Page 83 - 《广西植物》2025年第10期

１０ 期 周徐子鑫等: 基于转录组解析干燥压制玫瑰‘卡罗拉’花色变化的机理 １ ８ １ ３

硫 酸 铜 溶 液 热 处 理 ( 鲍 文 敏ꎬ ２０１６)ꎻ 将 彩 叶 草 响忽略不计)ꎬ在室温 ２３ ~ ２５ ℃ 条件下密封干燥压
(Ｐｌｅｃｔｒａｎｔｈｕｓ ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉｏｉｄｅ) 浸泡在 ０.０１％酒石酸 ＋ 制(图 １:Ｂ)ꎮ 经过 ２４ ｈ 后ꎬ从压花器中随机抽取 １０
１％麦芽糖＋０.０１ ｍｏｌＬ Ｚｎ 的保色剂中 ２ ｈꎬ随 片花瓣ꎬ并命名样本组为 Ｄ２ꎮ 剩余 １０ 片花瓣继续
￣１
２＋
后使用微波干燥法进行干燥ꎬ能够有效提高彩叶 干燥压制 ２４ ｈ 后取出ꎬ将样本组命名为 Ｄ３ꎬ并使用
草的保色效果(张晶晶ꎬ２０２１)ꎻ除了化学和物理保 液氮将样品速冻后保存于－８０ ℃中ꎮ 转录组测序与
色法以外ꎬ使用炭疽菌( Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｓｐ. Ⅲ) 的发 分析委托武汉康测科技有限公司进行ꎮ
酵液 处 理 ‘ 世 纪 红 非 洲 菊 ’ ( Ｇｅｒｂｅｒａ ｊａｍｅｓｏｎｉｉ １.２ 文库构建、注释与基因表达分析
‘ｃｅｎｔｕｒｙ ｒｅｄ’)ꎬＣＩＥＬａｂ 色度模式的 ａ 值结果表明 使用 ＬａｂＧｅｎｅ 多酚多糖植物总 ＲＮＡ 提取试剂
处理时间越长ꎬ非洲菊的 ａ 值越大ꎬ色彩越红艳 盒ꎬ按照已有方法提取玫瑰花瓣的总 ＲＮＡ( 毛美

(王青青ꎬ２０１６)ꎮ 琴ꎬ２０２２)ꎮ 参 考 基 因 组 为 玫 瑰 基 因 组 ( ｈｔｔｐｓ: / /
红 色 玫 瑰 品 种 ‘ 卡 罗 拉 ’ ( Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ ｗｗｗ. ｒｏｓａｃｅａｅ. ｏｒｇ / Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ / １１７４５２７２) ( Ｃｈｅｎ ｅｔ
‘Ｃａｒｏｌａ’)的花朵色泽红艳、硕大饱满ꎬ花瓣具有厚 ａｌ.ꎬ ２０２１)ꎮ 文库在 Ｉｌｌｕｍｉｎａ 平台进行序列读取和
度适中、平整光滑、易于干燥压制成型的特征ꎬ是 过滤ꎬ对下机的原始数据利用 ｆａｓｔｐ 进行质控ꎬ过滤
压花作品中常用的红色植物素材ꎮ 在使用‘ 卡罗 低质量数据得到 ｃｌｅａｎ ｒｅａｄｓ( Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１８)ꎮ
拉’的花瓣制作压花作品的过程中ꎬ随着时间的推 将基因序列注释到 Ｇｅｎｅ Ｏｎｔｏｌｏｇｙ( ＧＯ) 数据库和
移‘卡罗拉’ 花瓣颜色变暗沉ꎬ这直接影响了压花 Ｋｙｏｔｏ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅｓ( ＫＥＧＧ)
作品的观赏效果和附加价值ꎮ 目前ꎬ红色玫瑰花 数据库(Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２０)ꎮ 以 ｌｏｇ (Ｆｏｌｄ Ｃｈａｎｇｅ)的
２
瓣在干燥压制过程中的变色规律和机理仍不清 绝对值>１ 且 Ｐ ｖａｌｕｅ<０.０５ 作为标准筛选差异表达
晰ꎬ探究‘卡罗拉’ 花瓣在干燥压制过程中的颜色 基因ꎬ基因的表达水平以每百万个映射读取的转
变化机理对于创作高质量的红色主题类压花作品 录本每千碱基片段数 ( ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｐｅｒ ｋｉｌｏ ｂａｓｅｓ ｏｆ
具有重要意义ꎮ 本研究以红色玫瑰品种‘卡罗拉’ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ｒｅａｄ ｐｅｒ ｍｉｌｌｉｏｎ ｍａｐｓꎬＦＰＫＭ) 表示( Ｙｕａｎ
的花朵为材料ꎬ通过 ＣＩＥＬａｂ 色度测量、色素含量 ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２４)ꎮ
测定和 ＲＮＡ￣ｓｅｑ 转录组学分析ꎬ探究了‘ 卡罗拉’ １.３ 颜色测定
花瓣在压花过程中的颜色表型和花青苷含量变化 将样 品 平 铺 后ꎬ 使 用 Ｋｏｎｉｃａ 色 度 计 ( Ｋｏｎｉｃａ
规律ꎬ并从转录组学层面解析了影响花瓣发生颜 ＭｉｎｏｌｔａꎬＣＭ￣２６００ｄꎬＪａｐａｎ) 在 ＣＩＥＬａｂ 模 式 下 测 定
色变化的潜在原因ꎬ旨在为解析玫瑰在干燥压制 花瓣颜色ꎮ ＣＩＥＬａｂ 模式的颜色指标包括 Ｌ、ａ 和
过程中的变色规律、探索玫瑰压花花瓣保色技术 ｂꎮ 指标含义如下:Ｌ 表示样品明暗度ꎬ数值从 ０ 到
方法奠定理论基础ꎮ １００ꎬ数值越小样品越暗ꎬ反之则越明亮ꎻ( －ａꎬ０) 和
(０ꎬ＋ａ)分别表示绿色和红色数值ꎬ－ａ 越小表示样
１ 材料与方法 品越绿ꎬ＋ａ 越大表示样品越红ꎻ( －ｂꎬ０) 和(０ꎬ＋ｂ)

