Page 127 - 《广西植物》2026年第3期

３ 期 黄明慧等: 钩藤钩发育相关 ＳＥＰＡＬＬＡＴＡ￣ｌｉｋｅ 基因的克隆与表达分析 ５ ０ ３

￣１ ￣２ ￣３
１０ 、１０ 、１０ 分别表示酵母菌液稀释 １０、１００、１ ０００ 倍ꎻ ＢＤ￣ＵｒＳＥＰ１. ｐＧＢＫＴ７￣ＵｒＳＥＰ１ 转化子ꎻ ＢＤ￣ＵｒＳＥＰ３.１. ｐＧＢＫＴ７￣ＵｒＳＥＰ３.１
转化子ꎻ ＢＤ￣ＵｒＳＥＰ３.２. ｐＧＢＫＴ７￣ＵｒＳＥＰ３.２ 转化子ꎮ
￣１ ￣２ ￣３
１０ ꎬ １０ ꎬ １０ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｔｈｅ ｙｅａｓｔ ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｄｉｌｕｔｅｄ ａｔ ａ ｒａｔｉｏ ｏｆ １ ∶ １０ꎬ １ ∶ １００ꎬ １ ∶ １ ０００ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎻ ＢＤ￣ＵｒＳＥＰ１. ｐＧＢＫＴ７￣ＵｒＳＥＰ１
ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｎｔꎻ ＢＤ￣ＵｒＳＥＰ３.１. ｐＧＢＫＴ７￣ＵｒＳＥＰ３.１ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｎｔꎻ ＢＤ￣ＵｒＳＥＰ３.２. ｐＧＢＫＴ７￣ＵｒＳＥＰ３.２ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｎｔ.
图 ８ ＵｒＳＥＰ１、ＵｒＳＥＰ３.１ 和 ＵｒＳＥＰ３.２ 在酵母细胞中的转录激活活性
Ｆｉｇ. ８ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ＵｒＳＥＰ１ꎬ ＵｒＳＥＰ３.１ ａｎｄ ＵｒＳＥＰ３.２ ｉｎ ｙｅａｓｔ ｃｅｌｌｓ

与其在蛋白结构预测中均能够形成四聚体及细胞 去除 Ｃ 末端的 ＡｔＳＥＰ３ 及竹叶花椒( Ｚａｎｔｈｏｘｙｌｕｍ
核定位的结果一致ꎬ而且 ３ 个蛋白的 Ｃ 末端均具 ａｒｍａｔｕｍ)ＳＥＰ３￣ｌｉｋｅ 蛋白的 ＺａＭＡＤＳ７０ 截短体均丧
有 ＳＥＰ Ⅰ 和 ＳＥＰ Ⅱ 基序ꎬ表明钩藤 ＳＥＰ￣ｌｉｋｅ 在形 失了转录激活活性( Ｍａｌｃｏｍｂｅｒ ＆ Ｋｅｌｌｏｇｇꎬ ２００５ꎻ

成蛋 白 复 合 物 及 ＤＮＡ 识 别 功 能 上 的 保 守 性ꎬ Ｉｍｍｉｎｋ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００９ꎻ Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２２)ꎮ 从转录
ＵｒＳＥＰ１ 和 ＵｒＳＥＰ３.２ 具有转录激活活性ꎬ这与拟南 激活活性分析来看ꎬＵｒＳＥＰ３.２ 与 ＡｔＳＥＰ３ 的功能更
芥 ＡｔＳＥＰ１ 和 ＡｔＳＥＰ３ 在酵母中能够转录自激活的 相近ꎬ而 ＵｒＳＥＰ３.１ 可能与其他蛋白相互作用从而

结果( ｄｅ Ｆｏｌｔｅｒ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００５) 一致ꎮ 本研究发现ꎬ 来结合 ＤＮＡꎮ
ＵｒＳＥＰ３.１ 和 ＵｒＳＥＰ３.２ 虽然同属于 ＳＥＰ３ 亚类ꎬ但 本研究发现ꎬＵｒＳＥＰ３.１ 和 ＵｒＳＥＰ３.２ 在钩中的
是 ＵｒＳＥＰ３.１ 无转录激活活性ꎬ系统进化树分析表 表达水平能够分别达到茎的 ３８.３ 倍和 ３８９.５ 倍ꎬ
明 ＵｒＳＥＰ３.１ 比 ＵｒＳＥＰ３.２ 与咖啡 ＣａＳＥＰ３ 的亲缘 虽然 ＵｒＳＥＰ３ 基因在钩芽中的表达量显著低于花
关系更近ꎬ体现了二者的分化ꎬ２ 个钩藤 ＳＥＰ３ 蛋 序芽ꎬ但是在钩和花序的发育过程中表现出相似

白在 ＭＩＫ 结构域序列上虽然高度相似(９７.６９％)ꎬ 的表达模式ꎮ 这与葡萄科和西番莲科植物卷须的
但是 Ｃ 末端相似度较低(８４.０６％)ꎬＣ 末端序列差 研究结果一致ꎬ这两种卷须被认为来源于花序变
异可能造成二者转录激活活性不同ꎮ ＳＥＰ 蛋白通 态ꎬ在 葡 萄 ( Ｖｉｔｉｓ ｖｉｎｉｆｅｒａ ) 和 西 番 莲 ( Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａ
常形成高级复合物ꎬ而这种复合物的形成会对其 ｅｄｕｌｉｓ)卷须中均发现了花及花序分生组织特异基
结合 ＤＮＡ 造成阻碍ꎬＣ 末端序列通常包含疏水和 因的表达ꎬ特别是西番莲 ＳＥＰ３￣ｌｉｋｅ 基因在卷须原
极性的氨基酸残基ꎬ能够增加疏水面从而精细调 基和花分生组织中均检测到了转录ꎬ而在侧枝的
控蛋白对其他 ＭＡＤＳ￣ｂｏｘ 蛋白及下游基因的结合ꎬ 分生组织中无表达(Ｓｏｕｓａ￣Ｂａｅｎａ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１８)ꎮ 因