Page 116 - 《广西植物》2025年第12期
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参考基因组ꎬ对棱枝槲寄生和 NCBI 数据库检索檀
香目槲寄生属 4 个叶绿体全基因组序列同源性进 2 结果与分析
行比较分析ꎮ 采用 Geneious 10.2.2 软件中 Mauve
多重基因组比对法(Kearse et al.ꎬ2012)ꎬ检测棱枝 2.1 棱枝槲寄生叶绿体基因组的基本特征
槲寄生和槲寄生属 4 个物种的叶绿体基因组的重 棱枝槲寄生叶绿体基因总长度为 126 315 bpꎬ
排和共线性ꎮ 整体 GC 含量为 36.40%ꎮ 该基因组呈现典型的四
1.4 密码子偏好性分析 分体结构ꎬ即整个环状基因组可分成 3 个区域:大
1.4.1 密码子组成成分分析 使用 CodonW 软件获 单拷贝区(LSC)ꎬ长 72 365 bpꎬGC 含量为33.50%ꎻ
得叶 绿 体 基 因 组 的 相 对 同 义 密 码 子 使 用 度 小 单 拷 贝 区 ( SSC )ꎬ 长 8 174 bpꎬ GC 含 量 为
(relative synonymous codon usageꎬRSCU) 以及有效 24.80%ꎻ一 对 反 向 重 复 区 ( IRa / IRb)ꎬ 长 22 888
密码子数( effective number of codonsꎬENC) 值ꎬ并 bpꎬGC 含量为 43.20%(图 1)ꎮ
使用在线网站 EMBOSSꎬ计算不同位置的 GC 含量 棱枝槲寄生叶绿体基因组中共注释到 111 个
基因(表 2)ꎬ包括 8 个核糖体 RNA( rRNA)、34 个
(毛立彦等ꎬ2022)ꎮ
1.4.2 RSCU 分析 利用 TBtools 软件对整理后的 转运 RNA(tRNA) 和 69 个蛋白编码基因ꎬ未能检
测到转录起始因子 infAꎬ但检测到了编码 RNA 聚
同义 密 码 子 数 据 进 行 热 图 绘 制 ( Chen et al.ꎬ
合酶亚基的基因 rpoA、rpoB、rpoC1∗、rpoC2ꎮ 对叶
2020)ꎮ
绿体基因内含子进行分析ꎬ其中有 15 个基因含有
1.4.3 密码子中性绘图、ENC ̄plot 及 PR2 ̄plot 绘图
分析 以 GC 为横坐标ꎬ以每个基因的 GC 、GC 的 内含子且 ycf3、clpP 和 rps12 蛋白编码基因含有 2
3 1 2
个内含子ꎮ
平均值(GC ) 为纵坐标ꎬ在 Excel 中绘制散点图ꎬ
12
2.2 棱枝槲寄生及槲寄生属部分物种叶绿体全基
分析两者之间的相关性(余潇等ꎬ2024)ꎮ
因组特征
以各条 CDS 序列的 ENC 值为纵坐标ꎬGC 为
3S 利用 Geneious 9.0.2 软件获取槲寄生属 5 种植
横坐标绘制二维散点图(毛立彦等ꎬ2022)ꎬ计算公
物叶绿体全基因组的 IR 区、SSC 区和 LSC 区序列
2
式:ENC = 2+GC +29 / [GC 2 +(1-GC ) ]为标准
及 GC 含量(表 3)ꎮ 5 种植物叶绿体基因组的序列
3S 3S 3S
曲线在 Excel 中绘制二维散点图ꎮ
长度范围为 126 315 ~ 131 825 bpꎬ其中棱枝槲寄生
分析每个密码子第 3 位碱基的 A、T、G、C 含
的叶绿 体 基 因 组 长 度 最 短ꎬ 与 扁 枝 槲 寄 生 相 差
量ꎬ并以 A / (A +T )为纵坐标ꎬ以 G / ( G +C ) 为
3 3 3 3 3 3 5 510 bpꎮ IR 区 的 序 列 长 度 范 围 为 45 776 ~
横坐 标 绘 制 散 点 图 ( 毛 立 彦 等ꎬ 2022ꎻ 余 潇 等ꎬ
46 764 bpꎬ LSC 区 的 序 列 长 度 范 围 为 72 365 ~
2024)ꎮ
76 070 bpꎬ SSC 区 的 序 列 长 度 范 围 为 8 174 ~
1.4.4 最优密码子分析 以 ENC 数值为基准ꎬ将槲
8 991 bpꎮ
寄生属 5 种植物的密码子按照由大到小的顺序进 5 个槲寄生属植物叶绿体基因组 GC 含量为
行排列ꎬ从高低两端各取 10%的基因ꎬ分别作为基
36. 10% ~ 37. 50%ꎬ IR 区 GC 含 量 ( 43. 10% ~
因高表 达 组 和 低 表 达 组ꎬ 并 计 算 2 组 密 码 子 的
43.80%) 均 大 于 LSC 区 GC 含 量 ( 33. 10% ~
RSCU 值 和 密 码 子 的 差 值 ΔRSCUꎬ 同 时 满 足
34.90%) 和 SSC 区 GC 含量(23.70% ~ 27.40%)ꎬ
RSCU>1和 ΔRSCU≥0.08 的密码子即为最优密码 其中枫香槲寄生和瘤果槲寄生的总 GC 含量最少ꎬ
子(毛立彦等ꎬ2022)ꎮ 均为 36.10%ꎻGC 含量最高的为扁枝槲寄生ꎮ
1.5 系统发育分析 2.3 槲寄生属叶绿体基因组的比较分析
从 NCBI 下载近缘物种的叶绿体基因组序列ꎬ 2.3.1 叶绿体基因组长重复序列及简单重复序列
利用 OrthoFinder 软件(Zhan et al.ꎬ2024) 进行直系 分析 利用 REPuter 在线工具对槲寄生属的 5 种
同源基因分析ꎬ使用 MAFFT 软 件 进 行 全 序 列 比 植物叶 绿 体 基 因 组 的 长 重 复 序 列 进 行 分 析 ( 图
对ꎬ使用 FastTree 软件( Price et al.ꎬ2009) 构建最 2)ꎬ在瘤果槲寄生和扁枝槲寄生中检测到 4 种重
大似然(maximum likelihoodꎬML)系统发育树ꎬ利用 复序列类型ꎬ但在数量和类型上存在差异ꎬ在棱枝
iTOL 平台进行可视化及树形优化ꎮ 槲寄生、 枫香槲寄生和槲寄生中没有检测到互补

