Page 52 - 《广西植物》2026年第5期

７ ８ ４ 广 西 植 物 ４６ 卷

红色框表示起始密码子ꎮ 终止子用“∗”表示ꎮ
Ｔｈｅ ｒｅｄ ｂｏｘ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｔｈｅ ｓｔａｒｔ ｃｏｄｏｎ. Ｔｈｅ ｓｔｏｐ ｃｏｄｏｎ ｉｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｂｙ ａｎ ａｓｔｅｒｉｓｋ (∗).
图 ２ ＭＹＢ４ 转录因子的 ｃＤＮＡ 序列及预测氨基酸序列
Ｆｉｇ. ２ ｃＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ ｄｅｄｕｃｅｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ ＭＹＢ４ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ

此外ꎬ还鉴定出多个 Ｒ２Ｒ３￣ＭＹＢ 亚家族的特征保 ２.８ ＢｎａＭＹＢ４ 蛋白三级结构预测
守基序ꎬ如 Ｃ１、Ｃ２、Ｚｆ￣ｌｉｋｅ 和 Ｃ４ 基序ꎮ 这些分析 利用 在 线 工 具 ( 如 ＳＷＩＳＳ￣ＭＯＤＥＬ) 预 测 了
结果共同证实 ＢｎａＭＹＢ４ 属于 Ｒ２Ｒ３￣ＭＹＢ 转录因 ＢｎａＭＹＢ４ 蛋白的三级结构ꎮ 如图 １０ 所示ꎬ该模型

子家族ꎬ具备作为转录调控因子的基本结构基础ꎮ 呈现出典型的植物 Ｒ２Ｒ３￣ＭＹＢ 转录因子结构特
２.５ ＢｎａＭＹＢ４ 的亚细胞定位预测 征ꎬ包含两个保守的 ＭＹＢ 结构域( Ｒ２ 和 Ｒ３) 形成
利用 ＣＥＬＬＯ ｖ２. ５ 和 ＷＯＬＦ ＰＳＯＲＴ 软 件 对 的螺旋－转角 － 螺旋折叠ꎮ 模型的质量评估指标
ＢｎａＭＹＢ４ 进行亚细胞定位预测ꎮ 两种软件的结果 ＱＭＥＡＮ Ｚ 评分为 － ４.９１ꎬ表明该预测模型具有合
均显示ꎬＢｎａＭＹＢ４ 最可能定位于细胞核( 表 １、图 理的可信度ꎮ 该结构预测结果进一步从生物信息
６)ꎮ 作为转录因子ꎬ定位于细胞核是其发挥转录 学角 度 支 持 了 ＢｎａＭＹＢ４ 属 于 ＭＹＢ 转 录 因 子
调控 功 能 的 必 要 条 件ꎬ 该 预 测 结 果 初 步 支 持 Ｒ２Ｒ３ 亚家族成员的结论ꎮ
ＢｎａＭＹＢ４ 具有转录因子的潜在功能ꎮ ２.９ ＢｎａＭＹＢ４ 启动子顺式元件分析
２.６ ＢｎａＭＹＢ４ 蛋白的信号肽及跨膜预测 为探究 ＢｎａＭＹＢ４ 基因的表达调控机制ꎬ我们
通过 ＳｉｇｎａｌＰ ６.０ 预测ꎬＢｎａＭＹＢ４ 的 Ｎ 端不存 对其翻译起始位点上游２ ０００ ｂｐ 的启动子区域进
在典型的信号肽切割位点( 图 ７)ꎬ表明它不属于 行了顺式作用元件分析ꎮ 如表 ２ 所示ꎬ除 ＴＡＴＡ￣
通过经典分泌途径运输的分泌蛋白ꎮ ＴＭＨＭＭ 预 ｂｏｘ 和 ＣＡＡＴ￣ｂｏｘ 等核心启动子元件以外ꎬ还发现
测结果( 图 ８) 显示ꎬ该蛋白无明显的跨膜螺旋结 了多种与非生物胁迫和激素响应相关的元件ꎮ 其
构ꎮ 这两项分析表明ꎬＢｎａＭＹＢ４ 是一种非跨膜和 中包括与防御及胁迫响应相关的 ＴＣ￣ｒｉｃｈ ｒｅｐｅａｔｓ
非分泌的可溶性细胞内蛋白ꎬ这与其作为核定位 元件ꎬ响应水杨酸的 ＴＣＡ￣ｅｌｅｍｅｎｔꎬ响应生长素的
转录因子的特性相符ꎮ ＴＧＡ￣ｅｌｅｍｅｎｔꎬ响应赤霉素的 Ｐ￣ｂｏｘꎬ以及光响应相
２.７ ＢｎａＭＹＢ４ 蛋白二级结构预测 关的 ＧＡＴＡ￣ｍｏｔｉｆ、ＭＲＥ 和 ＬＡＭＰ￣ｅｌｅｍｅｎｔ 等ꎮ 这些
使用 ＳＯＰＭＡ 在线工具对 ＢｎａＭＹＢ４ 的二级结 元件的存在强烈暗示 ＢｎａＭＹＢ４ 的表达可能受到
构进行预测ꎮ 结果( 图 ９) 显示ꎬ该蛋白的二级结 多种环境信号(包括重金属胁迫) 和植物激素的精
构主要由无规则卷曲(５９.８６％) 构成ꎬ其次是 α￣螺 细调控ꎬ为其参与 Ｃｄ 胁迫响应提供了潜在的转录
旋(２３.４７％)和延伸链(１６.６７％)ꎮ 较高的无规则 水平调控依据ꎮ
卷曲比例常与蛋白质的结构柔性和功能多样性相 ２.１０ ＢｎａＭＹＢ４ 亚细胞定位验证
关ꎬ这可能有助于 ＢｎａＭＹＢ４ 与不同的 ＤＮＡ 序列 为验证 ＢｎａＭＹＢ４ 的细胞内定位ꎬ本研究构建
或互作蛋白结合ꎬ以适应复杂的转录调控需求ꎮ 了 ＢｎａＭＹＢ４ 与 绿 色 荧 光 蛋 白 ( ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