表示样品蓝色和黄色数值ꎬ－ｂ 越小表示样品越蓝ꎬ
１.１ 材料 ＋ｂ 越大表示样品越黄(Ｍｃｇｕｉｒｅꎬ １９９２)ꎮ

试 验 材 料 玫 瑰 ‘ 卡 罗 拉 ’ ( Ｒｏｓａ ｒｕｇｏｓａ １.４ 花青苷含量测定
￣１
‘Ｃａｒｏｌａ’)源产地为德国ꎬ购自云南昆明斗南花市ꎮ 将 ７５％乙醇溶液与 ０.１ ｍｏｌＬ 盐酸溶液混合
选用扦插繁殖生长约 ６０ ｄꎬ大小均匀且无萎蔫的花 配制盐酸－乙醇溶液(Ｖ ∶ Ｖ ＝ １ ∶ １)ꎮ 取 ０.１ ｇ 样品
朵(图 １:Ａ)ꎮ 为了观察花瓣在干燥压制过程中的 在液氮中研磨至粉末状后ꎬ将样品置于 ５ ｍＬ 盐
颜色变化规律并测定相关指标ꎬ以 ２４ ｈ 为间隔ꎬ将 酸－乙醇溶液中ꎬ在 ４ ℃ 下提取 ２ ｈꎬ离心后得到上

干燥压制过程分为第 １ 天(Ｄ１)、第 ２ 天(Ｄ２)和第 ３ 清液ꎮ 将上清液置于比色皿中并记录 ６５０、６２０、
天(Ｄ３)ꎮ 从花朵上随机取 １０ 片新鲜花瓣ꎬ随即进 ５３０ ｎｍ 下的吸光值( ＯＤ) 并计算样品花青苷含量
行液氮速冻并保存于 －８０ ℃ 中ꎬ命名该样本组为 (Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００５)ꎮ
Ｄ１ꎮ 随后ꎬ另取 ２０ 片花瓣置于压花器的海绵干燥 １.５ 统计分析
板之间ꎬ将压花器置于密封袋中并保证密封袋内部 使用 ＳＰＳＳ ２ 软件中的 ｔ￣ｔｅｓｔ 和 Ｗａｌｌｅｒ￣Ｄｕｎｃａｎ
环境与外界隔绝(密封袋内的湿度变化对样品的影 法对测定结果进行统计学分析ꎻ使用 Ｅｘｃｅｌ 软件将