Page 49 - 《广西植物》2026年第3期

３ 期 韦美琴等: 壮药古羊藤中一个新的倍半萜 ４ ２ ５

石油醚部位和乙酸乙酯部位的化学成分进行分离 中ꎬＦｒ.ｓ４ 采用中压液相色谱ꎬ以甲醇 － 水( ３０％ ~
鉴定ꎬ并采用 ＭＴＳ 法评价单体化合物对肿瘤细胞 １００％)为流动相进行梯度洗脱ꎬ合并流分后得到
增殖的抑制活性ꎬ为阐释古羊藤抗肿瘤活性和药 Ｆｒ.ｓ４－１ ~ Ｆｒ.ｓ４－９ꎮ Ｆｒ.ｓ４－４ 先后经硅胶柱色谱、葡
效物质基础提供科学依据ꎮ 聚糖凝胶 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０ 色谱分离纯化ꎬ最后经
半制备液相色谱(乙腈 ∶ 水ꎬ４８ ∶ ５２ꎬ Ｖ / Ｖ) 分离得
１ 材料与方法 到化合物 ２ (ｔ ＝ ８０ ｍｉｎꎬ １０.９ ｍｇ)ꎻＦｒ.ｓ４－３ 通过
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半制备液相色谱分离(甲醇 ∶ 水ꎬ６９ ∶ ３１ꎬ Ｖ / Ｖ) 得
１.１ 药材 到化合物 ３ (ｔ ＝ ３９ ｍｉｎꎬ ５.６ ｍｇ)ꎻＦｒ.ｓ４－２ 通过半
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古羊藤药材由广西仙茱中药科技有限公司提 制备液相色谱分离(乙腈 ∶ 水ꎬ３０ ∶ ７０ꎬ Ｖ / Ｖ) 得到
供ꎬ经广西中医药大学樊兰兰教授鉴定为萝藦科 化合物 ４ ( ｔ ＝ ８３ ｍｉｎꎬ ７.５ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.ｓ５ 经中低压
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马莲鞍属植物马莲鞍( Ｓｔｒｅｐｔｏｃａｕｌｏｎ ｊｕｖｅｎｔａｓ) 的干 液相色谱分离ꎬ以甲醇 －水( ３０％ ~ １００％) 为流动

