Page 122 - 《广西植物》2020年第9期
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９ 期 金秋珠等: 产壳聚糖酶内生真菌的筛选、鉴定及酶活力初步研究 １ ３ ３ ７
表 ２ 活性菌株菌落形态及生长直径
Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｌｏｎｉｅｓ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ ｓｔｒａｉｎｓ
菌落特征
培养基 Ｃｏｌｏｎｙ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ 直径
Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｄｉａｍｅｔｅｒ
ｍｅｄｉｕｍ 菌落正面形态 菌落背面形态 (ｃｍ)
Ｆｒｏｎｔａｌ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｃｏｌｏｎｉｅｓ Ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｃｏｌｏｎｉｅｓ
ＰＤＡ 菌落表面呈白色ꎬ质地为短绒毛状ꎬ少量同心环ꎬ 圆心周围颜色较深ꎬ菌落外围颜色变为黄绿色ꎬ具 ４.２９
边缘整齐 有过渡同心环带
Ｗｈｉｔｅ ｃｏｌｏｎｙ ｓｕｒｆａｃｅꎬ ｓｈｏｒｔ ｖｉｌｌｏｕｓ ｔｅｘｔｕｒｅꎬ ａ ｆｅｗ ｃｏｎ￣ Ｔｈｅ ｃｏｌｏｒ ａｒｏｕｎｄ ｔｈｅ ｃｅｎｔｅｒ ｉｓ ｄａｒｋｅｒꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｕｒ￣
ｃｅｎｔｒｉｃ ｒｉｎｇｓꎬ ｎｅａｔ ｅｄｇｅｓ ｒｏｕｎｄｉｎｇ ｃｏｌｏｒ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｌｏｎｙ ｔｕｒｎｓ ｔｏ ｙｅｌｌｏｗ￣ｇｒｅｅｎꎬ
ｗｉｔｈ ａ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｃ ｒｉｎｇ
ＣＡ 菌落表面呈白色ꎬ质地为短绒毛状ꎬ边缘整齐 白色至淡黄色 ４.００
Ｗｈｉｔｅ ｃｏｌｏｎｙ ｓｕｒｆａｃｅꎬ ｓｈｏｒｔ ｖｉｌｌｏｕｓ ｔｅｘｔｕｒｅꎬ ｎｅａｔ ｅｄｇｅｓ Ｗｈｉｔｅ ｔｏ ｌｉｇｈｔ ｙｅｌｌｏｗ
ＣＹＡ 菌落表面呈白色ꎬ质地为短绒毛状ꎬ有大量放射状 黄褐色ꎬ有少量同心环ꎬ环纹颜色较深ꎬ有大量放 ３.９４
沟纹ꎬ边缘整齐 射状皱纹
Ｗｈｉｔｅ ｃｏｌｏｎｙ ｓｕｒｆａｃｅꎬ ｓｈｏｒｔ ｖｉｌｌｏｕｓ ｔｅｘｔｕｒｅꎬ ａ ｌａｒｇｅ Ｙｅｌｌｏｗ￣ｂｒｏｗｎꎬ ｗｉｔｈ ａ ｆｅｗ ｄａｒｋ ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｃ ｒｉｎｇｓ ａｎｄ ａ
ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｒａｄｉａｌ ｇｒｏｏｖｅｓꎬ ｎｅａｔ ｅｄｇｅｓ ｌａｒｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｒａｄｉａｌ ｗｒｉｎｋｌｅｓ
Ｇ２５Ｎ 菌落表面呈白色ꎬ质地为短绒毛状ꎬ边缘整齐 黄绿色ꎬ菌落边缘呈白色 ２.６９
Ｗｈｉｔｅ ｃｏｌｏｎｙ ｓｕｒｆａｃｅꎬ ｓｈｏｒｔ ｖｉｌｌｏｕｓ ｔｅｘｔｕｒｅꎬ ｎｅａｔ ｅｄｇｅｓ Ｙｅｌｌｏｗ￣ｇｒｅｅｎ ｃｏｌｏｎｙ ｗｉｔｈ ｗｈｉｔｅ ｅｄｇｅ
注: 以上为菌株 Ｓｔｄｉｆ９￣４ 在不同培养基上培养 ７ ｄ 的菌落形态图ꎮ
Ｎｏｔｅ: Ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｉｓ ｔｈｅ ｃｏｌｏｎｙ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ Ｓｔｄｉｆ９￣４ ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ ｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｄｉａ ｆｏｒ ７ ｄ.
