Page 80 - 《广西植物》2026年第5期

８ １ ２ 广 西 植 物 ４６ 卷
基因的表达一直存在ꎬ一定时间范围内随着 ＶＩＧＳ 同接种模式ꎮ 本研究成功构建了 ＣＹＲＳＶ Ｎ、ＮＳｓ、
体系作用时间越长ꎬ沉默效率可能会越好ꎮ 但是ꎬ ＮＳｍ 基因的 ＶＩＧＳ 体系ꎬ为研究 Ｎ、ＮＳｓ、ＮＳｍ 基因
病毒作为外源基因ꎬ其在植株内的复制表达与内 在病毒致病等方面的功能提供了前期材料ꎬ也为
源基因不同ꎬ不同种类的病毒ꎬ其基因的表达也不 ＣＹＲＳＶ 抗病育种和田间绿色防控提供了一定的理
尽相同ꎬ因此本研究设计的时间点依据 ＣＹＲＳＶ 在 论依据ꎮ
植株内侵染复制的特点而设计的ꎮ 选择合适的侵
染时间对获得 ＶＩＧＳ 的沉默效率也至关重要ꎬ本研
究通过不同接种模式下的沉默效率检测ꎬ确定了 参考文献:
适合 ＣＹＲＳＶ 病毒基因高效沉默的 ＶＩＧＳ 体系注射
ＣＡＩ Ｗꎬ ＣＨＥＮ Ｃ Ｍꎬ ＣＨＥＮ Ｇ Ｊꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１７. Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
模式ꎮ 本氏烟和辣椒中的症状及沉默效率显示ꎬ
ｖｉｒｕｓ￣ｉｎｄｕｃｅｄ ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ
Ｎ、ＮＳｓ、ＮＳｍ 基因沉默后ꎬ本氏烟的症状相比对照 Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ ｐｌａｎｔｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｇｅｎｏｍｉｃｓ [Ｊ]. Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ
组显著减轻ꎬ而 Ｎ 基因沉默引起的本氏烟心叶卷 Ｃａｐｓｉｃｕｍꎬ １５(１): １－１２. [蔡文ꎬ 陈长明ꎬ 陈国菊ꎬ 等ꎬ
曲程度最轻ꎬ病症最轻ꎬ提示我们 Ｎ、ＮＳｓ、ＮＳｍ 基 ２０１７. 病毒诱导基因沉默技术在茄科植物功能基因组学
因在 ＣＹＳＲＶ 侵染过程中起着重要的作用ꎬ其中 Ｎ 研究中的应用进展 [Ｊ]. 辣椒杂志ꎬ １５(１): １－１２.]
基因的作用可能最显著且最重要ꎬ但仍需要进一 ＣＨＥＮ Ｋ Ｒꎬ ＸＵ Ｚ Ｙꎬ ＹＡＮ Ｌ Ｙꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２００５. Ｒｅｓｅａｒｃｈ
ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ ｔｏｍａｔｏ ｓｐｏｔｔｅｄ ｗｉｌｔ ｖｉｒｕｓ ( Ｔｏｓｐｏｖｉｒｕｓ ) [ Ｊ].
步实验来证明这个观点ꎮ
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｏｉｌ Ｃｒｏｐ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ ２７(３): ９１－９６. [陈
尽管 ＶＩＧＳ 技术在植物基因功能鉴定的领域
坤荣ꎬ 许 泽 永ꎬ 晏 立 英ꎬ 等ꎬ ２００５. 番 茄 斑 萎 病 毒 属
已经取得了巨大的突破ꎬ但依然面临一些不足和
(Ｔｏｓｐｏｖｉｒｕｓ) 病毒研究进展 [Ｊ]. 中国油料作物学报ꎬ
限制ꎬ环境因素(如光照条件、温度因子、湿度因素
２７(３): ９１－９６.]
等)对沉默效率的影响比较大( 蔡文等ꎬ２０１７ꎻ张琴
ＧＵＩ Ｍꎬ ＧＡＯ Ｘꎬ ＪＩＡ Ｚ Ｑꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２２. Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
琴等ꎬ２０２０)ꎮ 虽然 ＴＲＶ 介导的 ＶＩＧＳ 技术还存在 ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｏｒｔｈｏｔｏｓｐｏｖｉｒｕｓ ｏｎ ｈｏｔ ｐｅｐｐｅｒ ｉｎ Ｙｕｎｎａｎ
不足和缺点ꎬ但其具有操作步骤简洁、载体构建简 [Ｊ]. Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬ ４８(４) : ２８６－２９２ꎬ ３０１. [桂敏ꎬ 高
单、侵染沉 默 效 率 高、研 究 周 期 短 等 优 点ꎮ 随 着 雪ꎬ 贾志强ꎬ 等ꎬ ２０２２. 云南辣椒正番茄斑萎病毒属病毒
ＶＩＧＳ 技术的不断改进ꎬ相信这项技术的应用领域 的分子鉴定 [Ｊ]. 植物保护ꎬ ４８(４): ２８６－２９２ꎬ ３０１.]