燥根茎ꎮ 相进行梯度洗脱ꎬ合并流分得到 Ｆｒ.ｓ５ － １ ~ Ｆｒ.ｓ５ －
１.２ 仪器和试剂 ８ꎮ Ｆｒ.ｓ５－５ 先采用硅胶柱色谱分离ꎬ经半制备液
５００ ＭＨｚ Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＡＮＣＥ Ⅲ核磁共振波谱仪 相色谱(甲醇:水ꎬ４５ ∶ ５５ꎬ Ｖ / Ｖ)分离得到化合物 ５
[布鲁克(北京) 科技有限公司]ꎻ ＬＣ￣５２ 制备型高 (ｔ ＝ ４７ ｍｉｎꎬ ４３ ｍｇ)ꎻＦｒ.ｓ５－３ 先经硅胶柱色谱分
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效液相色谱仪( 赛谱锐思科技有限公司)ꎻＧ６２３０ 离ꎬ再经 半 制 备 液 相 色 谱 ( 乙 腈 ∶ 水ꎬ ３８ ∶ ６２ꎬ
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飞 行 时 间 质 谱 仪 ( 安 捷 伦 科 技 有 限 公 司 )ꎻ Ｖ / Ｖ)分离得到化合物 １ ( ｔ ＝ ３６ ｍｉｎꎬ 无色针晶
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ＲＥＶＥＬＥＲＩＳＸ２ 中压液相色谱仪(格雷斯公司)ꎻ半 １.０ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.ｓ８ 采用中低压液相色谱ꎬ以甲醇－水
制备型液相色谱柱( ＹＭＣ￣ＰａｃｋꎬＯＤＳ￣Ａꎬ２１.２ ｍｍ× (３０％ ~ １００％)为流动相进行梯度洗脱ꎬ合并流分
２５０ ｍｍꎬ５ μｍ)ꎻ ＣＣＡ￣１１１２Ａ 爱朗旋转蒸发仪( 上 得Ｆｒ.ｓ８－１ ~ Ｆｒ.ｓ８ － ９ꎬ其中 Ｆｒ.ｓ８ － ４ 在半制备液相
海爱朗仪器有限公司)ꎻ分析天平[ 赛多利斯科学 色谱(甲醇 ∶ 水ꎬ５８ ∶ ４２ꎬ Ｖ / Ｖ) 洗脱下得到化合物
仪器(北京)有限公司]ꎻ显微熔点仪 Ｘ￣４Ｂ( 上海仪 ６ (ｔ ＝ ４０ ｍｉｎꎬ ４７.１ ｍｇ)和化合物 ７ ( ｔ ＝ ４６ ｍｉｎꎬ
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电物理光学仪器有限公司)ꎻＺＦ￣２ 三用紫外色谱仪 ９.８ ｍｇ)ꎮ
(上海市安亭电子仪器厂)ꎻＣ 材料( 日本株式会 乙酸乙酯部位通过硅胶 柱 色 谱 进 行 初 步 分
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社维美希上海代表处)ꎻ凝胶 Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ￣２０( 美 离ꎬ以二氯甲烷－甲醇(１００ ∶ ０→０ ∶ １００ꎬＶ / Ｖ) 梯
国法玛西 亚 公 司)ꎻ 硅 胶 ( 青 岛 海 洋 化 工 有 限 公 度洗脱ꎬ根据 ＴＬＣ 分析结果ꎬ将洗脱液合并ꎬ共获
司)ꎻ色谱级甲醇、乙腈(赛默飞世尔科技公司)ꎻ乙 得 ４ 个组分ꎬ依次标记为 Ｆｒ.ｙ１ ~ Ｆｒ.ｙ４ꎮ Ｆｒ.ｙ３ 采用
酸乙酯ꎬ甲醇等分析纯试剂( 西陇科学股份有限公 中压液相色谱ꎬ以甲醇 －水( １０％ ~ １００％) 为流动
司)ꎻ紫杉醇、阿霉素( ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎꎬＤＯＸ)、ＭＴＳ 试 相进行梯度洗脱ꎬ获得 ８ 个组分 Ｆｒ.ｙ３－１ ~ Ｆｒ.ｙ３ －
剂盒(普洛麦格公司)ꎮ 用于体外细胞毒活性实验 ８ꎮ Ｆｒ.ｙ３－３ 先经过硅胶柱色谱分离ꎬ后经半制备
的 ５ 株肿瘤细胞均购自美国模式菌种收集中心 液相色谱(乙腈 ∶ 水ꎬ２５ ∶ ７５ꎬ Ｖ / Ｖ) 进一步分离纯
(Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ)ꎮ 化得到化合物 ８ ( ｔ ＝ ３９ ｍｉｎꎬ ９.９ ｍｇ)ꎬ半制备液
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１.３ 研究方法 相色谱(乙腈 ∶ 水ꎬ２３ ∶ ７７ꎬ Ｖ / Ｖ) 分离得到化合物
１.３.１ 提取和分离 取古羊藤药材 ２５ ｋｇꎬ用乙醇回 １１ (ｔ ＝ ５４ ｍｉｎꎬ ９. ９ ｍｇ)ꎬ 半 制 备 液 相 色 谱 ( 乙
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流提取 ２ 次ꎬ每次 ２ ｈꎬ合并提取液ꎮ 乙醇提取液 腈 ∶ 水ꎬ２０ ∶ ８０ꎬ Ｖ / Ｖ)分离得到化合物 １２ (ｔ ＝ ５２
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经减压浓缩得浸膏 ４.７ ｋｇꎬ将浸膏混悬于水中ꎬ依 ｍｉｎꎬ ９.１ ｍｇ)ꎮ Ｆｒ.ｙ２ 经硅胶柱色谱分离ꎬ以二氯
次用极性由小到大的溶剂萃取ꎬ各萃取液分别减 甲烷－甲醇 (１００ ∶ ０→０ ∶ １００ꎬ Ｖ / Ｖ) 为流动相进

压浓缩ꎬ得到 ３ 个部位ꎬ分别为石油醚部位 ３１０ ｇꎬ 行梯度洗脱得 ８ 个组分 Ｆｒ. ｙ２ － １ ~ Ｆｒ. ｙ２ － ８ꎬ其中
乙酸乙酯部位 １６２ ｇ 和正丁醇部位 ６４８ ｇꎮ Ｆｒ.ｙ２－ ２ 经中低压液相色谱ꎬ经甲醇 － 水( １０％ ~
石油醚部位通过硅胶柱色谱进行初步分离ꎬ １００％) 梯 度 洗 脱 得 １４ 个 组 分 Ｆｒ. ｙ２ － ２ － １ ~
以石油醚－乙酸乙酯(１００ ∶ ０→０ ∶ １００ꎬＶ / Ｖ) 为流 Ｆｒ.ｙ２－２－１４ꎮ Ｆｒ.ｙ２－２－４ 等分为两部分ꎬ一部分用
动相梯度洗脱ꎬ依据 ＴＬＣ 分析结果ꎬ将洗脱液合 半制备液相色谱(甲醇 ∶ 水ꎬ２５ ∶ ７５ꎬ Ｖ / Ｖ) 分离得
并ꎬ共获得 ９ 个组分ꎬ依次标记为 Ｆｒ.ｓ１ ~ Ｆｒ.ｓ９ꎮ 其 到化合物 １４ (ｔ ＝ ６０ ｍｉｎꎬ ９.５ ｍｇ)ꎬ另一部分经半
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