Page 161 - 《广西植物》2023年第2期

２ 期 周璇等: 垫状卷柏 ＳｐＬＥＡ１ 基因克隆及干旱胁迫下的表达分析 ３ ５ ５

方框所框为顺式作用元件ꎻ 黑色加粗的序列为 ＴＡＴＡ￣ｂｏｘꎻ 斜体的序列为 ＣＡＡＴ￣ｂｏｘꎮ
Ｔｈｅ ｂｏｘ ｉｓ ｃｉｓ￣ｅｌｅｍｅｎｔꎻ ｔｈｅ ｂｌａｃｋ ａｎｄ ｂｏｌｄ ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｉｓ ＴＡＴＡ￣ｂｏｘꎻ ｔｈｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｉｎ ｉｔａｌｉｃｓ ｉｓ ＣＡＡＴ￣ｂｏｘ.
图 ６ ＳｐＬＥＡ１ 基因启动子的序列及部分顺式作用元件
Ｆｉｇ. ６ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ ｐａｒｔｉａｌ ｃｉｓ￣ａｃｔｉｎｇ ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ＳｐＬＥＡ１ ｇｅｎｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ

卷柏 ＳｐＬＥＡ１ 基因启动子中的顺式作用元件ꎬ分析
ＳｐＬＥＡ１ 基因 的 转 录 表 达 水 平ꎬ 发 现 了 核 心 元 件
ＴＡＴＡ￣ｂｏｘ 和 ＣＡＡＴ￣ｂｏｘꎬ表明 ＳｐＬＥＡ１ 基因功能可
以稳定表达ꎻ对 ＳｐＬＥＡ１ 基因启动子功能元件进行
分析ꎬ结果表明启动子区中含有大量的诱导型启
动子ꎬ包含 ５ 类激素诱导表达元件和非生物胁迫
诱导表达元件ꎬ其中与水分胁迫有关的元件有 ７
个 ＡＢＲＥ、４ 个 ＭＹＢ 和 ４ 个 ＭＹＣꎬ与实时荧光定量
实验中垫状卷柏在干旱处理后 ＳｐＬＥＡ１ 基因表达
上调的结果相一致ꎬ反映了 ＳｐＬＥＡ１ 基因参与了干
旱胁迫的应答响应ꎮ 但是ꎬ关于 ＳｐＬＥＡ１ 基因抗旱
∗表示与 ０ ｈ 处理相比差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ ０、２、４、１２、２４、
ｒｅ２４ 为植物材料自然干旱处理时间(ｈ)ꎬ其中 ｒｅ２４ 代表干
性的作用机制有待进一步研究ꎮ
旱 ２４ ｈ 后复水 ２ ｈ 的样品数据ꎮ
∗ ｍｅａｎｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ０ ｈ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ (Ｐ< 本研究从垫状卷柏中克隆获得 ＳｐＬＥＡ１ 基因
０.０５). ０ꎬ ２ꎬ ４ꎬ １２ꎬ ２４ꎬ ｒｅ２４ ａｒｅ ｔｈｅ ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｉｍｅｓ ｃＤＮＡ 全 长 序 列ꎬ 通 过 对 其 蛋 白 结 构 分 析 得 出
ｏｆ ｐｌａｎｔ ｍａｔｅｒｉａｌｓ (ｈ)ꎬ ａｍｏｎｇ ｗｈｉｃｈ ｒｅ２４ ｈ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ ｔｈｅ ｄａｔａ ｏｆ
ｓａｍｐｌｅｓ ｒｅｈｙｄｒａｔｅｄ ｆｏｒ ２ ｈ ａｆｔｅｒ ２４ ｈ ｏｆ ｄｅｈｙｄｒａｔｉｏｎ. ＳｐＬＥＡ１ 蛋白为亲水性稳定蛋白ꎮ 根据对 ＳｐＬＥＡ１
图 ７ ＳｐＬＥＡ１ 基因干旱胁迫下的表达 基因启动子的分离克隆和顺式作用元件分析结果
Ｆｉｇ. ７ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＳｐＬＥＡ１ ｇｅｎｅ ｕｎｄｅｒ ｄｒｏｕｇｈｔ ｓｔｒｅｓｓ 推测 ＳｐＬＥＡ１ 基因在垫状卷柏耐旱机制中起作用ꎬ