ＨＡＯ Ｍ Ｙꎬ ＨＡＮＧ Ｑꎬ ＳＨＩ Ｇ Ｙꎬ ２０２２. Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ
会越来越广ꎬ并且越来越受广大研究人员的青睐ꎮ
本研究成功获得 ＣＹＲＳＶ 主要功能蛋白基因 Ｎ、ＮＳｓ ｐｒｏｓｐｅｃｔ ｏｆ ｖｉｒｕｓ￣ｉｎｄｕｃｅｄ ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｉｎ ｃｒｏｐ ｇｅｎｅ
ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｒｅｓｅａｒｃｈ [Ｊ]. Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ
和 ＮＳｍ 的高效 ＶＩＧＳ 体系及荧光定量 ＰＣＲ 鉴定体
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ ２４ (１): １ － １３. [ 郝 梦 媛ꎬ 杭 琦ꎬ 师 恭 曜ꎬ
系ꎬ这对了解 ＣＹＲＳＶ 功能蛋白的作用、致病机制、
２０２２. ＶＩＧＳ 基因沉默技术在作物基因功能研究中的应用
复制策略等关键生物学特性具有重要意义ꎮ
与展望 [Ｊ]. 中国农业科技导报ꎬ ２４(１): １－１３.]
本研究将设计的 ３００ ｂｐ 左右的 Ｎ、ＮＳｓ、ＮＳｍ
ＨＯＵ Ｑ Ｍꎬ ＺＨＡＮＧ Ｌꎬ ＨＥ Ｘ Ｑꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０１５. Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ
靶片段构建到 ｐＴＲＶ２ 沉默载体上ꎬ采用先侵染注 ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｐｒａｃｔｉｃｅ ｆｏｒ ｐｌａｎｔ ｇｅｎｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｂｙ ＶＩＧＳ
射载体 ２ ｄ 后再接种病毒 ＣＹＲＳＶ 的顺序接种本氏 [Ｊ]. Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔꎬ ３２ ( ９):
烟ꎬ以及应用绝对实时荧光定量 ＰＣＲ 的分析方法 １９１－１９３. [侯巧明ꎬ 张立ꎬ 贺新强ꎬ 等ꎬ ２０１５. 病毒诱导的
检测 Ｎ、ＮＳｓ、ＮＳｍ 基因的拷贝数ꎮ 本研究结果发 基因沉默技术实验教学设计和实践 [Ｊ]. 实验技术与管

现 Ｎ、ＮＳｓ、ＮＳｍ 基因的沉默效率分别为 ８２.０７％、 理ꎬ ３２(９): １９１－１９３.]
ＨＵ Ｊ Ｙꎬ ＬＩＵ Ｇ Ｚꎬ ＣＨＥＮ Ｌꎬ ｅｔ ａｌ.ꎬ ２０２４. Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ ｏｆ
８７.０２％、９４. ３９％ꎬ 揭 示 了 本 研 究 构 建 的 Ｎ、 ＮＳｓ、
ｖｉｒｕｓ￣ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ ｏｆ Ｃａｍｅｌｌｉａ
ＮＳｍ 的 ＶＩＧＳ 体系在本氏烟中沉默效率较高ꎬ并且
ｓｉｎｅｎｓｉｓ [ Ｊ]. Ａｃｔａ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ Ｓｉｎｉｃａꎬ ５１ (１１): ２７１０ －
先注射 ＶＩＧＳ 体系后再接种病毒的处理方法可以
２７２４. [胡锦瑜ꎬ 刘桂芝ꎬ 陈兰ꎬ 等ꎬ ２０２４. 烟草脆裂病毒
充分发挥 ＶＩＧＳ 体系的沉默作用ꎬ达到高效沉默基
介导的茶树 ＶＩＧＳ 体系的构建 [Ｊ]. 园艺学报ꎬ ５１(１１):
因的目的并降低病毒的侵染能力ꎮ 本研究仅针对
２７１０－２７２４.]
ＣＹＲＳＶ 病毒的 ＶＩＧＳ 体系构建ꎬ不同种类的病毒在
ＬＩ Ｊꎬ ＹＵ Ｚ Ｘꎬ ＦＥＮＧ Ｂ Ｍꎬ ２０１９. Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ
植物体内复制的上升期有所不同ꎬ繁殖时间也不 ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｖｉｒｕｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ [ Ｊ].
同ꎬ因此针对不同病毒的 ＶＩＧＳ 体系构建应探索不 Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｌａｎｔ Ｂｒｅｅｄｉｎｇꎬ １７(５): １５３７－１５４２. [李姣ꎬ 于宗