Page 159 - 《广西植物》2023年第2期
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２ 期 周璇等: 垫状卷柏 ＳｐＬＥＡ１ 基因克隆及干旱胁迫下的表达分析 ３ ５ ３
图 ４ ＳｐＬＥＡ１ 蛋白系统进化分析
Ｆｉｇ. ４ Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＳｐＬＥＡ１ ｐｒｏｔｅｉｎ
动子中的顺式作用元件( 图 ６ꎬ表 ２)ꎬ发现 ＳｐＬＥＡ１
基因启动子区含有核心启动子 ＴＡＴＡ￣ｂｏｘ 和启动 ３ 讨论与结论
子增强子常见顺式作用元件 ＣＡＡＴ￣ｂｏｘꎻ含有光反
应元件(Ｉ￣ｂｏｘ 和 Ｇ￣Ｂｏｘ)和大量与非生物胁迫有关 在本研究中 ＳｐＬＥＡ１ 蛋白保守结构域为 ＬＥＡ￣
的功能性顺式作用元件ꎬ其中有激素类的脱落酸 ５(ＰＦ００４７７)ꎬ属于 ＬＥＡ１ 家族ꎮ 与 ＮＣＢＩ 中已收录
响应元件(ＡＢＲＥ)、茉莉酸甲酯响应元件(ＣＧＴＣＡ￣ 的 １５ 个 ＬＥＡ 蛋白进行序列对比ꎬ发现有 ２ 个保守
ｍｏｔｉｆ 和 ＴＧＡＣＧ￣ｍｏｔｉｆ)、赤 霉 素 响 应 元 件 ( ＧＡＲＥ￣ 序列在 Ｎ 端和 Ｃ 端出现ꎬ这与 Ｂａｔｔａｇｌｉａ 等(２００８)
ｍｏｔｉｆ 和 Ｐ￣ｂｏｘ)、水杨酸响应元件(ＴＣＡ￣ｅｌｅｍｅｎｔ) 及 的报道一致ꎬ在同源进化关系的分析中ꎬ没有检索
辅酶响应元件( ＴＧＡ￣ｅｌｅｍｅｎｔ)ꎬ还包含与干旱胁迫 到与 ＳｐＬＥＡ１ 蛋白相似度高的同属植物ꎬ但发现垫
有关的功能性元件 ＭＹＢ 及参与干旱诱导的 ＭＹＢ 状卷柏 ＳｐＬＥＡ１ 与鹰嘴豆和红车轴草的 Ｌｅａ￣５ 蛋
结合点( ＭＢＳ)ꎮ 根据以上结果可推测ꎬＳｐＬＥＡ１ 基 白同源性较高ꎬ而在研究鹰嘴豆中 ＣａｒＬＥＡ７９３ 和
因的表达对垫状卷柏在干旱环境下的生存能力有 ＣａｒＬＥＡ４ 基因在干旱胁迫下保护植物细胞的分子
显著影响ꎮ 机制ꎬ推进了 ＬＥＡ 蛋白 的 耐 旱 性 研 究 ( 顾 汉 燕ꎬ
２.４ ＳｐＬＥＡ１ 基因 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 分析 ２０１０)ꎮ 对大豆中 ＬＥＡ１ 蛋白结构研究表明ꎬＬＥＡ１
利用 ｑＲＴ￣ＰＣＲ 分析检测垫状卷柏 ＳｐＬＥＡ１ 在 蛋白保守基序 Ｅｍ￣Ｃ 和 Ｅｍ￣２Ｍ 多肽在不同环境中
干旱胁迫下的表达模式ꎮ 由图 ７ 可知ꎬ在自然干 的结构及聚集行为会发生改变ꎬ但都主要以无规
旱时间延长的过程中ꎬＳｐＬＥＡ１ 呈现上调表达趋势ꎬ 则结构形式存在ꎬ这可能与 Ｅｍ 蛋白在不同环境中
在干旱 １２ ｈ 时达到峰值ꎬ后呈现下降趋势ꎬ在干旱 的结构特点及其重要区域在整个蛋白中所起的作
２４ ｈ 后给予复水处理 ２ ｈꎬＳｐＬＥＡ１ 的表达量显著下 用有关 ( 薛 蓉 等ꎬ２０１２)ꎮ 邹 永 东 ( ２０１１) 研 究 发
降ꎮ 根据以上结果可以推测ꎬＳｐＬＥＡ１ 参与了垫状 现ꎬＬＥＡ１ 蛋白在应对不同环境时可以形成不同的
卷柏干旱胁迫的响应ꎮ 空间结构ꎬ 这些特殊的空间结构与 α￣螺旋相互作