推测可能因为在发酵初期ꎬ培养基内的营养物质
充裕ꎬ菌体大量繁殖ꎬ产生大量的壳聚糖酶ꎬ后期
由于营养物质的减少及菌体进入衰亡期ꎬ壳聚糖
的产生也随之减少( 熊妍妍等ꎬ２０１８)ꎮ 本文仅研
究了发酵时间对壳聚糖酶活力的影响ꎬ接种量、培
养基各营养成分( 如碳源、氮源等) 以及培养条件
(如温度、ｐＨ 等) 等因素也均可影响壳聚糖酶活
力ꎬ后期可利用单因素实验结合正交实验或响应
面分析等进行综合分析ꎬ以确定最有效促进产壳
聚糖酶活力提高的条件ꎮ
大部分壳聚糖酶活性均 可 受 金 属 离 子 的 影
响ꎮ 本研究使用 ８ 种氯盐分别提供了 ８ 种金属离
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图 ２ 内生真菌 Ｓｔｄｉｆ９￣４ 在 Ｇ２５Ｎ 培养基上 子(Ｎａ 、Ｋ 、Ｃａ 、Ｍｎ 、Ｚｎ 、Ｃｄ 、Ｂａ 及 Ｆｅ ) 和
培养 ３０ ｄ 显微形态图 ＡｇＮＯ 提供 Ａｇ ꎬ考察不同金属离子对酶活力的影
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Ｆｉｇ. ２ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ Ｓｔｄｉｆ９￣４ 响ꎮ 其中ꎬＭｎ 和 Ｃａ 对 Ｓｔｄｉｆ９￣４ 壳聚糖酶活力具
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ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ ｏｎ Ｇ２５Ｎ ｍｅｄｉｕｍ ｆｏｒ ３０ ｄ
有明显的激活作用ꎮ 相似的ꎬ单秋实(２０１５) 研究
发现 金 属 离 子 Ｍｎ 、 Ｃａ 对 来 源 于 土 壤 的 青 霉
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ｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ. Ｓｔｄｉｆ９￣４ 产壳聚糖酶活力在前 ７２ ｈ 均较 (Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ. ＱＳ７)壳聚糖酶活力也具有促进作
低ꎬ７２ ｈ 后迅速增加ꎬ并在 ９６ ｈ 时达到最大值ꎬ随 用ꎻ卓少玲(２０１２) 也发现 Ｃａ 对来源于土壤的青
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后逐渐降低ꎮ 这与张翔等(２０１８)、张子瑞(２０１６) 霉(Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｓｐ. Ｍ￣２) 壳聚糖酶活力具有促进作
报道的结果相似ꎮ 与之相应的ꎬ王钦宏和蔡静平 用ꎮ Ｍｎ 和 Ｃａ 对大多数微生物来源的壳聚糖酶
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(２０００)发现产酶活力最高时ꎬ培养液中活菌数也 活性具有激活作用( 曾嘉ꎬ２００２ꎻ郝日光ꎬ２００５ꎻ段
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达到了最高水平ꎬ并确定 ３ ｄ 为适宜的收获时间ꎮ 妍ꎬ２００６)ꎮ Ｂａ 和重金属离子 Ａｇ 、Ｚｎ 、Ｃｄ 、Ｆｅ
