功能微孔板检测仪 ( 瑞士 Ｔｅｃａｎ ｍｇ)、１１ (５.４ ｍｇ)、１４ (５.８ ｍｇ)ꎻ对 Ｆｒ.２.９ (７.８ ｇ)
公司)ꎻ Ａｇｉｌｅｎｔ Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ￣Ｃ 色 谱 柱 ( ５ μｍꎬ ９. ４ 上硅胶柱层析ꎬ用洗脱剂 ＣＨ Ｃｌ ￣ＣＨ ＯＨ (１００ ∶ ０→
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ｍｍ × ２５０ ｍｍꎬ流速 ２ ｍＬｍｉｎ ꎬ美国 Ａｇｉｌｅｎｔ 公 ５０ ∶ ５０ꎬＶ/ Ｖ) 进行洗脱ꎬ随后上 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 层
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司)ꎻＡｇｉｌｅｎｔ Ｚｏｒｂａｘ ＳＢ￣Ｃ 色谱柱(５ μｍꎬ ４.６ ｍｍ × 析柱ꎬ用洗脱剂 ＣＨ Ｃｌ ￣ＣＨ ＯＨ(５０ ∶ ５０ꎬＶ/ Ｖ) 进行
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２５０ ｍｍꎬ流速 ０.８ ｍＬｍｉｎ ꎬ美国 Ａｇｉｌｅｎｔ 公司)ꎻ 洗脱ꎬ分离得到化合物 １５ (４.２ ｍｇ)、１６ (５.４ ｍｇ)、
Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０(２５ ~ １００ μｍꎻ瑞士ꎬＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ １７ (４.３ ｍｇ)、１８ (５.４ ｍｇ)ꎮ
Ｂｉｏ￣Ｓｃｉｅｎｃｅ ＡＢ 公 司)ꎻ ＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ ２０Ｐ、 Ｄｉａｉｏｎ 取石油醚萃取部分(２００ ｇ) 上 ＭＣＩ 层析柱ꎬ用
ＨＰ２０ＳＳ(日本三菱化学公司)ꎻＯＤＳ Ｃ (５０ μｍꎬ 德 洗脱剂 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (０ ∶ １００→１００ ∶ ０ꎬ Ｖ / Ｖ)进行
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国默 克 公 司)ꎻ Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ￣４０Ｆ ( 日 本 Ｔｏｓｏｈ 公 洗脱ꎬ合并得到 １３ 个组分 Ｆｒ. ＰＥ１ － Ｆｒ. ＰＥ１３ꎮ 取
司)ꎻ柱层析硅胶和薄层层析硅胶( 青岛海洋化工 Ｆｒ.ＰＥ ６ (１５.３ ｇ) 过反相 Ｃ (６ ｃｍ × ２５ ｃｍ) 柱层
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分厂)ꎻ石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、正丁 析ꎬ用洗脱剂 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (０ ∶ １００→１００ ∶ ０ꎬＶ /
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醇、甲醇试剂均为分析纯( 西陇科学股份有限公 Ｖ)进行洗脱ꎬ合并得到 １６ 个组分 Ｆｒ. ＰＥ６. １ － Ｆｒ.
司)ꎮ ＬＰＳ(北京索莱宝生物科技公司)ꎻＤＭＥＭ 培 ＰＥ６.１６ꎮ 对 Ｆｒ. ＰＥ６. ３ ( １. ５４ ｇ) 上 ＨＰ２０ＳＳ 层 析
养基、ＰＢＳ(美国 Ｈｙｃｌｏｎｅ 公司)ꎻ一氧化氮( ＮＯ) 测 柱ꎬ用洗脱剂 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ(０ ∶ １００→７０ ∶ ３０ꎬＶ / Ｖ)
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定试剂盒( 南京建成生物工程研究所)ꎻ胎牛血清 进行洗脱ꎬ随后上 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 层析柱ꎬ用洗脱
(ＦＢＳ)(美国 Ｇｉｂｃｏ 公司)ꎻＭＴＴ 试剂、阳性对照药 剂 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (０ ∶ １００→５０ ∶ ５０ꎬＶ / Ｖ ) 进行洗
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物地塞米松、胰蛋白酶 (美国 Ｓｉｇｍａ 公司)ꎮ 脱ꎬ分离得到化合物 ６ (７.０ ｍｇ)、１０ (１６.０ ｍｇ)、１２
１.３ 实验方法 (５. １ ｍｇ)ꎻ 对 Ｆｒ. ＰＥ ６. ５ ( ３. ３ ｇ) 上 Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ
１.３.１ 提取与分离 将 ９ ｋｇ 干样品粉碎后用工业酒 ＨＷ￣４０Ｆ层析柱ꎬ用洗脱剂 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (０ ∶ １００→
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精室温提取 ３ 次ꎬ每次 ７ ｄꎬ所得滤液在 ４５ ℃水温下 ７０ ∶ ３０ꎬＶ / Ｖ)进行洗脱ꎬ分离得到化合物 ８ (１８.１
减压浓缩得 ５６０.０ ｇ 浸膏ꎮ 将浸膏分散于 ２ Ｌ 热水 ｍｇ)、 ９ ( ４０. ３ ｍｇ)ꎻ 对 Ｆｒ. ＰＥ ６. ６ ( １. ５４ ｇ) 上
中ꎬ依次用石油醚和乙酸乙酯萃取 ３ 次ꎬ减压浓缩得 Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ Ｂｕｔｙｌ￣６５０Ｃ 层 析 柱ꎬ 用 洗 脱 剂
到石油醚、乙酸乙酯、水共三部分萃取物ꎮ 水部分萃 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ(０ ∶ １００→７０ ∶ ３０ꎬＶ / Ｖ) 进行洗脱ꎬ分
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取物(２０５.２ ｇ)用凝胶 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 柱 (１０ ｃｍ × 离得到化合物 １９ (２９.５ ｍｇ)ꎮ
４０ ｃｍ)分离ꎬ以 ＣＨ ＯＨ￣Ｈ Ｏ (０ ∶ １００→１００ ∶ ０ꎬ １.３. ２ 化 合 物 酸 水 解 实 验 参 考 Ｔａｋａｓｈｉｅｔ 等
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Ｖ / Ｖ)为洗脱剂ꎬ合并相同的馏分后浓缩得到 １１ 个 (２００７)的方法确定化合物中糖的绝对构型ꎬ简要
