Page 48 - 《广西植物》2020年第3期

３ ２ ８ 广 西 植 物 ４０ 卷
ｒｏｏｔｓꎬ ｓｔｅｍｓꎬ ｌｅａｖｅｓꎬ ｆｌｏｗｅｒｓ ａｎｄ ｈｙｐｏｃｏｔｙｌ ｏｆ １４ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ ｔｒｕｅ ｍａｎｇｒｏｖｅ ｐｌａｎｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｗｅｓｔ ｃｏａｓｔ ｏｆ Ｈａｉｎａｎ ｗｅｒｅ ｓｅ￣
ｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｂｊｅｃｔｓ. Ｔｗｅｎｔｙ￣ｆｏｕｒ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄꎬ ｆｒｏｍ ４６ ｐｌａｎｔ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｔｕｒｅ ｍａｎｇｒｏｖｅ
ｐｌａｎｔｓꎬ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｉｍｐｒｏｖｅｄ Ｇａｕｓｅ’ ｓ ｍｅｄｉｕｍ (ＡＧＧ)ꎬ ｔｒｅｈａｌｏｓｅ￣ａｓｐａｒａｇｉｎｅ ｍｅｄｉｕｍ (Ｍ４)ꎬ ｔｒｅｈａｌｏｓｅ￣ｐｒｏｌｉｎｅ ｍｅｄｉｕｍ
(Ｍ５)ꎬ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ＩＳＰ５ ｍｅｄｉｕｍ (Ｍ７)ꎬ ａｒｇｉｎｉｎｅ￣ａｓｐａｒａｇｉｎｅ ｍｅｄｉｕｍ (Ｍ９)ꎬ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｓｔａｒｃｈ￣ｈｙｄｒｏｌｙｚｅｄ ｃａｓｅｉｎ ｍｅｄｉｕｍ
(Ｍ１０)ꎬ ｔｙｒｏｓｉｎｅ￣ａｓｐａｒａｇｉｎｅ ｍｅｄｉｕｍ (Ｐ７)ꎬ ｏａｔ ｍｅｄｉｕｍ (Ｐ３)ꎬ ｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄ ｓｕｇａｒ￣ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ ｍｅｄｉｕｍ (Ｍ１１) ｏｆ ｎｉｎｅ ｋｉｎｄｓ
ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｄｉａꎬ ｔｈｒｏｕｇｈ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ｃｏａｔｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ ｌｉｎｅ ｍａｒｋｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ. Ｔｈｅ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｍａｒｉｎｅ ａｃｔｉｎｏｂａｃ￣
ｔｅｒｉａ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｓｕｃｈ ａｓ １６Ｓ ｒＲＮＡ ｇｅｎｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ. Ｔｈｅ ａｎｔｉ￣
ａｇｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｔｉｃ ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｍｏｄｅｌｓ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ
ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ: (１) Ａ ｔｏｔａｌ ｏｆ ２４ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ４６ ｐｌａｎｔ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｔｒｕｅ ｍａｎｇｒｏｖｅ ｐｌａｎｔｓ
ａｎｄ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄ ｉｎ ｅｌｅｖｅｎ ｇｅｎｅｒａꎬ ｓｅｖｅｎ ｆａｍｉｌｉｅｓ. Ｎｉｎｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ. Ｍｏｒｅｏｖｅｒꎬ ＩＭＤＧＸ ６２７０ꎬ ＩＭ￣
ＤＧＸ ６１３７ ａｎｄ ＩＭＤＧＸ ６１７３ ｗｅｒｅ ｔｈｒｅｅ ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｎｅｗ ｓｔｒａｉｎｓ. Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｔｒａｉｎｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｅａｃｈ ｓａｍｐｌｅ
ｖａｒｉｅｄ ｇｒｅａｔｌｙ. Ａｍｏｎｇ ｔｈｅｍꎬ ｔｈｅ ｌｅａｖｅｓ ｈａｄ ｔｈｅ ｌａｒｇｅｓｔ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｔｒａｉｎｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｉｃｈｅｓｔ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ (１８ ｓｔｒａｉｎｓ). Ｎｅｘｔꎬ
ｅｉｇｈｔ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｔｅｍ. Ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｒｏｏｔｓ ｗａｓ ｆｏｕｒꎬ ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ
ｓｔｅｍ ａｎｄ ｌｅａｆ ｔｉｓｓｕｅ ｓａｍｐｌｅｓꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ａｎｄ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｓｔｒａｉｎｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｍ５ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔꎬ ｗｈｉｌｅ
ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ａｎｄ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ｓｔｒａｉｎｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｍ１１ ｍｅｄｉｕｍ ｗｅｒｅ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ. Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ｍｅ￣
ｄｉｕｍ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ ｈａｄ ａ ｇｒｅａｔ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ. (２) Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎꎬ ｆｏｕｒ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ａｃｔｉ￣
ｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｗｅｒｅ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｂｙ Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ ｍｏｄｅｌ ａｎｄ ｓｈｏｗｅｄ ａｎｔｉ￣ａｇｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｗａｓ ｉｎ￣
ｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ １７.１６％ꎬ ２８.１１％ꎬ ２９.０５％ ａｎｄ ２７.１０％ꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｂｌａｎｋ ｇｒｏｕｐ. Ｔｈｉｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｔｈａｔ
ｔｈｅｒｅ ｍａｙ ｂｅ ａｂｕｎｄａｎｔ ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｍａｎｇｒｏｖｅ ｐｌａｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｗｅｓｔ ｃｏａｓｔ ｏｆ Ｈａｉｎａｎꎬ ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ
ｎｅｗ ｓｏｕｒｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｔｉ￣ａｇｉｎｇ ｄｒｕｇｓ.
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: ｓｐｅｃｉｅｓ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａꎬ ｔｒｕｅ ｍａｎｇｒｏｖｅ ｐｌａｎｔｓꎬ ａｎｔｉ￣ａｇｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ

红树林是海岸潮间带特有的两栖植物群落 海南西海岸位于北部湾东侧ꎬ拥有东方市四
(陈振明等ꎬ２００６)ꎮ 真红树是一种木本植物ꎬ只能 必湾、儋州市儋州湾、儋州市峨蔓镇盐丁、临高县
在潮间带生长ꎬ不能在陆地环境中正常繁殖和生 新盈湾、临高县马袅湾和澄迈县花场湾 ６ 个红树
存(Ｌｉｎꎬ１９９５)ꎮ 为适应特殊的生长环境ꎬ红树植 林主要分布区ꎬ是北部湾的重要组成部分ꎮ 海南
物内部可能存在着特殊的化学物质参与其自身防 西海岸拥有 ９.４２３×１０ ｍ 的红树林ꎬ约占海南岛
６
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御(Ｂａｎｄａｒａｎａｙａｋｅꎬ１９８２ꎻ刘颖和刘峰ꎬ２００８)ꎬ这些 红树林面积的 ２０％( 范作卿等ꎬ２０１７)ꎮ 现阶段对
特殊的化学物质可能是由植物组织内生微生物产 海南岛红树林内生菌研究多集中在东海岸区域

生或 合 成 的 次 级 代 谢 产 物 ( 黄 宝 康 和 秦 路 平ꎬ (如东寨港、清澜港等)ꎬ对西海岸红树林的研究较
２００６)ꎮ 红树林放线菌具有代谢途径独特、多样性 少ꎬ这可能与西海岸红树林种类组成较为简单有
强、种类繁多等优势( Ａｚｍａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ２０１８)ꎬ现已从 关(范作卿等ꎬ２０１７)ꎮ 因此ꎬ对西海岸红树林内生
红树 中 分 离 得 到 多 样 性 丰 富 的 放 线 菌 菌 株 放线菌的研究会使北部湾红树林内生菌研究更加
(Ｓｕｋｓａａｒｄ ｅｔ ａｌ.ꎬ２０１５)ꎮ 李飞娜等(２０１７) 从澳门 完善ꎬ也有利于海南西海岸红树植物的保护ꎮ
路氹城生态保护区采集的 １２ 份红树植物样品中 秀丽隐杆线虫( Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ) 是在放
分离得到 １９２ 株内生放线菌ꎬ基因序列相似性低 线菌活性筛选方面应用普遍的模式生物( Ｂｒｅｎｎｅｒ
于 ９８.６％的菌株共有 ２２ 株ꎬ抗菌活性筛选结果显 ｅｔ ａｌ.ꎬ １９７４ꎻ 齐 丽 娟ꎬ ２０１５ꎻ 鞠 守 勇 和 陈 其 国ꎬ
示 ５ 株具有抗菌活性ꎮ 李静等(２０１６) 从海南东寨 ２０１８)ꎮ 现阶段对红树植物样品中分离得到的内

港 １４ 种真红树样品中得到放线菌 １４６ 株ꎬ其中 ４０ 生放线菌活性研究主要集中在抑菌活性、杀虫活
株具有抗菌活性ꎮ Ｊｉａｎｇ ｅｔ ａｌ. (２０１８) 从北仑河口 性和抗肿瘤细胞活性等( Ｋｕｂｏｔａ ｅｔ ａｌ.ꎬ２００４ꎻＷａｎｇ
国家级自然保护区采集的红树林植物样品中分离 ｅｔ ａｌ.ꎬ２０１０ꎻＡｚｍａｎ ｅｔ ａｌ.ꎬ２０１８)ꎬ有关微生物次级
到 １０１ 株放线菌ꎬ隶属于 ２８ 个属ꎮ 可见红树林由 代谢产物抗衰老活性的研究则相对较少( 许敏等ꎬ
于特殊的生长环境ꎬ使得其内生放线菌呈现丰富 ２０１６)ꎮ 本实验利用秀丽隐杆线虫模型研究海南

的多样性ꎬ并具有较强的物种新颖性和生物活性ꎮ 西海岸区域真红树内生放线菌对线虫寿命的影